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CADM1对卵巢癌的影响及机制研究

中文摘要第3-5页
Abstract第5-7页
第一章 前言第13-28页
    1.1 肿瘤第13-14页
        1.1.1 良性肿瘤第13页
        1.1.2 原位肿瘤第13页
        1.1.3 恶性肿瘤第13-14页
    1.2 卵巢肿瘤第14页
    1.3 卵巢癌第14-17页
        1.3.1 卵巢上皮性癌第15-16页
        1.3.2 非卵巢上皮性恶性肿瘤第16-17页
            1.3.2.1 性索间质肿瘤第16页
            1.3.2.2 生殖细胞肿瘤第16-17页
    1.4 细胞粘附分子第17-20页
        1.4.1 细胞黏附分子的结构第17-18页
        1.4.2 细胞黏附分子的种类第18-20页
    1.5 细胞黏附分子与肿瘤第20-23页
        1.5.1 钙粘素与肿瘤第21页
        1.5.2 选择素与肿瘤第21-22页
        1.5.3 免疫球蛋白超家族细胞粘附分子与肿瘤第22-23页
        1.5.4 整合素与肿瘤第23页
    1.6 细胞粘附分子与卵巢癌第23-25页
    1.7 细胞粘附分子1(CADM1)第25-26页
        1.7.1 CADM1 与肺癌第26页
    1.8 研究目的与意义第26-28页
第二章 CADM1 与卵巢癌的发展和临床预后关系第28-45页
    2.1 实验材料第28-30页
        2.1.1 患者和病例组织样本第28-29页
        2.1.2 实验试剂第29页
        2.1.3 主要实验仪器第29-30页
        2.1.4 实验材料第30页
    2.2 实验方法第30-34页
        2.2.1 卵巢肿瘤组织取材第30页
        2.2.2 免疫组化检测的CADM1 的表达第30-32页
            2.2.2.1 石蜡标本处理第30-31页
            2.2.2.2 免疫组化程序第31-32页
        2.2.3 Western bloting检测肿瘤组织CADM1、MPP6、MPP2、MMP9 等蛋白的表达第32-34页
            2.2.3.1 卵巢肿瘤组织总蛋白的提取第32-33页
            2.2.3.2 Western blot实验检测目的蛋白的表达第33-34页
        2.2.4 统计学分析第34页
    2.3 实验结果第34-41页
        2.3.1 基本情况第34页
        2.3.2 卵巢癌TNM分类第34-35页
        2.3.3 卵巢肿瘤病理组织学分类与CADM1 的表达第35-36页
        2.3.4 卵巢肿瘤CADM1 表达的比较第36-37页
        2.3.5 卵巢肿瘤组织CADM1、MPP6、MMP2、MMP9 蛋白的表达第37-40页
        2.3.6 卵巢肿瘤组织CADM1 的表达与生存时间的关系第40-41页
    2.4 讨论第41-45页
        2.4.1 卵巢癌的发生和转移第41-42页
        2.4.2 CADM1 对卵巢癌的影响第42-45页
第三章 过表达及沉默表达CADM1对卵巢癌细胞生物学行为的影响第45-80页
    3.1 实验材料第45-49页
        3.1.1 实验细胞第45-46页
        3.1.2 实验试剂第46-47页
        3.1.3 主要实验仪器第47-48页
        3.1.4 实验材料第48-49页
    3.2 实验方法第49-64页
        3.2.1 细胞培养第49页
        3.2.2 qRT-PCR检测CADM1 mRNA表达第49-51页
        3.2.3 慢病毒CADM1 过表达载体的构建第51-56页
        3.2.4 慢病毒CADM1 基因沉默表达载体的构建第56-60页
        3.2.5 慢病毒载体感染细胞第60-61页
        3.2.6 细胞增殖检测第61页
        3.2.7 流式细胞仪检测细胞凋亡第61-62页
        3.2.8 细胞克隆形成检测第62页
        3.2.9 细胞Transwell实验第62-63页
        3.2.10 细胞划痕实验第63-64页
        3.2.11 统计学分析第64页
    3.3 实验结果第64-77页
        3.3.1 细胞筛选第64-66页
