摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
第一章 绪论 | 第15-28页 |
1.1 环氧化物水解酶概述 | 第15-16页 |
1.1.1 环氧化物水解酶 | 第15页 |
1.1.2 环氧化物水解酶的结构及催化机理 | 第15-16页 |
1.2 对映体纯的环氧化物和对映体纯的邻位二醇 | 第16-17页 |
1.3 EHs催化 1,2-环氧辛烷不对称水解的研究现状 | 第17-20页 |
1.3.1 氧化苯乙烯类环氧化物 | 第18页 |
1.3.2 脂肪烃类环氧化物 | 第18页 |
1.3.3 苯基缩水甘油醚类环氧化物 | 第18-19页 |
1.3.4 其它环氧化物 | 第19-20页 |
1.4 黄豆环氧化物水解酶及其催化环氧化物水解的反应 | 第20页 |
1.5 环氧化物水解酶催化 1,2-环氧辛烷不对称水解的反应 | 第20-21页 |
1.6 金属有机框架材料 | 第21-25页 |
1.6.1 金属有机框架材料概述 | 第21-22页 |
1.6.2 MOFs材料的水稳定性 | 第22-23页 |
1.6.3 MOFs的主要应用 | 第23-25页 |
1.7 深度共熔溶剂概述及其应用 | 第25-26页 |
1.8 本研究的主要内容和意义 | 第26-28页 |
第二章 环氧化物水解酶的制备和筛选 | 第28-37页 |
2.1 实验材料 | 第28页 |
2.2 主要仪器设备 | 第28-29页 |
2.3 不同来源所含的主要营养成分 | 第29页 |
2.4 实验方法 | 第29-31页 |
2.4.1 不同来源的环氧化物水解酶粗酶的制备 | 第29-30页 |
2.4.2 环氧化物水解酶中蛋白含量及酶活测定方法 | 第30页 |
2.4.3 色谱分析 | 第30页 |
2.4.4 反应初速度、产率和产物对映体纯度的确定 | 第30-31页 |
2.4.5 不同来源的EHs催化 1,2-环氧辛烷不对称水解反应 | 第31页 |
2.4.6 不同饱和度的硫酸铵对黄豆环氧化物水解酶(SEH)活力的影响 | 第31页 |
2.5 结果与讨论 | 第31-35页 |
2.5.1 不同来源的EH粗酶的制备 | 第31-32页 |
2.5.2 不同来源的EH不对称水解 1,2-环氧辛烷的研究 | 第32-33页 |
2.5.3 不同饱和度硫酸铵梯度沉降对SEH的活力的影响 | 第33页 |
2.5.4 色谱分析 | 第33-35页 |
2.6 本章小结 | 第35-37页 |
第三章 金属有机框架材料的制备及其固定化黄豆环氧化物水解酶的研究 | 第37-65页 |
3.1 实验材料 | 第37-38页 |
3.2 主要仪器设备 | 第38页 |
3.3 实验方法 | 第38-44页 |
3.3.1 黄豆环氧化物水解酶(SEH)粗酶的制备 | 第38页 |
3.3.2 SEH中蛋白含量及酶活力测定方法 | 第38页 |
3.3.3 色谱分析 | 第38页 |
3.3.4 不同MOFs材料的制备 | 第38-39页 |
3.3.5 MOFs的种类及固定化方法对固定化SEH酶活回收的影响 | 第39-40页 |
3.3.5.1 不同的MOFs固定化SEH的研究 | 第39页 |
3.3.5.2 不同固定化方法对UiO-66-NH_2固定化SEH的影响 | 第39-40页 |
3.3.6 固定化过程中的反应条件对固定化黄豆环氧化物水解酶的影响 | 第40-41页 |
3.3.6.1 交联剂浓度对SEH@UiO-66-NH_2的相对酶活回收的影响 | 第40页 |
3.3.6.2 交联时间对SEH@UiO-66-NH_2的相对酶活回收的影响 | 第40页 |
3.3.6.3 酶和载体的质量比对SEH@UiO-66-NH_2的相对酶活回收的影响 | 第40-41页 |
3.3.7 UiO-66-NH_2及固定化酶SEH@ UiO-66-NH_2的性质表征 | 第41-42页 |
3.3.7.1 傅立叶变换红外光谱 (FTIR)分析和拉曼光谱分析 | 第41页 |
3.3.7.2 X-射线衍射分析(XRD) | 第41页 |
3.3.7.3 电镜扫描(SEM) | 第41页 |
3.3.7.4 UiO-66-NH_2和固定化酶SEH@UiO-66-NH_2在PBS中稳定性研究 | 第41页 |
3.3.7.5 固定化酶SEH@UiO-66-NH_2最适pH的研究 | 第41-42页 |
3.3.7.6 固定化酶SEH@UiO-66-NH_2最适温度的研究 | 第42页 |
3.3.7.7 固定化酶SEH@UiO-66-NH_2和游离酶SEH动力学参数的研究 | 第42页 |
3.3.8 固定化酶SEH@UiO-66-NH_2的稳定性 | 第42-43页 |
3.3.8.1 游离SEH和SEH@UiO-66-NH_2的pH稳定性 | 第42页 |
3.3.8.2 游离SEH和SEH@UiO-66-NH_2的温度稳定性 | 第42-43页 |
