| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-31页 |
| ·生物拆分的意义与原理 | 第11-14页 |
| ·生物拆分的意义 | 第11-12页 |
| ·生物拆分的原理 | 第12-14页 |
| ·Burkholderia sp.酯水解酶研究背景 | 第14-18页 |
| ·Burkholderia sp. 酯酶/脂肪酶的应用研究 | 第14-15页 |
| ·Burkholderia sp.酯酶催化酯水解反应机制 | 第15-16页 |
| ·Burkholderia sp. 酯酶的分离纯化 | 第16-18页 |
| ·薄荷醇的性质及用途 | 第18-19页 |
| ·d-薄荷醇与l-薄荷醇的主要区别 | 第19页 |
| ·主要应用 | 第19页 |
| ·薄荷醇的制备方法及工艺 | 第19-23页 |
| ·物理方法 | 第19-20页 |
| ·化学方法 | 第20-23页 |
| ·生物催化合成 | 第23页 |
| ·薄荷醇的手性拆分 | 第23-26页 |
| ·利用光学活性试剂拆分 | 第23页 |
| ·利用非光学活性试剂拆分 | 第23-24页 |
| ·生物拆分 | 第24-26页 |
| ·国际上dl-薄荷醇的代表性生物拆分工艺 | 第26-29页 |
| ·南非CSIR 公司 | 第26-27页 |
| ·德国Haarmann-Reimer 公司 | 第27-28页 |
| ·酶促酯化/转酯化方法与酶促水解方法比较 | 第28-29页 |
| ·立题的背景与意义 | 第29-30页 |
| ·立题的背景 | 第29-30页 |
| ·立题的意义 | 第30页 |
| ·论文主要工作 | 第30-31页 |
| 第二章 高效水解l-乙酸薄荷酯立体选择性酯酶产酶微生物筛选 | 第31-48页 |
| ·前言 | 第31-32页 |
| ·实验材料 | 第32-33页 |
| ·菌种来源 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·主要仪器设备 | 第32-33页 |
| ·培养基配制 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-36页 |
| ·d-乙酸薄荷酯、dl-乙酸薄荷酯的制备 | 第33-34页 |
| ·分析方法 | 第34-35页 |
| ·乙酸薄荷酯水解酶产生菌的筛选 | 第35-36页 |
| ·细胞干重的测定 | 第36页 |
| ·不同有机溶剂对萃取率的影响 | 第36页 |
| ·电镜条件 | 第36页 |
| ·结果与讨论 | 第36-47页 |
| ·d-乙酸薄荷酯、dl-乙酸薄荷酯的制备 | 第36-37页 |
| ·气相色谱条件的选择 | 第37-40页 |
| ·最佳萃取溶剂的选择 | 第40-41页 |
| ·乙酸薄荷酯水解菌株的筛选 | 第41-44页 |
| ·B. cepacia ATCC 25416 传代稳定性考察 | 第44-45页 |
| ·B. cepacia ATCC 25416 在批式反应中的催化稳定性 | 第45-46页 |
| ·B. cepacia 水解酶与商品化水解酶比较 | 第46页 |
| ·B. cepacia ATCC 25416 的菌落形态及电镜照片 | 第46-47页 |
| ·本章小结 | 第47-48页 |
| 第三章 B. cepacia 发酵产l-乙酸薄荷酯水解酶过程研究 | 第48-65页 |
| ·前言 | 第48-49页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·菌种 | 第49页 |
| ·培养基 | 第49页 |
| ·主要仪器设备 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-51页 |
| ·菌种的培养 | 第49页 |
| ·干细胞的制备 | 第49页 |
| ·细胞干重的测定 | 第49页 |
| ·残糖含量的测定 | 第49页 |
| ·微生物细胞催化的不对称水解反应 | 第49-50页 |
| ·反应产物光学纯度及反应转化率的测定 | 第50页 |
| ·酶活测定方法 | 第50页 |
| ·实验设计 | 第50-51页 |
| ·结果与讨论 | 第51-64页 |
| ·培养基组成对菌体产胞内l-乙酸薄荷酯水解酶的影响 | 第51-60页 |
| ·环境条件对菌体产整细胞l-乙酸薄荷酯水解酶的影响 | 第60-62页 |
| ·B. cepacia ATCC 25416 生长及产酶的时间进程 | 第62-64页 |
| ·本章小结 | 第64-65页 |
| 第四章 B. cepacia 立体选择性酯酶同工酶的分离纯化 | 第65-79页 |
| ·前言 | 第65页 |
| ·实验材料 | 第65-67页 |
