摘要 | 第6-8页 |
abstract | 第8-9页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第14-26页 |
1.1 病原学 | 第14-17页 |
1.1.1 PEDV的基因组 | 第14-15页 |
1.1.2 PEDV蛋白 | 第15-17页 |
1.2 黏膜免疫和乳汁免疫 | 第17页 |
1.3 PEDV与宿主的相互作用 | 第17-18页 |
1.4 PEDV的细胞适应性 | 第18-19页 |
1.5 PEDV的流行病学 | 第19-21页 |
1.5.1 国外PEDV的流行 | 第19-20页 |
1.5.2 国内流行情况 | 第20-21页 |
1.6 PEDV疫苗 | 第21-25页 |
1.6.1 灭活疫苗 | 第21-22页 |
1.6.2 弱毒疫苗 | 第22-23页 |
1.6.3 亚单位疫苗 | 第23页 |
1.6.4 活载体疫苗 | 第23-24页 |
1.6.5 核酸疫苗 | 第24页 |
1.6.6 转基因植物可食疫苗 | 第24-25页 |
1.7 本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
第二章 2016-2017年PEDVS基因遗传进化分析 | 第26-41页 |
2.1 材料 | 第26页 |
2.1.1 主要试剂 | 第26页 |
2.1.2 主要仪器 | 第26页 |
2.1.3 病料 | 第26页 |
2.2 方法 | 第26-32页 |
2.2.1 总RNA的提取 | 第26-27页 |
2.2.2 RT-PCR检测粪便样品 | 第27-28页 |
2.2.3 PEDVTAQMAN探针实时荧光定量RT-PCR方法的建立及粪便样品检测. | 第28-31页 |
2.2.4 分段扩增S基因 | 第31-32页 |
2.2.5 S基因序列的拼接及基于S基因序列构建系统进化树 | 第32页 |
2.3 实验结果 | 第32-39页 |
2.3.1 PEDVTAQMAN探针实时荧光定量RT-PCR检测方法建立 | 第32-36页 |
2.3.2 粪便样品检测结果 | 第36页 |
2.3.3 PEDV流行毒株S基因分段扩增结果及序列拼接 | 第36-37页 |
2.3.4 PEDV毒株的命名及GENEBANK登录号 | 第37页 |
2.3.5 基于S基因的系统进化树构建及遗传进化分析 | 第37-38页 |
2.3.6 PEDV流行毒株与CV777疫苗株的抗原差异 | 第38-39页 |
2.4 讨论 | 第39-41页 |
第三章 PEDV毒株的分离鉴定及致病性研究 | 第41-55页 |
3.1 材料 | 第41页 |
3.1.1 主要试剂 | 第41页 |
3.1.2 主要仪器 | 第41页 |
3.1.3 病料与细胞 | 第41页 |
3.2 方法 | 第41-47页 |
3.2.1 溶液配制 | 第41-42页 |
3.2.2 PEDV的分离与传代培养 | 第42页 |
3.2.3 PEDV CH/HNPJ/2017毒株全基因组序列测定及拼接 | 第42-44页 |
3.2.4 PEDV CH/HNPJ/2017毒株遗传进化分析 | 第44页 |
3.2.5 PEDV CH/HNPJ/2017毒株生长曲线 | 第44-45页 |
3.2.6 PEDV CH/HNPJ/2017毒株TCID50的测定 | 第45页 |
3.2.7 IFA | 第45页 |
3.2.8 电镜检测病毒粒子 | 第45-46页 |
3.2.9 PEDV CH/HNPJ/2017毒株的纯化 | 第46页 |
3.2.10 PEDV CH/HNPJ/2017毒株对仔猪致病性分析 | 第46-47页 |
3.3 实验结果 | 第47-53页 |
3.3.1 PEDV CH/HNPJ/2017毒株CPE | 第47页 |
3.3.2 PEDV CH/HNPJ/2017毒株全基因组扩增及遗传进化分析 | 第47-49页 |
3.3.3 PEDV CH/HNPJ/2017毒株生长曲线 | 第49页 |
3.3.4 PEDV CH/HNPJ/2017毒株TCID50的测定 | 第49-50页 |
3.3.5 PEDV CH/HNPJ/2017毒株IFA鉴定 | 第50页 |
3.3.6 PEDV CH/HNPJ/2017毒株病毒粒子电镜观察 | 第50-51页 |
3.3.7 PEDV CH/HNPJ/2017毒株致病性分析 | 第51-53页 |
3.4 讨论 | 第53-55页 |
第四章 全文结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
作者简历 | 第63页 |