| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-31页 |
| 1 细胞凋亡及其调控机理的研究意义及其问题 | 第13-17页 |
| 2 细胞核基质在细胞生命活动中的重要作用 | 第17-19页 |
| 3 细胞核基质在细胞凋亡中的变化研究 | 第19-21页 |
| 4 表皮细胞及其凋亡研究的重要理论与实践意义 | 第21-26页 |
| ·表皮细胞的生物学特性 | 第21-23页 |
| ·表皮细胞凋亡的研究 | 第23-26页 |
| ·表皮细胞凋亡研究中所存在的问题 | 第26页 |
| 5 姜黄素及其在细胞凋亡研究中的应用 | 第26-28页 |
| 6 本研究拟解决的具体科学问题及其意义 | 第28-31页 |
| 材料和方法 | 第31-38页 |
| 1 细胞培养与诱导处理 | 第31页 |
| ·细胞培养 | 第31页 |
| ·诱导凋亡物与细胞的诱导凋亡处理 | 第31页 |
| 2 细胞生长曲线的测定 | 第31页 |
| 3 细胞周期测定 | 第31-32页 |
| 4 DNA凝胶电泳检测 | 第32页 |
| 5 光镜显微样品制备与观察 | 第32页 |
| 6 Hoechst荧光染色检测 | 第32-33页 |
| 7 电子显微镜样品制备与观察 | 第33页 |
| ·透射电镜样品制备与观察 | 第33页 |
| ·扫描电镜样品制备及观察 | 第33页 |
| 8 人永生化表皮HaCaT细胞凋亡相关基因免疫细胞化学观察样品制备 | 第33-34页 |
| ·人永生化表皮HaCaT细胞相关促凋亡基因bax、fas产物表达观察样品制备 | 第33-34页 |
| ·人永生化表皮HaCaT细胞相关抑凋亡基因p53、bcl-2产物表达观察样品制备 | 第34页 |
| 9 细胞核基质-中间纤维系统选择性抽提整装光镜和电镜观察样品制备 | 第34-35页 |
| ·核基质—中间纤维(NM-IF)的选择性抽提 | 第34页 |
| ·核基质—中间纤维(NM-IF)的选择性抽提光镜样品的制备与观察 | 第34-35页 |
| ·核基质—中间纤维(NM-IF)的选择性抽提电镜样品的制备与观察 | 第35页 |
| 10 核基质蛋白的双向电泳分析 | 第35-36页 |
| ·核基质蛋白的提取 | 第35页 |
| ·双向凝胶电泳分析 | 第35-36页 |
| 11 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱分析(MATRIX—ASSISTED LASER DESORPTION/IONIZATION TIME OF FLIGHT,MALDE-TOF-MS) | 第36-37页 |
| ·质谱样品制备 | 第36-37页 |
| ·质谱分析 | 第37页 |
| 12 蛋白质数据库查询 | 第37-38页 |
| 实验结果 | 第38-54页 |
| 1 姜黄素对人永生化表皮HaCaT细胞凋亡的诱导作用 | 第38-44页 |
| ·姜黄素对人永生化表皮HaCaT细胞增殖和细胞周期的影响 | 第38-40页 |
| ·姜黄素对HaCaT细胞形态与超微结构变化的影响 | 第40-41页 |
| ·姜黄素对HaCaT细胞DNA的降解作用 | 第41-42页 |
| ·姜黄素对HaCaT细胞p53、bcl-2、bax和fas等凋亡相关基因表达的影响 | 第42-44页 |
| 2 姜黄素对人永生化表皮细胞HaCaT细胞核基质-之间纤维系统构型变化的影响 | 第44-45页 |
| ·核基质 | 第44页 |
| ·核纤层 | 第44页 |
| ·中间纤维 | 第44-45页 |
| 3 姜黄素对人HaCaT细胞核基质蛋白表达的影响 | 第45-54页 |
| ·双向凝胶电泳分析 | 第45-46页 |
| ·差异表达核基质蛋白的MALDI-TOF质谱和肽指纹鉴定结果 | 第46-54页 |
| 讨论 | 第54-73页 |
| 1 姜黄素对人永生化表皮HaCaT细胞凋亡的诱导作用 | 第54-59页 |
| ·姜黄素对HaCaT细胞增殖的抑制与细胞周期的影响 | 第54-55页 |
| ·姜黄素对HaCaT细胞形态与超微结构的影响 | 第55-56页 |
| ·姜黄素对HaCaT细胞核以及DNA的影响 | 第56-57页 |
| ·姜黄素对HaCaT细胞相关凋亡基因的作用 | 第57-59页 |
| 2 姜黄素对人永生化表皮HaCaT细胞核基质—中间纤维系统构型变化的影响 | 第59-62页 |
| 3 人永生化表皮HaCaT细胞凋亡过程中核基质蛋白组成的变化 | 第62-63页 |
| 4 差异核基质蛋白在人永生化表皮HaCaT细胞凋亡过程中的功能作用 | 第63-70页 |
| ·核基质结构蛋白 Vimentin和Actin | 第63-64页 |
| ·Lamin | 第64-65页 |
| ·Apoptosis-inducing factor | 第65-66页 |
| ·Protein Kinase D3(PKD3) | 第66-67页 |
| ·Hsp90 | 第67-68页 |
| ·Nup107 | 第68-69页 |
| ·其它 | 第69-70页 |
| 小结: | 第70页 |
| 5 特异核基质蛋白在HaCaT细胞诱导凋亡中的调控作用 | 第70-73页 |
| 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-84页 |
| 图版说明 | 第84-94页 |
| 附录 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
