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猪戊型肝炎病毒swCH189株全基因组序列克隆及ORF2的原核表达

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
引言第12-14页
第一篇 文献综述第14-27页
 第一章 猪戊型肝炎病毒研究进展第14-27页
   ·形态特征第15页
   ·理化特性第15页
   ·HEV 分类地位第15页
   ·HEV 基因组结构第15-19页
   ·戊型肝炎的流行病学第19-21页
   ·细胞培养第21-24页
     ·原代细胞第22页
     ·二倍体细胞第22页
     ·传代细胞第22-24页
   ·HEV 诊断第24-25页
     ·电镜检测第24页
     ·免疫学诊断第24-25页
     ·分子生物学诊断第25页
   ·免疫和防制第25-27页
     ·关于免疫球蛋白预防研究第25页
     ·HEV 候选疫苗的筛选和血清的预防研究第25-27页
第二篇 研究内容第27-59页
 第一章 猪戊型肝炎病毒的分离与鉴定第27-36页
   ·实验材料与方法第27-33页
     ·主要试剂与器材第27-28页
     ·HEV 病毒RNA 的分离与鉴定第28-33页
   ·结果第33-34页
     ·分离与鉴定结果第33-34页
     ·目的基因片段第34页
   ·讨论第34页
   ·小结第34-36页
 第二章 猪戊型肝炎病毒全基因序列的扩增与分析第36-49页
   ·材料与方法第36-44页
     ·主要试剂与器材第36-38页
     ·末端快速扩增方法(RACE)第38-41页
     ·HE2.HE3.HE4.HE5.HE6 DNA 片段扩增第41-43页
     ·PCR 产物的克隆及测序第43-44页
   ·结果第44-46页
     ·RT-nPCR 扩增结果第44-45页
     ·序列测定和比较分析第45-46页
   ·讨论第46-48页
   ·小结第48-49页
 第三章 猪戊型肝炎病毒swCH189 株衣壳蛋白基因 ORF2 部分片段的原核表达第49-59页
   ·材料与方法第49-53页
     ·主要试剂与器材第49-50页
     ·扩增 CP239 片段第50-53页
   ·目的基因片段的诱导表达第53-58页
     ·表达质粒转化表达宿主菌 Rosetta第53页
     ·工程菌的小量表达第53-54页
     ·诱导表达条件的优化第54页
     ·确定表达产物在细胞内存在形式第54-55页
     ·表达及菌体处理方法第55页
     ·SDS 聚丙烯酞胺凝胶电泳第55-56页
     ·目的基因片段表达产物的纯化第56页
     ·Western blot 检测第56-58页
   ·讨论第58页
   ·小结第58-59页
结论第59-60页
参考文献第60-68页
附录一(HEV swCH189 株基因全序列)第68-71页
附录二(ORF1,ORF2,ORF3 编码氨基酸)第71-74页
附录三(ORF2 与 ORF3 潜在抗原位点分析图)第74-75页
导师简介第75-76页
致谢第76页

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