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小衣壳蛋白pⅨ对3型牛腺病毒包装作用的研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
文献综述第12-28页
    第一章 腺病毒研究进展第12-28页
        1.1 腺病毒第12-25页
            1.1.1 腺病毒的形态与结构第12页
            1.1.2 腺病毒的分类第12-13页
            1.1.3 人腺病毒第13-21页
            1.1.4 牛腺病毒第21-25页
                1.1.4.1 牛腺病毒的分类第21页
                1.1.4.2 牛腺病毒3型第21页
                1.1.4.3 BAdV3 的形态与特征第21页
                1.1.4.4 BAdV3 基因组结构和编码蛋白第21-24页
                1.1.4.5 BAdV 的增殖第24-25页
        1.2 小衣壳蛋白Ⅸ第25-28页
            1.2.1 pⅨ的基因结构第25-26页
            1.2.2 pⅨ作为病毒结构蛋白第26页
            1.2.3 pⅨ的转录激活作用第26页
            1.2.4 pⅨ的表面展示作用第26-28页
试验研究第28-55页
    第二章 小衣壳蛋白 pⅨ是牛腺病毒 3 型(BAdV-3)病毒包装的必需基因第28-43页
        2.1 材料与方法第28-33页
            2.1.1 材料第28-29页
                2.1.1.1 细胞第28页
                2.1.1.3 主要试剂第28-29页
                2.1.1.4 主要仪器设备第29页
                2.1.1.5 分子生物学分析软件第29页
            2.1.2 方法第29-33页
                2.1.2.1 重组载体的构建第29-32页
                2.1.2.2 表达 BAdV3-pⅨ的细胞系(VIDO DT1-bpⅨ)的制备第32-33页
                2.1.2.3 重组病毒的拯救及扩增第33页
        2.2 结果第33-40页
            2.2.1 稳定表达 BAdV3-pⅨ的细胞系的构建及鉴定第33-34页
                2.2.1.1 慢病毒质粒 pTRIP-CMV-bpⅨ-10GS-HA 的鉴定第33-34页
                2.2.1.2 稳定表达 BAdV3-pⅨ的细胞系的鉴定第34页
            2.2.2 pⅨ缺失的重组牛腺病毒的包装与拯救第34-38页
                2.2.2.1 BAdV-3 pⅨ区缺失重组质粒的构建与鉴定第34-35页
                2.2.2.2 HAdV-5 pⅨ区缺失质粒的构建与鉴定第35-36页
                2.2.2.3 pⅨ缺失的重组牛腺病毒的包装及 eGFP 的表达第36页
                2.2.2.4 重组腺病毒的感染与复制能力的鉴定第36-37页
                2.2.2.5 pⅨ缺失的重组牛腺病毒在 VIDO DT1-bpⅨ细胞中的拯救第37-38页
            2.2.3 突变 pⅨ蛋白(mATGpⅨ或 pⅨ/10GS/HA)重组牛腺病毒的包装第38-40页
                2.2.3.1 BAdV-3 pⅨ突变体重组质粒的构建与鉴定第38-39页
                2.2.3.2 pⅨ蛋白突变(mATG pⅨ和 pⅨ/10GS/HA)重组 BAdV3 的包装第39-40页
        2.3 讨论第40-42页
        2.4 小结第42-43页
    第三章 小衣壳蛋白 pⅨ主要功能域的研究第43-55页
        3.1 材料与方法第43-45页
            3.1.1 材料第43-44页
                3.1.1.1 细胞第43页
                3.1.1.2 菌株和质粒第43页
                3.1.1.3 主要试剂第43页
                3.1.1.4 引物合成第43-44页
            3.1.2 方法第44-45页
                3.1.2.1 含有 pⅨ蛋白突变体的重组 BAdV-3 质粒的构建第44-45页
                3.1.2.2 重组病毒的拯救及扩增第45页
                3.1.2.3 重组病毒基因组的提取第45页
                3.1.2.4 重组病毒增殖曲线的测定第45页
        3.2 结果第45-53页
            3.2.1 pⅨ蛋白氨基酸序列比对及功能域预测第45-46页
            3.2.2 pⅨ区各个结构域缺失重组 BAdV-3s 的包装第46-49页
                3.2.2.1 BAdV-3 pⅨ突变体(各个结构域缺失)重组质粒的构建与鉴定第46-47页
                3.2.2.2 pⅨ突变体(区各个结构域缺失)重组 BAdV-3 的包装及感染与复制能力的鉴定第47-49页
            3.2.3 含各个结构域嵌合 pⅨ的重组 BAdV-3 的包装第49-53页
                3.2.3.1 BAdV-3 嵌合 pⅨ的重组质粒的构建与鉴定第50页
                3.2.3.2 BAdV-3 嵌合 pⅨ的重组腺病毒的包装及感染与复制能力的鉴定第50-53页
        3.3 讨论第53-54页
        3.4 小结第54-55页
结论第55-56页
参考文献第56-67页
附录第67-69页
致谢第69-70页
作者简介第70页

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