| 中英文缩写 | 第7-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-29页 |
| 1.1 禽白血病病毒研究现状 | 第12-20页 |
| 1.1.1 ALV 的分类 | 第12-13页 |
| 1.1.2 ALV-J 的发现 | 第13页 |
| 1.1.3 ALV-J 病毒结构特征 | 第13-15页 |
| 1.1.4 ALV-J 的流行病学研究现状 | 第15-16页 |
| 1.1.5 ALV-J 的致病性 | 第16-17页 |
| 1.1.6 ALV-J 的病理变化 | 第17-19页 |
| 1.1.7 ALV-J 的诊断 | 第19-20页 |
| 1.1.8 ALV-J 的防治 | 第20页 |
| 1.2 RNA 干扰的研究现状 | 第20-29页 |
| 1.2.1 RNA 干扰的发现 | 第21页 |
| 1.2.2 RNAi 的作用机制 | 第21-23页 |
| 1.2.3 siRNA 的制备 | 第23-25页 |
| 1.2.4 siRNA 与 miRNA | 第25-27页 |
| 1.2.5 RNAi 的临床应用 | 第27页 |
| 1.2.6 RNAi 在禽病研究中的应用 | 第27-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-30页 |
| 2.1.1 病毒、细胞和实验动物 | 第29页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第29页 |
| 2.1.3 试验地点 | 第29页 |
| 2.1.4 实验设备 | 第29-30页 |
| 2.2 实验方法及检测指标 | 第30-42页 |
| 2.2.1 siRNA 筛选及 miRNA 发卡结构设计 | 第30-31页 |
| 2.2.2 真核表达载体的构建 | 第31-32页 |
| 2.2.3 重组干扰表达质粒的转化与鉴定 | 第32-34页 |
| 2.2.3.1 感受态细胞的制备 | 第32页 |
| 2.2.3.2 重组干扰表达质粒的转化 | 第32-33页 |
| 2.2.3.3 去内毒素质粒的抽提 | 第33-34页 |
| 2.2.3.4 质粒的测序鉴定 | 第34页 |
| 2.2.4 间接免疫荧光法对 ALV-J 病毒滴度的测定 | 第34页 |
| 2.2.5 DF-1 细胞禽白血病病毒的接种 | 第34页 |
| 2.2.6 siRNA 重组干扰表达质粒的单独及联合转染 | 第34-35页 |
| 2.2.7 间接免疫荧光法检测 ALV 活病毒囊膜蛋白的表达水平 | 第35页 |
| 2.2.8 Real-time PCR 对 ALV-J 的 mRNA 表达水平的检测 | 第35-37页 |
| 2.2.8.1 细胞总 RNA 的提取 | 第35-36页 |
| 2.2.8.2 RNA 反转录为 cDNA | 第36页 |
| 2.2.8.3 Real-time PCR | 第36-37页 |
| 2.2.9 Western blot 检测病毒囊膜蛋白表达水平 | 第37-38页 |
| 2.2.9.1 细胞总蛋白的提取 | 第37-38页 |
| 2.2.9.2 细胞总蛋白 Western blot 检测病毒囊膜蛋白表达水平 | 第38页 |
| 2.2.10 实验动物病毒及重组表达干扰质粒的接种 | 第38-39页 |
| 2.2.11 临床症状观察 | 第39页 |
| 2.2.12 感染鸡排毒监测 | 第39-40页 |
| 2.2.13 血液学指标检测 | 第40-41页 |
| 2.2.14 大体剖检病变观察 | 第41页 |
| 2.2.15 组织病理学观察 | 第41-42页 |
| 3.结果与分析 | 第42-55页 |
| 3.1 重组干扰表达质粒测序结果 | 第42-44页 |
| 3.2 间接免疫荧光法对 ALV-J 病毒滴度的测定 | 第44页 |
| 3.3 重组干扰表达质粒转染效率的检测 | 第44-45页 |
| 3.4 间接免疫荧光法检测 ALV-J 囊膜蛋白的表达水平 | 第45-46页 |
| 3.5 Real-time PCR 对 ALV-J 的 mRNA 表达水平的检测 | 第46-48页 |
| 3.6 Western blot 检测 ALV-J 囊膜蛋白的表达水平 | 第48-49页 |
| 3.7 临床症状 | 第49页 |
| 3.8 感染鸡排毒监测 | 第49-51页 |
| 3.9 血液学指标检测 | 第51-53页 |
| 3.9.1 血清中抗体的检测 | 第51页 |
| 3.9.2 白细胞数量的检测 | 第51-52页 |
| 3.9.3 血涂片观察 | 第52-53页 |
| 3.10 大体剖检病变 | 第53-54页 |
| 3.11 组织病理学症状 | 第54-55页 |
| 3.12 统计学方法 | 第55页 |
| 4.讨论 | 第55-58页 |
| 5.结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 研究生期间论文发表情况 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
