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致病疫霉诱导的番茄SlPhMYB1基因的克隆及分析

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
引言第11-12页
1 绪论第12-28页
   ·番茄病害第12-13页
     ·晚疫病致病菌第12页
     ·番茄抗晚疫病研究第12-13页
   ·植物抗病反应及机制第13-16页
     ·植物抗病反应的基本概念第13-14页
     ·植物抗病机制第14-15页
     ·诱导抗性可能的信号途径第15-16页
   ·植物转录因子的研究第16-22页
     ·植物抗逆转录因子的研究进展第16-19页
     ·MYB类转录因子研究第19-20页
     ·植物MYB类转录因子的功能第20-22页
     ·番茄中MYB基因研究进展第22页
   ·植物转录因子基因的克隆第22-24页
     ·文库筛选法第22-23页
     ·基于序列同源的PCR扩增克隆法第23页
     ·转座子标签法与RNA差异显示法相结合的克隆方法第23-24页
     ·酵母单杂交法第24页
   ·植物转录因子功能分析方法第24-27页
     ·植物转录因子瞬间表达法第24-25页
     ·突变体或转基因植株功能分析第25-27页
   ·研究目的及意义第27-28页
2 番茄晚疫病菌的特性分析及其对番茄最佳诱导条件的摸索第28-40页
   ·材料与仪器第28页
     ·植物材料第28页
     ·病菌材料第28页
     ·实验仪器第28页
   ·实验方法第28-31页
     ·病菌的生物学特性分析第28-29页
     ·病菌对番茄最佳诱导条件摸索第29-31页
   ·结果与分析第31-39页
     ·病菌的生物学特性第31-34页
     ·病菌对番茄最佳诱导条件调查结果第34-38页
     ·讨论第38-39页
   ·小结第39-40页
3 MYB基因的克隆及病菌对其诱导表达模式的分析第40-54页
   ·实验材料及仪器第40页
     ·实验材料第40页
     ·实验仪器及试剂第40页
   ·实验方法第40-46页
     ·番茄RNA提取第40-41页
     ·SlPhMYB1、SlPhMYB2基因全长的克隆第41-45页
     ·MYB基因的生物信息学分析第45页
     ·SlPhMYB1、SlPhMYB2基因及PR1基因表达模式分析第45-46页
     ·SlPhMYB1、SlPhMYB2基因组织特性分析第46页
   ·结果与分析第46-53页
     ·番茄RNA的提取第46页
     ·SlPhMYB1、SlPhMYB2基因全长的克隆及序列分析第46-48页
     ·S1PhMYB1、S1PhMYB2转录因子同源性分析第48-49页
     ·SlPhMYB1、SlPhMYB2基因及PR1基因的表达模式分析第49-51页
     ·SlPhMYB1、SlPhMYB2基因的组织特性分析第51-52页
     ·讨论第52-53页
   ·小结第53-54页
4 植物表达载体的构建及其功能分析第54-65页
   ·实验材料与试剂第54页
     ·实验材料第54页
     ·实验试剂第54页
   ·实验方法第54-57页
     ·SlPhMYB1转录因子植物表达载体的构建第54-55页
     ·工程菌的获得第55-56页
     ·SlPhMYB1保守域转化烟草第56页
     ·再生植株的分子检测第56-57页
     ·转基因烟草的耐盐性、耐旱性及抗病性分析第57页
     ·PR1表达量的检测第57页
   ·结果与分析第57-64页
     ·构建的植物表达载体第57-59页
     ·转SlPhMYB1基因烟草的检测第59-61页
     ·转基因烟草的耐盐性、耐旱性检测第61-63页
     ·转基因烟草的抗病性检测第63页
     ·PR1基因的检测第63-64页
     ·讨论第64页
   ·小结第64-65页
5 转基因烟草生理研究第65-71页
   ·实验材料及仪器第65页
     ·实验材料第65页
     ·实验仪器第65页
   ·实验方法第65-66页
     ·实验材料处理第65页
     ·超氧化物歧化酶(SOD)活性的测量第65页
     ·过氧化物酶(POD)活性的测量第65页
     ·苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的测量第65页
     ·丙二醛(MDA)含量的测量第65-66页
     ·叶片光合参数(Pn、E、Ci)的测量第66页
   ·结果与分析第66-70页
     ·病菌诱导后SOD活性变化第66-67页
     ·病菌诱导后POD活性变化第67页
     ·病菌诱导后PAL活性变化第67-68页
     ·病菌诱导后MDA含量的变化第68-69页
     ·病菌诱导后光合参数的变化第69页
     ·讨论第69-70页
   ·小结第70-71页
结论第71-72页
参考文献第72-78页
附录A 培养基配方第78-79页
附录B 电泳用DNA Marker第79页
附录C 论文中所用质粒图谱第79-80页
附录D SIPhMYB1序列及其对应的氨基酸第80-81页
附录E SIPhMYB2序列及其对应的氨基酸第81-82页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第82-83页
致谢第83-84页

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