| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 第一篇 文献综述 | 第14-27页 |
| 第一章 猪戊型肝炎病毒研究进展 | 第14-27页 |
| ·形态特征 | 第15页 |
| ·理化特性 | 第15页 |
| ·HEV 分类地位 | 第15页 |
| ·HEV 基因组结构 | 第15-19页 |
| ·戊型肝炎的流行病学 | 第19-21页 |
| ·细胞培养 | 第21-24页 |
| ·原代细胞 | 第22页 |
| ·二倍体细胞 | 第22页 |
| ·传代细胞 | 第22-24页 |
| ·HEV 诊断 | 第24-25页 |
| ·电镜检测 | 第24页 |
| ·免疫学诊断 | 第24-25页 |
| ·分子生物学诊断 | 第25页 |
| ·免疫和防制 | 第25-27页 |
| ·关于免疫球蛋白预防研究 | 第25页 |
| ·HEV 候选疫苗的筛选和血清的预防研究 | 第25-27页 |
| 第二篇 研究内容 | 第27-59页 |
| 第一章 猪戊型肝炎病毒的分离与鉴定 | 第27-36页 |
| ·实验材料与方法 | 第27-33页 |
| ·主要试剂与器材 | 第27-28页 |
| ·HEV 病毒RNA 的分离与鉴定 | 第28-33页 |
| ·结果 | 第33-34页 |
| ·分离与鉴定结果 | 第33-34页 |
| ·目的基因片段 | 第34页 |
| ·讨论 | 第34页 |
| ·小结 | 第34-36页 |
| 第二章 猪戊型肝炎病毒全基因序列的扩增与分析 | 第36-49页 |
| ·材料与方法 | 第36-44页 |
| ·主要试剂与器材 | 第36-38页 |
| ·末端快速扩增方法(RACE) | 第38-41页 |
| ·HE2.HE3.HE4.HE5.HE6 DNA 片段扩增 | 第41-43页 |
| ·PCR 产物的克隆及测序 | 第43-44页 |
| ·结果 | 第44-46页 |
| ·RT-nPCR 扩增结果 | 第44-45页 |
| ·序列测定和比较分析 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| ·小结 | 第48-49页 |
| 第三章 猪戊型肝炎病毒swCH189 株衣壳蛋白基因 ORF2 部分片段的原核表达 | 第49-59页 |
| ·材料与方法 | 第49-53页 |
| ·主要试剂与器材 | 第49-50页 |
| ·扩增 CP239 片段 | 第50-53页 |
| ·目的基因片段的诱导表达 | 第53-58页 |
| ·表达质粒转化表达宿主菌 Rosetta | 第53页 |
| ·工程菌的小量表达 | 第53-54页 |
| ·诱导表达条件的优化 | 第54页 |
| ·确定表达产物在细胞内存在形式 | 第54-55页 |
| ·表达及菌体处理方法 | 第55页 |
| ·SDS 聚丙烯酞胺凝胶电泳 | 第55-56页 |
| ·目的基因片段表达产物的纯化 | 第56页 |
| ·Western blot 检测 | 第56-58页 |
| ·讨论 | 第58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 附录一(HEV swCH189 株基因全序列) | 第68-71页 |
| 附录二(ORF1,ORF2,ORF3 编码氨基酸) | 第71-74页 |
| 附录三(ORF2 与 ORF3 潜在抗原位点分析图) | 第74-75页 |
| 导师简介 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |