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水稻穗部性状调控基因OsGRF4的图位克隆及功能分析

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
主要缩略词表第12-13页
第1章 文献综述第13-28页
    1.1 水稻粒形的经典遗传、QTL定位和克隆第13-22页
        1.1.1 水稻粒形的经典遗传研究第13-15页
            1.1.1.1 粒形各性状的遗传特性第14页
            1.1.1.2 粒形各性状间的相关关系第14-15页
        1.1.2 水稻粒形性状QTL的定位及与环境的互作第15-17页
            1.1.2.1 水稻粒形QTL定位群体的主要类型第15页
            1.1.2.2 水稻粒形QTL的定位第15-16页
            1.1.2.3 水稻粒形QTL的一因多效第16-17页
            1.1.2.4 水稻粒形QTL的上位性作用以及与环境的互作第17页
        1.1.3 水稻粒形性状QTL的克隆及分子机理第17-21页
        1.1.4 水稻粒形基因的利用及展望第21-22页
    1.2 水稻穗粒数和穗型基因的克隆及其分子机理第22-24页
    1.3 生长调控因子蛋白家族及microRNA396的研究概况第24-27页
        1.3.1 生长调控因子的定义及功能第24页
        1.3.2 水稻和玉米GRF基因家族第24-26页
        1.3.3 拟南芥GRF基因家族第26页
        1.3.4 microRNA396对靶基因的调控及其功能第26-27页
    1.4 研究目的和意义第27-28页
第2章 水稻穗部性状调控基因OsGRF4的克隆第28-63页
    2.1 材料与方法第29-40页
        2.1.1 试验材料第29页
        2.1.2 NIL-OsGRF4与NIL-Osgrf4的种植及穗部性状表型调查第29页
        2.1.3 水稻DNA的提取以及质量检测第29-30页
        2.1.4 PCR和非变性聚丙烯酰胺电泳(Polyacrylamidegelelectrophoresis,PAGE)第30-31页
        2.1.5 琼脂糖电泳第31-32页
        2.1.6 InDel标记开发、定位群体构建、OsGRF4基因的精细定位第32-33页
        2.1.7 超表达和RNA干涉载体构建及其遗传转化第33-34页
        2.1.8 OsGRF4基因全长cDNA序列和启动子序列分析第34-35页
        2.1.9 水稻总RNA的提取第35页
        2.1.10 反转录PCR第35-36页
        2.1.11 荧光定量PCR第36-37页
        2.1.12 构建融合表达载体验证OsGRF4基因的功能位点第37页
        2.1.13 亚细胞定位载体构建及水稻原生质体转化第37-39页
        2.1.14 离层切片的制作及观察第39页
        2.1.15 颖壳细胞大小和细胞数目观察第39页
        2.1.16 植物激素含量的测定第39页
        2.1.17 OsGRF4 基因功能标记的开发与验证第39-40页
    2.2 结果与分析第40-60页
        2.2.1 OsGRF4基因对表型的影响第40-41页
        2.2.2 NIL-OsGRF4与NIL-Osgrf4籽粒灌浆速度的比较第41-42页
        2.2.3 OsGRF4基因的精细定位与候选基因的预测第42-44页
        2.2.4 LOC_Os02g47280的转基因互补试验第44-47页
        2.2.5 OsGRF4基因的表达模式分析第47-49页
        2.2.6 亲本OsGRF4的基因结构比较分析第49-51页
        2.2.7 OsGRF4基因序列在不同水稻材料中的变异第51-53页
        2.2.8 构建融合表达载体验证OsGRF4基因的功能位点第53-54页
        2.2.9 OsGRF4蛋白的亚细胞定位第54-55页
        2.2.10 OsGRF4基因通过改变离层结构影响籽粒的落粒性第55页
        2.2.11 OsGRF4基因主要通过增加细胞长度来影响籽粒大小第55-56页
        2.2.12 OsGRF4基因可能通过改变激素含量而影响穗部性状表型第56-57页
        2.2.13 OsGRF4对细胞周期、细胞分裂素和穗部性状基因表达量的影响第57-58页
        2.2.14 OsGRF4 基因功能标记的开发及验证第58-60页
    2.3 讨论第60-63页
第3章 转录组测序挖掘OsGRF4的调控基因第63-74页
    3.1 材料与方法第63-64页
        3.1.1 试验材料第63页
        3.1.2 建库测序流程和生物信息分析流程第63-64页
        3.1.3 DEGs与报道的穗部性状QTL在染色体上的共定位第64页
        3.1.4 RT-qPCR验证DEGs的表达第64页
    3.2 结果与分析第64-71页
        3.2.1 NIL-OsGRF4和NIL-Osgrf4的转录组测序质量较高第64-66页
        3.2.2 鉴定NIL-OsGRF4和NIL-Osgrf4之间的差异表达基因第66-67页
        3.2.3 差异表达基因GO富集分析第67-69页
        3.2.4 差异表达基因KEGG通路分析第69页
        3.2.5 DEGs与报道的穗部性状QTL在染色体上的共定位第69-70页
        3.2.6 通过RT-qPCR验证DEGs的表达第70-71页
    3.3 讨论第71-74页
第4章 OSGRF4基因在水稻高产育种中的应用第74-83页
    4.1 材料与方法第74-75页
        4.1.1 试验材料第74页
        4.1.2 各组合品比试验设计第74-75页
    4.2 结果与分析第75-82页
        4.2.1 海南大区品比组合的产量性状表现第75-76页
        4.2.2 海南大区品比组合的生育期及产量表现第76-77页
        4.2.3 2015年中稻多点品比迟熟组合的产量性状表现第77-79页
        4.2.4 2015年中稻多点品比迟熟组合生育期及产量表现第79-82页
    4.3 讨论第82-83页
第5章 全文总结与研究展望第83-85页
    5.1 本研究主要结论第83-84页
    5.2 本研究主要特色与创新点第84页
    5.3 研究展望第84-85页
参考文献第85-99页
附录1 用于定量PCR的引物第99-100页
附录2 转录组测序鉴定的80个差异表达基因第100-103页
致谢第103-104页
作者简介第104-105页

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