中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
第一章 前言 | 第13-28页 |
1.1 肿瘤 | 第13-14页 |
1.1.1 良性肿瘤 | 第13页 |
1.1.2 原位肿瘤 | 第13页 |
1.1.3 恶性肿瘤 | 第13-14页 |
1.2 卵巢肿瘤 | 第14页 |
1.3 卵巢癌 | 第14-17页 |
1.3.1 卵巢上皮性癌 | 第15-16页 |
1.3.2 非卵巢上皮性恶性肿瘤 | 第16-17页 |
1.3.2.1 性索间质肿瘤 | 第16页 |
1.3.2.2 生殖细胞肿瘤 | 第16-17页 |
1.4 细胞粘附分子 | 第17-20页 |
1.4.1 细胞黏附分子的结构 | 第17-18页 |
1.4.2 细胞黏附分子的种类 | 第18-20页 |
1.5 细胞黏附分子与肿瘤 | 第20-23页 |
1.5.1 钙粘素与肿瘤 | 第21页 |
1.5.2 选择素与肿瘤 | 第21-22页 |
1.5.3 免疫球蛋白超家族细胞粘附分子与肿瘤 | 第22-23页 |
1.5.4 整合素与肿瘤 | 第23页 |
1.6 细胞粘附分子与卵巢癌 | 第23-25页 |
1.7 细胞粘附分子1(CADM1) | 第25-26页 |
1.7.1 CADM1 与肺癌 | 第26页 |
1.8 研究目的与意义 | 第26-28页 |
第二章 CADM1 与卵巢癌的发展和临床预后关系 | 第28-45页 |
2.1 实验材料 | 第28-30页 |
2.1.1 患者和病例组织样本 | 第28-29页 |
2.1.2 实验试剂 | 第29页 |
2.1.3 主要实验仪器 | 第29-30页 |
2.1.4 实验材料 | 第30页 |
2.2 实验方法 | 第30-34页 |
2.2.1 卵巢肿瘤组织取材 | 第30页 |
2.2.2 免疫组化检测的CADM1 的表达 | 第30-32页 |
2.2.2.1 石蜡标本处理 | 第30-31页 |
2.2.2.2 免疫组化程序 | 第31-32页 |
2.2.3 Western bloting检测肿瘤组织CADM1、MPP6、MPP2、MMP9 等蛋白的表达 | 第32-34页 |
2.2.3.1 卵巢肿瘤组织总蛋白的提取 | 第32-33页 |
2.2.3.2 Western blot实验检测目的蛋白的表达 | 第33-34页 |
2.2.4 统计学分析 | 第34页 |
2.3 实验结果 | 第34-41页 |
2.3.1 基本情况 | 第34页 |
2.3.2 卵巢癌TNM分类 | 第34-35页 |
2.3.3 卵巢肿瘤病理组织学分类与CADM1 的表达 | 第35-36页 |
2.3.4 卵巢肿瘤CADM1 表达的比较 | 第36-37页 |
2.3.5 卵巢肿瘤组织CADM1、MPP6、MMP2、MMP9 蛋白的表达 | 第37-40页 |
2.3.6 卵巢肿瘤组织CADM1 的表达与生存时间的关系 | 第40-41页 |
2.4 讨论 | 第41-45页 |
2.4.1 卵巢癌的发生和转移 | 第41-42页 |
2.4.2 CADM1 对卵巢癌的影响 | 第42-45页 |
第三章 过表达及沉默表达CADM1对卵巢癌细胞生物学行为的影响 | 第45-80页 |
3.1 实验材料 | 第45-49页 |
3.1.1 实验细胞 | 第45-46页 |
3.1.2 实验试剂 | 第46-47页 |
3.1.3 主要实验仪器 | 第47-48页 |
3.1.4 实验材料 | 第48-49页 |
3.2 实验方法 | 第49-64页 |
3.2.1 细胞培养 | 第49页 |
3.2.2 qRT-PCR检测CADM1 mRNA表达 | 第49-51页 |
3.2.3 慢病毒CADM1 过表达载体的构建 | 第51-56页 |
3.2.4 慢病毒CADM1 基因沉默表达载体的构建 | 第56-60页 |
3.2.5 慢病毒载体感染细胞 | 第60-61页 |
3.2.6 细胞增殖检测 | 第61页 |
3.2.7 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第61-62页 |
3.2.8 细胞克隆形成检测 | 第62页 |
3.2.9 细胞Transwell实验 | 第62-63页 |
3.2.10 细胞划痕实验 | 第63-64页 |
3.2.11 统计学分析 | 第64页 |
3.3 实验结果 | 第64-77页 |
