中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-13页 |
1 前言 | 第13-27页 |
·体细胞核移植技术研究简介 | 第13-14页 |
·体细胞核移植技术程序 | 第14-19页 |
·供体细胞的选择和准备 | 第14-16页 |
·受体细胞的选择和准备 | 第16-17页 |
·细胞核移植方法 | 第17-18页 |
·重构胚的激活 | 第18-19页 |
·重构胚的培养 | 第19页 |
·猪体细胞核移植效率研究进展 | 第19页 |
·体细胞核移植重编程与组蛋白乙酰化修饰 | 第19-23页 |
·组蛋白的乙酰化与去乙酰化 | 第19-21页 |
·重编程与组蛋白乙酰化 | 第21-23页 |
·外源转基因沉默与组蛋白乙酰化 | 第23页 |
·体细胞核移植技术的应用 | 第23-26页 |
·生殖性克隆 | 第24页 |
·治疗性克隆 | 第24-26页 |
·本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
2 材料与方法 | 第27-32页 |
·实验材料 | 第27-29页 |
·猪卵巢 | 第27页 |
·试剂 | 第27页 |
·主要器材 | 第27-28页 |
·缓冲液及主要试剂的配制 | 第28-29页 |
·实验方法 | 第29-32页 |
·卵母细胞的采集 | 第29页 |
·卵母细胞的体外成熟 | 第29页 |
·核供体细胞的准备 | 第29-30页 |
·体细胞核移植 | 第30页 |
·重构胚药物处理与胚胎培养 | 第30页 |
·重构胚的体外发育统计与分析 | 第30页 |
·胚胎Hoechst 33342 染色及eGFP 观测 | 第30页 |
·胚胎eGFP 基因mRNA 表达的RT-PCR 分析 | 第30-32页 |
3 结果与分析 | 第32-42页 |
·不同浓度TSA 对猪核移植胚胎发育的影响 | 第32-34页 |
·TSA 不同处理时间对猪核移植胚胎发育的影响 | 第34页 |
·TSA 对不同供核细胞构建的重构胚发育的影响 | 第34-38页 |
·TSA 对同种核移植重构胚发育的影响 | 第34-35页 |
·TSA 对人猪异种核移植重构胚发育的影响 | 第35-38页 |
·TSA 对eGFP 转基因体细胞核移植胚胎发育及eGFP 表达的影响 | 第38-42页 |
·不同浓度TSA 处理12h 对eGFP 转基因体细胞核移植胚胎发育的影响 | 第38-39页 |
·TSA 对eGFP 转基因体细胞核移植胚胎发育的影响 | 第39页 |
·TSA 对转基因体细胞核移植胚胎eGFP 表达的影响 | 第39-42页 |
4 讨论 | 第42-45页 |
·TSA 处理浓度对重构胚发育的影响 | 第42页 |
·TSA 处理时间对重构胚发育的影响 | 第42-43页 |
·供体细胞遗传背景对重构胚发育的影响 | 第43页 |
·TSA 对异种核移植重构胚发育的影响 | 第43-44页 |
·外源转基因的重编程 | 第44-45页 |
5 结论 | 第45-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-55页 |
附录 | 第55-57页 |
攻读硕士学位期间发表的文章 | 第57页 |