| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第15-29页 |
| 1.1 硒与硒蛋白 | 第15-16页 |
| 1.2 硒蛋白W | 第16-19页 |
| 1.3 硒与神经系统 | 第19-22页 |
| 1.3.1 脑硒的分布及脑组织对硒的优先利用 | 第19页 |
| 1.3.2 硒对神经系统的保护作用 | 第19-20页 |
| 1.3.3 硒蛋白与神经系统 | 第20-22页 |
| 1.4 硒与抗氧化 | 第22-23页 |
| 1.5 硒与炎症 | 第23页 |
| 1.6 硒与细胞凋亡 | 第23-24页 |
| 1.7 基因表达技术 | 第24-28页 |
| 1.7.1 RNA干扰 | 第24-27页 |
| 1.7.2 过表达技术 | 第27-28页 |
| 1.8 试验的目的与意义 | 第28-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-36页 |
| 2.1 主要仪器和试剂 | 第29-30页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第29页 |
| 2.1.2 主要试剂及配制 | 第29-30页 |
| 2.2 试验方法 | 第30-36页 |
| 2.2.1 试验总体设计 | 第30页 |
| 2.2.2 样品的采集与处理 | 第30-31页 |
| 2.2.3 鸡胚脑神经元的分离培养与纯化 | 第31页 |
| 2.2.4 鸡胚脑神经元的过氧化氢LD50检测 | 第31页 |
| 2.2.5 鸡胚脑神经元基因转染模型的建立 | 第31-32页 |
| 2.2.6 过氧化氢诱导鸡胚脑神经元凋亡的TUNEL和AO/EB法检测 | 第32-33页 |
| 2.2.7 目的基因mRNA水平qPCR检测方法的建立 | 第33-34页 |
| 2.2.8 目的基因蛋白水平检测方法的建立 | 第34-35页 |
| 2.2.9 试验数据的分析与统计 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-63页 |
| 3.1 鸡胚脑神经元体外培养结果 | 第36页 |
| 3.2 鸡胚脑神经元过氧化氢LD_(50)的测定及形态学观察结果 | 第36-37页 |
| 3.3 鸡胚脑神经元SelW基因敲低转染条件优化结果 | 第37页 |
| 3.4 鸡胚脑神经元SelW基因过表达转染条件的优化结果 | 第37-38页 |
| 3.5 过氧化氢诱导细胞凋亡的TUNEL法检测结果 | 第38页 |
| 3.6 过氧化氢诱导细胞凋亡的AO/EB法检测结果 | 第38-41页 |
| 3.7 脑组织细胞凋亡的TUNEL法检测结果 | 第41页 |
| 3.8 不同日龄鸡脑组织抗氧化功能检测结果 | 第41-44页 |
| 3.8.1 不同日龄鸡脑组织中GSH含量与GSH-Px活性的检测结果 | 第41-42页 |
| 3.8.2 不同日龄鸡脑组织中NO含量与iNOS活性的检测结果 | 第42页 |
| 3.8.3 不同日龄鸡脑组织中H_2O_2含量与CAT活性的检测结果 | 第42-43页 |
| 3.8.4 不同日龄鸡脑组织中-OH与MDA含量的检测结果 | 第43-44页 |
| 3.9 目的基因qPCR检测方法的建立 | 第44页 |
| 3.10 不同日龄鸡脑组织中目的基因mRNA表达水平检测结果 | 第44-51页 |
| 3.10.1 不同日龄鸡脑组织中SelW mRNA表达水平的检测结果 | 第44-45页 |
| 3.10.2 不同日龄鸡脑组织中炎性因子mRNA表达水平检测结果 | 第45-49页 |
| 3.10.3 不同日龄鸡脑组织中凋亡基因mRNA表达水平检测结果 | 第49-51页 |
| 3.11 鸡胚脑神经元中目的基因mRNA表达水平检测结果 | 第51-55页 |
| 3.11.1 siRNA转染鸡胚脑神经元后SelW mRNA表达水平检测结果 | 第51-53页 |
| 3.11.2 PcDNA3.1/Selw转染鸡胚脑神经元后SelW mRNA表达水平检测结果 | 第53页 |
| 3.11.3 H_2O_2诱导后鸡胚脑神经元中炎性因子的表达水平检测结果 | 第53-54页 |
| 3.11.4 H_2O_2诱导后鸡胚脑神经元中凋亡基因的表达水平检测结果 | 第54-55页 |
| 3.12 不同日龄鸡脑组织中目的基因蛋白水平检测结果 | 第55-61页 |
| 3.13 鸡胚脑神经元中目的基因蛋白水平检测结果 | 第61-63页 |
| 4 讨论 | 第63-79页 |
| 4.1 硒对鸡脑组织SelW表达的影响 | 第63-64页 |
| 4.2 硒对鸡脑组织抗氧化功能的影响 | 第64-68页 |
| 4.2.1 硒对鸡脑组织中GSH和GSH-Px的影响 | 第64-65页 |
| 4.2.2 硒对鸡脑组织中NO和iNOS的影响 | 第65-66页 |
| 4.2.3 硒对鸡脑组织中H_2O_2和CAT的影响 | 第66-67页 |
| 4.2.4 硒对鸡脑组中MDA和-OH的影响 | 第67-68页 |
| 4.3 鸡胚脑神经元的体外培养和基因表达模型的建立 | 第68-70页 |
| 4.3.1 鸡胚脑神经元的体外培养 | 第68页 |
| 4.3.2 基因表达模型的建立 | 第68-70页 |
| 4.4 硒对鸡脑组织及鸡胚脑神经元炎性因子的影响 | 第70-73页 |
| 4.5 硒对鸡脑组织和鸡胚脑神经元凋亡的影响 | 第73-75页 |
| 4.6 硒对鸡脑组织及鸡胚脑神经元中凋亡基因的影响 | 第75-79页 |
| 5 结论 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-101页 |
| 附录 | 第101-111页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第111页 |