3.3.1 细胞筛选 | 第64-66页 |
3.3.2 CADM1 过表达载体对卵巢癌ES-2 细胞生物行为学的影响 | 第66-72页 |
3.3.2.1 CADM1 过表达载体的构建及PCR测定的结果 | 第66页 |
3.3.2.2 CADM1 过表达载体感染ES-2 细胞病毒滴度荧光的观察 | 第66-67页 |
3.3.2.3 CADM1 过表达载体感染ES-2 细胞后CADM1mRNA的表达 | 第67页 |
3.3.2.4 CADM1 过表达对ES-2 细胞活性的影响 | 第67-68页 |
3.3.2.5 CADM1 过表达载体感染ES-2 细胞后的凋亡情况 | 第68-69页 |
3.3.2.6 CADM1 过表达对ES-2 细胞后克隆形成的影响 | 第69-70页 |
3.3.2.7 CADM1 过表达对ES-2 细胞侵袭能力的影响 | 第70-71页 |
3.3.2.8 CADM1 过表达对ES-2 细胞迁移能力的影响 | 第71-72页 |
3.3.3 CADM1 沉默表达载体对卵巢癌HO-8910 细胞生物行为学的影响.. | 第72-77页 |
3.3.3.1 CADM1 沉默表达载体的构建 | 第72页 |
3.3.3.2 CADM1 沉默表达载体感染HO-8910 细胞病毒滴度荧光的观察 | 第72-73页 |
3.3.3.3 CADM1 沉默表达载体感染HO-8910 细胞后CADM1 mRNA的表达 | 第73-74页 |
3.3.3.4 CADM1 沉默表达对HO-8910 细胞活性的影响 | 第74-75页 |
3.3.3.5 CADM1 沉默表达载体感染HO-8910 细胞后的凋亡情况 | 第75页 |
3.3.3.6 CADM1 沉默表达对HO-8910 细胞后克隆形成的影响 | 第75-76页 |
3.3.3.7 CADM1 沉默表达对HO-8910 细胞侵袭能力的影响 | 第76-77页 |
3.3.3.8 CADM1 沉默表达对HO-8910 细胞迁移能力的影响 | 第77页 |
3.4 讨论 | 第77-80页 |
3.4.1 慢病毒表达载体的构建 | 第77-78页 |
3.4.2 慢病毒表达载体感染卵巢癌细胞后对细胞生物学行为的影响 | 第78-80页 |
第四章 过表达CADM1 对卵巢癌细胞基因表达的影响 | 第80-102页 |
4.1 实验材料 | 第80页 |
4.1.1 实验细胞 | 第80页 |
4.1.2 实验试剂 | 第80页 |
4.1.3 主要实验仪器 | 第80页 |
4.1.4 实验材料 | 第80页 |
4.2 实验方法 | 第80-83页 |
4.2.1 细胞培养 | 第80页 |
4.2.2 qRT-PCR检测mRNA表达 | 第80-81页 |
4.2.3 慢病毒CADM1 过表达载体制备 | 第81页 |
4.2.4 高通量基因表达芯片检测 | 第81-82页 |
4.2.5 RT-qPCR验证基因芯片结果 | 第82页 |
4.2.6 统计学分析 | 第82-83页 |
4.3 实验结果 | 第83-95页 |
4.3.1 芯片数据的质量评估 | 第83-86页 |
4.3.1.1 信号强度分布统计 | 第83-84页 |
4.3.1.2 相对对数信号强度统计 | 第84页 |
4.3.1.3 样本相关性分析 | 第84-85页 |
4.3.1.4 主成分分析 | 第85-86页 |
4.3.2 数据过滤 | 第86页 |
4.3.3 显著性差异分析 | 第86-94页 |
4.3.3.1 差异分析方案 | 第86-92页 |
4.3.3.2 层次聚类分析(Hierarchical Clustering) | 第92-94页 |
4.3.4 显著性差异基因的生物信息分析 | 第94-95页 |
4.3.4.1 基于IPA的经典通路分析 | 第94-95页 |
4.4 讨论 | 第95-102页 |
4.4.1 基因表达谱上调基因 | 第98-99页 |
4.4.2 基因表达谱下调基因 | 第99页 |
4.4.3 基因表达谱激活通路 | 第99-100页 |
4.4.4 CADM1 抑制卵巢癌的可能机制 | 第100-102页 |
第五章 结论 | 第102-103页 |
5.1 主要结论 | 第102页 |
5.2 研究展望 | 第102-103页 |
参考文献 | 第103-120页 |
缩略词表 | 第120-122页 |
在校期间的研究成果 | 第122-123页 |
致谢 | 第123页 |