        3.3.2 CADM1 过表达载体对卵巢癌ES-2 细胞生物行为学的影响第66-72页
            3.3.2.1 CADM1 过表达载体的构建及PCR测定的结果第66页
            3.3.2.2 CADM1 过表达载体感染ES-2 细胞病毒滴度荧光的观察第66-67页
            3.3.2.3 CADM1 过表达载体感染ES-2 细胞后CADM1mRNA的表达第67页
            3.3.2.4 CADM1 过表达对ES-2 细胞活性的影响第67-68页
            3.3.2.5 CADM1 过表达载体感染ES-2 细胞后的凋亡情况第68-69页
            3.3.2.6 CADM1 过表达对ES-2 细胞后克隆形成的影响第69-70页
            3.3.2.7 CADM1 过表达对ES-2 细胞侵袭能力的影响第70-71页
            3.3.2.8 CADM1 过表达对ES-2 细胞迁移能力的影响第71-72页
        3.3.3 CADM1 沉默表达载体对卵巢癌HO-8910 细胞生物行为学的影响..第72-77页
            3.3.3.1 CADM1 沉默表达载体的构建第72页
            3.3.3.2 CADM1 沉默表达载体感染HO-8910 细胞病毒滴度荧光的观察第72-73页
            3.3.3.3 CADM1 沉默表达载体感染HO-8910 细胞后CADM1 mRNA的表达第73-74页
            3.3.3.4 CADM1 沉默表达对HO-8910 细胞活性的影响第74-75页
            3.3.3.5 CADM1 沉默表达载体感染HO-8910 细胞后的凋亡情况第75页
            3.3.3.6 CADM1 沉默表达对HO-8910 细胞后克隆形成的影响第75-76页
            3.3.3.7 CADM1 沉默表达对HO-8910 细胞侵袭能力的影响第76-77页
            3.3.3.8 CADM1 沉默表达对HO-8910 细胞迁移能力的影响第77页
    3.4 讨论第77-80页
        3.4.1 慢病毒表达载体的构建第77-78页
        3.4.2 慢病毒表达载体感染卵巢癌细胞后对细胞生物学行为的影响第78-80页
第四章 过表达CADM1 对卵巢癌细胞基因表达的影响第80-102页
    4.1 实验材料第80页
        4.1.1 实验细胞第80页
        4.1.2 实验试剂第80页
        4.1.3 主要实验仪器第80页
        4.1.4 实验材料第80页
    4.2 实验方法第80-83页
        4.2.1 细胞培养第80页
        4.2.2 qRT-PCR检测mRNA表达第80-81页
        4.2.3 慢病毒CADM1 过表达载体制备第81页
        4.2.4 高通量基因表达芯片检测第81-82页
        4.2.5 RT-qPCR验证基因芯片结果第82页
        4.2.6 统计学分析第82-83页
    4.3 实验结果第83-95页
        4.3.1 芯片数据的质量评估第83-86页
            4.3.1.1 信号强度分布统计第83-84页
            4.3.1.2 相对对数信号强度统计第84页
            4.3.1.3 样本相关性分析第84-85页
            4.3.1.4 主成分分析第85-86页
        4.3.2 数据过滤第86页
        4.3.3 显著性差异分析第86-94页
            4.3.3.1 差异分析方案第86-92页
            4.3.3.2 层次聚类分析(Hierarchical Clustering)第92-94页
        4.3.4 显著性差异基因的生物信息分析第94-95页
            4.3.4.1 基于IPA的经典通路分析第94-95页
    4.4 讨论第95-102页
        4.4.1 基因表达谱上调基因第98-99页
        4.4.2 基因表达谱下调基因第99页
        4.4.3 基因表达谱激活通路第99-100页
        4.4.4 CADM1 抑制卵巢癌的可能机制第100-102页
第五章 结论第102-103页
    5.1 主要结论第102页
    5.2 研究展望第102-103页
参考文献第103-120页
缩略词表第120-122页
在校期间的研究成果第122-123页
致谢第123页

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