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H1foo基因在小鼠卵母细胞中的表达及H1foo基因四环素诱导表达载体的构建

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
文献综述第12-28页
    第一章 连接组蛋白概述第12-20页
        1.1 连接组蛋白简介第12-13页
        1.2 连接组蛋白家族第13-14页
        1.3 连接组蛋白的结构第14-15页
        1.4 连接组蛋白的生物学功能第15-20页
            1.4.1 连接组蛋白参与染色体高级结构的形成第15-16页
            1.4.2 连接组蛋白结合染色体的动力学第16页
            1.4.3 连接组蛋白的翻译后修饰与染色质动力学第16-20页
    第二章 卵母细胞型连接组蛋白 H1foo 的研究现状第20-25页
        2.1 连接组蛋白 H1foo 的发现第20页
        2.2 连接组蛋白 H1foo 的分子结构第20-22页
        2.3 连接组蛋白 H1foo 的表达规律第22页
        2.4 连接组蛋白 H1foo 的功能第22-25页
            2.4.1 连接组蛋白 H1foo 与卵母细胞成熟第22-23页
            2.4.2 连接组蛋白 H1foo 与核重编程过程第23页
            2.4.3 连接组蛋白 H1foo 与精子染色体重构第23-25页
    第三章 四环素诱导调控表达系统的研究与应用第25-28页
        3.1 四环素诱导调控表达系统的构成及作用机理第25页
        3.2 四环素诱导调控表达系统的类型第25-28页
            3.2.1 Tet-off 调控系统第25-27页
            3.2.2 Tet-on 调控系统第27-28页
试验研究第28-53页
    第四章 H1foo 在小鼠卵母细胞中的表达第28-45页
        4.1 材料方法第28-35页
            4.1.1 仪器第28-29页
            4.1.2 试剂第29页
            4.1.3 试验材料第29页
            4.1.4 真核表达载体 pVenus-H1foo 的构建第29-32页
            4.1.5 体外转录获得 mRNA第32-34页
            4.1.6 小鼠卵母细胞的采集第34页
            4.1.7 超表达 H1foo 对卵母细胞成熟的影响第34-35页
            4.1.8 超表达 H1foo 对纺锤体形态的影响观察第35页
        4.2 结果分析第35-42页
            4.2.1 pVenus-H1foo 载体的构建第35-37页
            4.2.2 线性片段的制备回收第37-38页
            4.2.3 H1foo-Venus 及 Venus 体外转录产物的检测第38-39页
            4.2.4 H1foo-Venus mRNA 及 Venus mRNA 在卵母细胞中的表达第39-40页
            4.2.5 超表达 H1foo 对卵母细胞成熟的影响第40-41页
            4.2.6 超表达 H1foo 对纺锤体形态的影响第41-42页
            4.2.7 突变型 H1foo 在卵母细胞中的表达第42页
        4.3 讨论第42-44页
        4.4 小结第44-45页
            4.4.1 真核表达载体 pH1foo-Venus 的构建第44页
            4.4.2 H1foo-Venus 和 Venus 的体外转录第44页
            4.4.3 H1foo-Venus 和 Venus 在卵母细胞中的表达第44页
            4.4.4 超表达 H1foo 对卵母细胞成熟的影响第44页
            4.4.5 超表达 H1foo 对纺锤体形态的影响第44页
            4.4.6 T-298 位突变不影响 H1foo 在卵母细胞中的定位第44-45页
    第五章 小鼠 H1foo 基因四环素诱导表达系统的构建与表达第45-53页
        5.1 材料和方法第45-49页
            5.1.1 实验仪器第45-46页
            5.1.2 试剂第46页
            5.1.3 所用材料第46页
            5.1.4 试验方法第46-49页
        5.2 结果与分析第49-51页
            5.2.1 Tet-CMV 启动子区扩增结果第49-50页
            5.2.2 重组质粒 pVenus-tet-CMV-H1foo 双酶切鉴定第50页
            5.2.3 重组质粒转染 Hela 细胞后的表达结果第50-51页
        5.3 讨论第51-52页
        5.4 小结第52-53页
            5.4.1 Tet-CMV 启动子区的克隆测序第52页
            5.4.3 Tet-On 诱导表达载体 pVenus-tet-CMV-H1foo 的构建第52-53页
结论第53页
本研究的创新点与进一步研究的课题第53-54页
参考文献第54-59页
致谢第59-60页
作者简介第60页

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