摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第1章 绪论 | 第13-23页 |
1.1 甘草 | 第13页 |
1.2 甘草的化学成分 | 第13-14页 |
1.2.1 三萜皂苷类 | 第13页 |
1.2.2 黄酮类 | 第13-14页 |
1.3 甘草次级代谢途径相关基因及其调控研究 | 第14-17页 |
1.3.1 甘草酸生物合成途径相关基因及其调控研究 | 第14-16页 |
1.3.2 黄酮类生物合成途径相关基因及其调控研究 | 第16-17页 |
1.4 转录组研究进展 | 第17-21页 |
1.4.1 转录组基本介绍 | 第17-18页 |
1.4.2 药用植物转录组的研究 | 第18-19页 |
1.4.3 盐胁迫植物转录组的研究 | 第19-21页 |
1.5 本研究的目的意义 | 第21-23页 |
第2章 盐胁迫下甘草愈伤组织的转录组测序分析 | 第23-35页 |
2.1 试验材料 | 第23页 |
2.2 转录组测序技术路线 | 第23页 |
2.3 试验方法 | 第23-25页 |
2.3.1 材料处理 | 第24页 |
2.3.2 建库测序流程 | 第24页 |
2.3.3 测序结果质量评估及拼接 | 第24页 |
2.3.4 基因功能注释 | 第24-25页 |
2.3.5 差异基因的筛选及注释 | 第25页 |
2.4 结果分析 | 第25-32页 |
2.4.1 测序数据质量评估 | 第25-26页 |
2.4.2 转录本拼接 | 第26-27页 |
2.4.3 基因功能的注释结果分析 | 第27-29页 |
2.4.4 差异基因分析 | 第29-32页 |
2.5 本章小结 | 第32-35页 |
第3章 甘草愈伤组织盐胁迫响应基因的分析 | 第35-43页 |
3.1 试验材料 | 第35页 |
3.2 试验方法 | 第35页 |
3.3 结果分析及讨论 | 第35-41页 |
3.3.1 离子平衡相关的差异表达基因 | 第35-37页 |
3.3.2 MAPK途径相关的差异表达基因 | 第37-38页 |
3.3.3 激素合成代谢相关的差异表达基因 | 第38-39页 |
3.3.4 氧化还原平衡相关的差异表达基因 | 第39页 |
3.3.5 转录因子相关的差异表达基因 | 第39-41页 |
3.3.6 其他类差异表达基因 | 第41页 |
3.4 本章小结 | 第41-43页 |
第4章 次级代谢途径目的基因克隆载体构建 | 第43-57页 |
4.1 试验材料与试剂 | 第43-44页 |
4.1.1 植物材料 | 第43页 |
4.1.2 菌株与质粒 | 第43页 |
4.1.3 主要试验试剂 | 第43页 |
4.1.4 实验引物 | 第43-44页 |
4.2 试验方法 | 第44-48页 |
4.2.1 次级代谢途径目的基因的表达及分析 | 第44页 |
4.2.2 甘草愈伤组织总RNA的提取 | 第44-45页 |
4.2.3 cDNA的合成 | 第45页 |
4.2.4 质粒的提取 | 第45页 |
4.2.5 目的基因片段的扩增 | 第45-47页 |
4.2.6 目的基因克隆载体构建、转化及鉴定 | 第47页 |
4.2.7 植物表达载体pBI121-Ampr构建、转化及鉴定 | 第47-48页 |
4.3 结果分析 | 第48-55页 |
4.3.1 次级代谢途径目的基因表达分析 | 第48-51页 |
4.3.2 RNA提取 | 第51页 |
4.3.3 目的基因的RT-PCR扩增 | 第51-52页 |
4.3.4 GiLus-gus的融合PCR扩增 | 第52页 |
4.3.5 植物表达载体pBI121-Ampr的构建结果 | 第52-53页 |
4.3.6 目的基因克隆载体的构建结果 | 第53-55页 |
4.4 本章小结 | 第55-57页 |
第5章 结论 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
附录 | 第65-69页 |
致谢 | 第69页 |