3.3.8.3 游离SEH和SEH@UiO-66-NH_2的有机溶剂耐受性 | 第43页 |
3.3.8.4 固定化酶SEH@UiO-66-NH_2的储藏稳定性 | 第43页 |
3.3.8.5 固定化酶SEH@UiO-66-NH_2的操作稳定性 | 第43页 |
3.3.9 缓冲液体系中游离酶和固定化酶催化 1,2-环氧辛烷不对称水解的过程曲线 | 第43页 |
3.3.10 反应初速度、产率和产物对映体纯度的确定 | 第43-44页 |
3.4 结果与讨论 | 第44-63页 |
3.4.1 UiO-66-NH_2的制备 | 第44页 |
3.4.2 MOFs的种类及固定化方法对固定化SEH酶活回收的影响 | 第44-46页 |
3.4.3 固定化过程中的反应条件对固定化酶SEH@UiO-66-NH_2的影响 | 第46-50页 |
3.4.3.1 交联剂浓度对固定化酶SEH@UiO-66-NH_2的影响 | 第46-48页 |
3.4.3.2 交联时间对固定化酶SEH@UiO-66-NH_2的影响 | 第48-49页 |
3.4.3.3 酶和载体的质量比对固定化酶SEH@UiO-66-NH_2的影响 | 第49-50页 |
3.4.4 UiO-66-NH_2和固定化酶SEH@UiO-66-NH_2的性质表征 | 第50-57页 |
3.4.4.1 UiO-66-NH_2和SEH@UiO-66-NH_2的FTIR和Raman图谱 | 第50-52页 |
3.4.4.2 UiO-66-NH_2和SEH@UiO-66-NH_2的XRD及其在PBS中稳定性分析 | 第52-53页 |
3.4.4.3 UiO-66-NH_2 和SEH@UiO-66-NH_2 的SEM图谱 | 第53-54页 |
3.4.4.4 最适pH的研究 | 第54-55页 |
3.4.4.5 最适温度的研究 | 第55-56页 |
3.4.4.6 游离酶和固定化酶的动力学参数 | 第56-57页 |
3.4.5 固定化酶SEH@UiO-66-NH_2的稳定性研究 | 第57-61页 |
3.4.5.1 pH稳定性 | 第57-58页 |
3.4.5.2 温度稳定性 | 第58-59页 |
3.4.5.3 有机溶剂耐受性 | 第59-60页 |
3.4.5.4 储藏稳定性 | 第60-61页 |
3.4.5.5 操作稳定性 | 第61页 |
3.4.6 缓冲液体系中游离酶和固定化酶催化 1,2-环氧辛烷不对称水解的过程曲线 | 第61-63页 |
3.5 本章小节 | 第63-65页 |
第四章 含深度共熔溶剂(DESs)体系中固定化酶SEH@UiO-66-NH_2催化 1,2-环氧辛烷不对称水解反应的研究 | 第65-77页 |
4.1 实验材料 | 第65-66页 |
4.2 主要仪器设备 | 第66页 |
4.3 实验方法 | 第66-68页 |
4.3.1 黄豆环氧化物水解酶(SEH)粗酶的制备 | 第66页 |
4.3.2 SEH中蛋白含量及酶活力测定方法 | 第66页 |
4.3.3 色谱分析 | 第66页 |
4.3.4 固定化SEH的制备 | 第66页 |
4.3.5 DESs的合成 | 第66页 |
4.3.6 SEH@UiO-66-NH_2在不同DESs中稳定性的研究 | 第66-67页 |
4.3.7 含不同DESs反应体系中SEH@UiO-66-NH_2催化 1,2-环氧辛烷的过程曲线 | 第67页 |
4.3.8 DESs含量对SEH@UiO-66-NH_2催化 1,2-环氧辛烷不对称水解反应的影响 | 第67页 |
4.3.9 缓冲液pH对SEH@UiO-66-NH_2催化 1,2-环氧辛烷不对称水解反应的影响 | 第67-68页 |
4.3.10 底物浓度对SEH@UiO-66-NH_2催化 1,2-环氧辛烷不对称水解反应的影响 | 第68页 |
4.4 结果与讨论 | 第68-76页 |
4.4.1 UiO-66-NH_2及固定化酶SEH@UiO-66-NH_2在DES中的稳定性研究 | 第68-70页 |
4.4.2 含DESs反应体系中SEH@UiO-66-NH_2催化 1,2-环氧辛烷不对称水解的研究 | 第70-72页 |
4.4.3 DESs含量对SEH@UiO-66-NH_2催化 1,2-环氧辛烷不对称水解反应的影响 | 第72-73页 |
4.4.4 缓冲液pH对SEH@UiO-66-NH_2催化 1,2-环氧辛烷不对称水解反应的影响 | 第73-75页 |
4.4.5 底物浓度对SEH@UiO-66-NH_2催化 1,2-环氧辛烷不对称水解反应的影响 | 第75-76页 |
4.5 本章小结 | 第76-77页 |
结论与展望 | 第77-80页 |
参考文献 | 第80-89页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第89-91页 |
致谢 | 第91-92页 |
附件 | 第92页 |