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拟南芥核质转运载体AtTRN1底物筛选及AtTRN1表达量下降突变体sic1多分枝表型的研究

中文摘要第3-5页
Abstract第5-7页
第一章 前言第12-29页
    1.1 真核细胞中的核质转运简介第12-14页
    1.2 核定位信号(NLS)第14-15页
    1.3 核质转运受体蛋白第15-21页
        1.3.1 需要接头蛋白的Kapβ1转运蛋白第15-17页
        1.3.2 不需要接头蛋白的Kapβ2(TRN1)转运蛋白第17-20页
        1.3.3 植物中核质转运蛋白的研究现状第20-21页
    1.4 植物分枝生长调控研究现状第21-26页
        1.4.1 植株中生长素和细胞分裂素对分枝形成的调控第21-23页
        1.4.2 植株中独脚金内酯对分枝形成的调控第23-25页
        1.4.3 外界因素对于植物分枝形成的调控第25-26页
    1.5 本论文的研究目的及意义第26-29页
第二章 实验材料和方法第29-36页
    2.1 实验材料第29页
    2.2 实验方法第29-36页
        2.2.1 拟南芥的种植与管理第29页
        2.2.2 拟南芥植株分枝数的统计第29-30页
        2.2.3 树脂切片第30页
        2.2.4 扫描电镜第30页
        2.2.5 激素喷洒实验第30-31页
        2.2.6 水培实验第31页
        2.2.7 拟南芥植株打顶实验第31页
        2.2.8 拟南芥嫁接实验第31页
        2.2.9 芯片实验第31-32页
        2.2.10 双突构建第32-33页
        2.2.11 基因克隆第33页
        2.2.12 拟南芥酵母双杂交cDNA文库的构建第33-34页
        2.2.13 酵母双杂文库的筛选第34页
        2.2.14 酵母双杂交实验第34页
        2.2.15 双分子荧光互补(BiFC)实验第34页
        2.2.16 生物信息学方法第34-35页
        2.2.17 定量PCR(Real-Time quantitative PCR)第35页
        2.2.18 PCR引物第35-36页
第三章 实验结果第36-63页
    3.1 酵母双杂文库的筛选及蛋白互作的验证第36-39页
    3.2 Kapβ2和Kapl04p蛋白的底物在拟南芥中同源蛋白与AtTRN1的互作第39-42页
    3.3 含有PY-NLS基序的蛋白与AtTRN1的互作第42-44页
    3.4 筛选蛋白与AtTRN1互作区域的确定第44页
    3.5 29个AtTRN1可能底物蛋白的GO(Gene Ontology)功能分类第44-45页
    3.6 AtTRN1表达量下降突变体sic1激活了分枝的向外生长第45-46页
    3.7 生长素可抑制sic1部分分枝的向外生长第46-50页
    3.8 对sic1添加外源细胞分裂素能增加分枝的向外生长,添加细胞分裂素合成抑制剂能抑制分枝的向外生长第50-52页
    3.9 嫁接实验证实sic1可以合成独脚金内酯第52-53页
    3.10 外源施加以及内源缺失独脚金内酯对于sic1植株分枝数目的影响第53-55页
    3.11 sic1与分枝相关转录因子双突变体的表型分析第55-56页
    3.12 sic1与WT叶腋部位mRNA表达谱分析第56-57页
    3.13 叶腋部位转录组芯片的GO(Gene Ontology)以及KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)分析第57-59页
    3.14 通过转录组芯片进一步分析sic1植株中分枝增多的可能原因第59-63页
第四章 讨论第63-70页
    4.1 本论文中互作蛋白筛选方法的优点和缺点第63-64页
    4.2 AtTRN1可能底物的GO(Gene Ontology)功能分类第64-65页
    4.3 AtTRN1识别的蛋白结构域第65-66页
    4.4 核质转运载体AtTRN1表达量下降影响了植株分枝的数目第66-67页
    4.5 sic1植株分枝增多受多种因素调控第67-70页
第五章 结论与展望第70-73页
    5.1 通过三种方法筛选到29个拟南芥核质转运蛋白AtTRN1可能的底物第70页
    5.2 AtTRN1可以识别含有PY-NLS基序的片段第70-71页
    5.3 AtTRN1表达量下降突变体sic1具有多分枝表型,并且受生长素和细胞分裂素调控第71页
    5.4 sic1植株能合成独脚金内酯,并且sic1植株分枝受独脚金内酯调控第71页
    5.5 sic1植株多分枝表型能被brc1-2 植株多分枝表型掩盖第71-72页
    5.6 转录组芯片证实sic1植株分枝增多受多个信号途径调控第72-73页
参考文献第73-81页
附录第81-103页
研究成果第103-104页
致谢第104页

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