| 基金项目 | 第4-5页 |
| 符号说明 | 第5-11页 |
| 中文摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-14页 |
| 引言 | 第15-29页 |
| 1.1 禽白血病病毒发展史 | 第15-16页 |
| 1.2 病原学 | 第16-20页 |
| 1.2.1 分类 | 第16页 |
| 1.2.2 形态学 | 第16-17页 |
| 1.2.3 病毒复制、转录、翻译 | 第17页 |
| 1.2.4 理化特性 | 第17-18页 |
| 1.2.5 病毒的全基因组结构 | 第18-19页 |
| 1.2.6 病毒的致肿瘤机制 | 第19-20页 |
| 1.3 分子流行病学 | 第20-22页 |
| 1.3.1 宿主范围 | 第20-21页 |
| 1.3.2 传播方式 | 第21页 |
| 1.3.3 潜伏期 | 第21-22页 |
| 1.3.4 临床特征及病理变化 | 第22页 |
| 1.4 ALV-J 与其它病毒的共感染现状 | 第22-23页 |
| 1.5 ALV-J 基因的变异及其与治病性的相关性分析 | 第23页 |
| 1.6 ALV 的检测与诊断 | 第23-27页 |
| 1.6.1 病毒分离 | 第24页 |
| 1.6.2 酶标免疫荧光检测技术（ELISA） | 第24-25页 |
| 1.6.3 病毒核酸的检测 | 第25-26页 |
| 1.6.4 免疫组化法 | 第26页 |
| 1.6.5 酶分析法 | 第26页 |
| 1.6.6 其它检测方法 | 第26-27页 |
| 1.7 预防和控制 | 第27-28页 |
| 1.7.1 政府主管部门要强化种鸡群 ALV 的监控 | 第27页 |
| 1.7.2 加强对种鸡群 ALV 的净化 | 第27-28页 |
| 1.7.3 强化弱毒疫苗中检测和监控 | 第28页 |
| 1.7.4 原种鸡群的 ALV 净化 | 第28页 |
| 1.8 本研究的目的及意义 | 第28-29页 |
| 2.材料和方法 | 第29-40页 |
| 2.1 材料 | 第29-31页 |
| 2.1.1 病毒来源及背景 | 第29页 |
| 2.1.2 细胞 | 第29页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第29页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第29-30页 |
| 2.1.5 其它相关培养基和溶液配制 | 第30-31页 |
| 2.2 鸡胚成纤维细胞的制备 | 第31页 |
| 2.3 病毒分离、鉴定 | 第31-33页 |
| 2.3.1 病毒分离 | 第31-32页 |
| 2.3.2 鉴定 | 第32-33页 |
| 2.3.2.1 IFA 验证 | 第32页 |
| 2.3.3.2 ELISA 检测 | 第32-33页 |
| 2.4 前病毒 DNA 的提取 | 第33页 |
| 2.5 禽白血病病毒的 PCR 扩增 | 第33-38页 |
| 2.5.1 引物序列 | 第33-34页 |
| 2.5.2 禽白血病病毒 PCR 扩增 | 第34-35页 |
| 2.5.2.1 山东五大地方品种鸡 ALV 分离株 PCR 扩增 | 第34页 |
| 2.5.2.2 ALV-J 全基因组 PCR 扩增 | 第34-35页 |
| 2.5.3 PCR 产物 DNA 凝胶电泳验证、回收及定量 | 第35页 |
| 2.5.4 A 尾连接 | 第35-36页 |
| 2.5.5 DNA 连接 | 第36页 |
| 2.5.6 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第36-37页 |
| 2.5.7 连接产物的转化 | 第37页 |
| 2.5.8 菌液及质粒 DNA PCR 验证 | 第37-38页 |
| 2.5.8.1 菌液 PCR 验证、鉴定 | 第37页 |
| 2.5.8.2 质粒 DNA 的提取、验证 | 第37-38页 |
| 2.6 序列分析 | 第38-40页 |
| 2.6.1 参考毒株 | 第38-39页 |
| 2.6.2 序列分析 | 第39-40页 |
| 2.6.2.1 遗传基因进化树分析 | 第39页 |
| 2.6.2.2 ALV 分离株与参考株的同源性结果 | 第39页 |
| 2.6.2.3 ALV-J 分离株 gp85 基因序列变异情况分析 | 第39页 |
| 2.6.2.4 三个代表性 ALV-J 分离株 E 元件分析比对 | 第39页 |
| 2.6.2.5 U3 转录作用元件的预测分析 | 第39-40页 |
| 3.结果与分析 | 第40-55页 |
| 3.1 分离鉴定结果 | 第40-42页 |
| 3.1.1 IFA 检测结果 | 第40-41页 |
| 3.1.2 ELISA 检测结果 | 第41-42页 |
| 3.2 山东五大地方品种鸡 ALV 分离株 PCR 扩增结果 | 第42-43页 |
| 3.3 ALV-J 全基因组 PCR 扩增结果 | 第43-46页 |
| 3.3.1 ALV-J 全基因组 PCR 扩增凝胶电泳结果 | 第43页 |
| 3.3.2 菌液 PCR 验证结果 | 第43-44页 |
| 3.3.3 质粒 PCR 验证结果 | 第44-46页 |
| 3.4 测序结果 | 第46页 |
| 3.5 序列分析结果 | 第46-53页 |
| 3.5.1 山东五大地方品种鸡 ALV 分离株 PCR 扩增结果分析 | 第46-50页 |
| 3.5.1.1 山东五大地方品种鸡 ALV 分离株同源性分析结果 | 第46-47页 |
| 3.5.1.2 山东五大地方种鸡 ALV 分离株遗传基因进化树 | 第47-48页 |
| 3.5.1.3 山东地方品种鸡 ALV-J 分离株 gp85 基因序列变异情况分析 | 第48-50页 |
| 3.5.2 共感染毒株 ALV-J 全基因组序列分析结果 | 第50-53页 |
| 3.5.2.1 共感染 ALV-J 分离株与参考序列不同片段同源性比对 | 第50页 |
| 3.5.2.2 共感染 ALV-J 分离株全基因组系统发育树分析比对 | 第50-51页 |
| 3.5.2.3 共感染 ALV-J 分离株 E 元件分析比对 | 第51-52页 |
| 3.5.2.4 U3 区转录作用元件的预测分析 | 第52-53页 |
| 3.6 重组序列的分析、比对 | 第53-55页 |
| 4.讨论 | 第55-58页 |
| 4.1 山东地方品种鸡分离株 ALV 主要流行亚型鉴定及 gp85 基因分子特征分析 | 第55-56页 |
| 4.1.1 山东五大地方品种鸡分离株 ALV 主要流行亚型鉴定 | 第55页 |
| 4.1.2 山东地方品种鸡 ALV-Jgp85 基因分子特征分析 | 第55-56页 |
| 4.2 与其它致鸡肿瘤病病毒共感染的代表性 ALV-J 全基因组序列分析 | 第56-58页 |
| 5.结论 | 第58-59页 |
| 6.创新点 | 第59-60页 |
| 7.参考文献 | 第60-69页 |
| 8.致谢 | 第69-70页 |
| 9.硕士期间发表论文情况 | 第70页 |
