摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
引言 | 第12-14页 |
第一篇 文献综述 | 第14-27页 |
第一章 猪戊型肝炎病毒研究进展 | 第14-27页 |
·形态特征 | 第15页 |
·理化特性 | 第15页 |
·HEV 分类地位 | 第15页 |
·HEV 基因组结构 | 第15-19页 |
·戊型肝炎的流行病学 | 第19-21页 |
·细胞培养 | 第21-24页 |
·原代细胞 | 第22页 |
·二倍体细胞 | 第22页 |
·传代细胞 | 第22-24页 |
·HEV 诊断 | 第24-25页 |
·电镜检测 | 第24页 |
·免疫学诊断 | 第24-25页 |
·分子生物学诊断 | 第25页 |
·免疫和防制 | 第25-27页 |
·关于免疫球蛋白预防研究 | 第25页 |
·HEV 候选疫苗的筛选和血清的预防研究 | 第25-27页 |
第二篇 研究内容 | 第27-59页 |
第一章 猪戊型肝炎病毒的分离与鉴定 | 第27-36页 |
·实验材料与方法 | 第27-33页 |
·主要试剂与器材 | 第27-28页 |
·HEV 病毒RNA 的分离与鉴定 | 第28-33页 |
·结果 | 第33-34页 |
·分离与鉴定结果 | 第33-34页 |
·目的基因片段 | 第34页 |
·讨论 | 第34页 |
·小结 | 第34-36页 |
第二章 猪戊型肝炎病毒全基因序列的扩增与分析 | 第36-49页 |
·材料与方法 | 第36-44页 |
·主要试剂与器材 | 第36-38页 |
·末端快速扩增方法(RACE) | 第38-41页 |
·HE2.HE3.HE4.HE5.HE6 DNA 片段扩增 | 第41-43页 |
·PCR 产物的克隆及测序 | 第43-44页 |
·结果 | 第44-46页 |
·RT-nPCR 扩增结果 | 第44-45页 |
·序列测定和比较分析 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46-48页 |
·小结 | 第48-49页 |
第三章 猪戊型肝炎病毒swCH189 株衣壳蛋白基因 ORF2 部分片段的原核表达 | 第49-59页 |
·材料与方法 | 第49-53页 |
·主要试剂与器材 | 第49-50页 |
·扩增 CP239 片段 | 第50-53页 |
·目的基因片段的诱导表达 | 第53-58页 |
·表达质粒转化表达宿主菌 Rosetta | 第53页 |
·工程菌的小量表达 | 第53-54页 |
·诱导表达条件的优化 | 第54页 |
·确定表达产物在细胞内存在形式 | 第54-55页 |
·表达及菌体处理方法 | 第55页 |
·SDS 聚丙烯酞胺凝胶电泳 | 第55-56页 |
·目的基因片段表达产物的纯化 | 第56页 |
·Western blot 检测 | 第56-58页 |
·讨论 | 第58页 |
·小结 | 第58-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
附录一(HEV swCH189 株基因全序列) | 第68-71页 |
附录二(ORF1,ORF2,ORF3 编码氨基酸) | 第71-74页 |
附录三(ORF2 与 ORF3 潜在抗原位点分析图) | 第74-75页 |
导师简介 | 第75-76页 |
致谢 | 第76页 |