| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 第1章 引言 | 第11-38页 |
| 1.1 PHF6蛋白研究进展 | 第11-19页 |
| 1.1.1 PHD Finger(PHF)结构的功能研究 | 第11-12页 |
| 1.1.2 PHF6的结构及分布 | 第12-13页 |
| 1.1.3 PHF6的功能研究 | 第13-17页 |
| 1.1.4 PHF6表达调控机制 | 第17-18页 |
| 1.1.5 PHF6突变表型分析 | 第18-19页 |
| 1.2 组蛋白甲基化酶研究进展 | 第19-28页 |
| 1.2.1 组蛋白及组蛋白修饰 | 第19-22页 |
| 1.2.2 组蛋白甲基化酶研究 | 第22-27页 |
| 1.2.3 组蛋白甲基化酶与肿瘤 | 第27-28页 |
| 1.3 细胞核仁研究进展 | 第28-36页 |
| 1.3.1 核仁功能研究 | 第28-34页 |
| 1.3.2 核仁和肿瘤 | 第34-36页 |
| 1.4 研究目的和内容 | 第36-38页 |
| 1.4.1 研究目的 | 第36-37页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第37-38页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第38-49页 |
| 2.1 主要材料和试剂 | 第38-39页 |
| 2.2 主要仪器 | 第39-40页 |
| 2.3 细胞培养 | 第40页 |
| 2.4 载体构建 | 第40-42页 |
| 2.4.1 过表达载体的构建 | 第40-41页 |
| 2.4.2 shRNA慢病毒载体的构建 | 第41-42页 |
| 2.5 慢病毒包装及细胞感染 | 第42-43页 |
| 2.5.1 过表达慢病毒的包装 | 第42页 |
| 2.5.2 shRNA慢病毒的包装 | 第42-43页 |
| 2.5.3 慢病毒感染细胞 | 第43页 |
| 2.6 模拟多肽的合成序列 | 第43-44页 |
| 2.7 细胞转染 | 第44页 |
| 2.8 免疫印迹方法 | 第44-45页 |
| 2.8.1 制备样品 | 第44页 |
| 2.8.2 Tris-SDS-PAGE电泳 | 第44页 |
| 2.8.3 Tricine-SDS-PAGE电泳 | 第44-45页 |
| 2.8.4 转膜 | 第45页 |
| 2.8.5 抗体孵育 | 第45页 |
| 2.8.6 曝光 | 第45页 |
| 2.9 平板细胞成克隆实验分析 | 第45页 |
| 2.10 实时定量反转录PCR分析 | 第45-46页 |
| 2.11 免疫荧光技术 | 第46-47页 |
| 2.12 FUrd掺入细胞实验方法 | 第47页 |
| 2.13 荧光素酶报告基因分析方法 | 第47页 |
| 2.14 染色质免疫共沉淀分析方法 | 第47页 |
| 2.15 宫颈癌动物模型研究方法 | 第47-48页 |
| 2.16 数据分析 | 第48-49页 |
| 第3章 PHF6调控rDNA的转录 | 第49-55页 |
| 3.1 本章引论 | 第49页 |
| 3.2 PHF6的细胞核仁定位实验 | 第49-50页 |
| 3.3 PHF6抑制rDNA的转录 | 第50-53页 |
| 3.4 PHF6突变体细胞定位及对rDNA转录的影响 | 第53-54页 |
| 3.5 小结 | 第54-55页 |
| 第4章 PHF6识别并结合rDNA区域组蛋白甲基化修饰位点 | 第55-61页 |
| 4.1 本章引论 | 第55页 |
| 4.2 PHF6在rDNA的pre-rRNA转录区域结合情况分析 | 第55-56页 |
| 4.3 PHF6和组蛋白Histone3.1的相互作用 | 第56-57页 |
| 4.4 PHF6和组蛋白H3的甲基化模拟肽的结合分析 | 第57-58页 |
| 4.5 PHF6与rDNA转录起始区域H3K9/H3K27甲基化修饰位点的结合分析 | 第58-59页 |
| 4.6 小结 | 第59-61页 |
| 第5章 PHF6和组蛋白甲基化酶SUV39H1在rDNA区域有相互作用 | 第61-68页 |
| 5.1 本章引论 | 第61页 |
| 5.2 质谱法分析PHF6蛋白结合蛋白 | 第61-62页 |
| 5.3 PHF6与组蛋白甲基化酶SUV39H1的结合鉴定 | 第62-63页 |
| 5.4 PHF6与SUV39H1在rDNA区域结合情况分析 | 第63-66页 |
| 5.5 小结 | 第66-68页 |
| 第6章 PHF6通过募集SUV39H1调控rDNA的转录 | 第68-86页 |
| 6.1 本章引论 | 第68页 |
| 6.2 PHF6募集SUV39H1调控rDNA转录起始区域H3K9me3的水平 | 第68-73页 |
| 6.2.1 SUV39H1调控rDNA转录起始区域H3K9me3的水平 | 第68-70页 |
| 6.2.2 PHF6募集SUV39H1结合到rDNA转录起始区域并调控H3K9me3的水平 | 第70-73页 |
| 6.3 PHF6通过SUV39H1的甲基化酶催化活性来影响rDNA的转录 | 第73-77页 |
| 6.3.1 SUV39H1调控rDNA的转录 | 第73-74页 |
| 6.3.2 SUV39H1对rDNA的转录抑制作用依赖于其甲基化酶催化活性 | 第74-75页 |
| 6.3.3 PHF6能够通过SUV39H1的甲基化酶活性调控rDNA转录起始区域H3K9me3的水平从而调控rDNA的转录 | 第75-77页 |
| 6.4 PHF6的PHD结构域是募集SUV39H1到rDNA上调控rDNA的转录所必需的 | 第77-84页 |
| 6.4.1 PHF6募集SUV39H1到rDNA上调控rDNA的转录需要依赖PHD结构域 | 第77-81页 |
| 6.4.2 白血病中PHF6的两种突变体对SUV39H1募集到rDNA上的影响 | 第81-84页 |
| 6.5 小结 | 第84-86页 |
| 第7章 PHF6通过调控rDNA的转录影响细胞增殖 | 第86-91页 |
| 7.1 本章引论 | 第86页 |
| 7.2 敲低PHF6后通过促进rDNA的转录从而促进细胞增殖 | 第86-88页 |
| 7.3 过表达/敲低PHF6稳定细胞系构建小鼠异种移植瘤模型研究 | 第88-90页 |
| 7.4 小结 | 第90-91页 |
| 第8章 总结与展望 | 第91-97页 |
| 第9章 其它研究工作 | 第97-112页 |
| 9.1 引言 | 第97-98页 |
| 9.2 材料与方法 | 第98-99页 |
| 9.3 实验结果与讨论 | 第99-110页 |
| 9.4 总结与展望 | 第110-112页 |
| 参考文献 | 第112-133页 |
| 致谢 | 第133-135页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第135页 |