| ·试剂 | 第65-66页 |
| ·菌种 | 第66页 |
| ·培养基 | 第66页 |
| ·溶液配制 | 第66页 |
| ·主要设备 | 第66-67页 |
| ·实验方法 | 第67-70页 |
| ·菌种的培养 | 第67页 |
| ·反应产物光学纯度及反应转化率的测定 | 第67页 |
| ·酶活力测定方法 | 第67页 |
| ·粗酶底物特异性的测定方法 | 第67-68页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第68页 |
| ·蛋白质转膜 | 第68页 |
| ·l-乙酸薄荷酯水解酶的纯化 | 第68-69页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第69页 |
| ·蛋白分子量测定 | 第69页 |
| ·N-末端氨基酸序列的测定 | 第69-70页 |
| ·结果与讨论 | 第70-77页 |
| ·B. cepacia 立体选择性水解酶胞内外分布的测定 | 第70-71页 |
| ·硫铵饱和度的确定 | 第71页 |
| ·粗酶的底物特异性 | 第71-72页 |
| ·疏水柱层析 | 第72-74页 |
| ·同工酶Est1 的分离纯化 | 第74-75页 |
| ·同工酶Est2 的分离纯化 | 第75-77页 |
| ·本章小结 | 第77-79页 |
| 第五章 立体选择性酯酶同工酶的酶学性质研究 | 第79-91页 |
| ·前言 | 第79-80页 |
| ·实验材料 | 第80页 |
| ·水解酶 | 第80页 |
| ·试剂 | 第80页 |
| ·实验方法 | 第80-81页 |
| ·酶最适反应pH 及pH 稳定性的测定 | 第80页 |
| ·酶最适反应温度及温度稳定性的测定 | 第80页 |
| ·金属离子、螯合剂等的影响 | 第80-81页 |
| ·表面活性剂、抑制剂的影响 | 第81页 |
| ·酶的三油酸甘油酯位置选择性 | 第81页 |
| ·酶的芳香族脂肪酸酯链长专一性 | 第81页 |
| ·酶的羧基薄荷酯立体专一性 | 第81页 |
| ·结果与讨论 | 第81-89页 |
| ·pH 对同工酶酶活力的影响 | 第81-82页 |
| ·pH 对同工酶酶稳定性的影响 | 第82-83页 |
| ·温度对同工酶酶活力的影响 | 第83页 |
| ·温度对同工酶酶稳定性的影响 | 第83-84页 |
| ·金属离子、螯合剂的影响 | 第84-85页 |
| ·表面活性剂、抑制剂的影响 | 第85-86页 |
| ·三油酸甘油酯位置选择性 | 第86-87页 |
| ·芳香族脂肪酸酯链长专一性 | 第87页 |
| ·羧基薄荷酯立体专一性 | 第87-88页 |
| ·B. cepacia 胞内酯酶同工酶Est1、Est2 比较 | 第88-89页 |
| ·Est1 与Est2 N 端氨基酸序列同源性比较 | 第89页 |
| ·本章小结 | 第89-91页 |
| 第六章 B. cepacia 整细胞催化dl-乙酸薄荷酯水解反应过程研究 | 第91-105页 |
| ·前言 | 第91页 |
| ·实验材料 | 第91页 |
| ·菌种 | 第91页 |
| ·培养基 | 第91页 |
| ·主要试剂 | 第91页 |
| ·主要仪器、设备 | 第91页 |
| ·实验方法 | 第91-93页 |
| ·菌种的培养 | 第91-92页 |
| ·干细胞的制备 | 第92页 |
| ·反应介质的选取 | 第92页 |
| ·反应助溶剂的选取 | 第92页 |
| ·最适反应pH 实验 | 第92页 |
| ·最适干细胞量实验 | 第92页 |
| ·最适底物浓度实验 | 第92页 |
| ·最适温度实验 | 第92页 |
| ·最适搅拌转速实验 | 第92页 |
| ·最适反应时间实验 | 第92页 |
| ·反应产物光学纯度及反应转化率的测定 | 第92页 |
| ·反应初速度的测定 | 第92页 |
| ·l-薄荷醇的分离提取 | 第92-93页 |
| ·l-薄荷醇的鉴定 | 第93页 |
| ·薄荷醇旋光度的测定 | 第93页 |
| ·结果与讨论 | 第93-103页 |
| ·整细胞催化不对称水解反应体系的建立 | 第93-96页 |
| ·整细胞催化不对称水解反应条件的研究 | 第96-99页 |
| ·产物浓度对整细胞催化的不对称水解反应的影响 | 第99-100页 |
| ·l-薄荷醇的分离提取及鉴定 | 第100-103页 |
| ·本章小结 | 第103-105页 |
| 结论与展望 | 第105-107页 |
| 论文创新点 | 第107-108页 |
| 致谢 | 第108-109页 |
| 参考文献 | 第109-120页 |
| 附录：作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第120页 |
