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菌丝霉素源抗菌肽对金黄色葡萄球菌乳腺炎的防治及其耐药产生机制的研究

摘要第6-8页
abstract第8-10页
第一章 文献综述第15-34页
    1.1 奶牛乳腺炎第15-17页
        1.1.1 奶牛乳腺炎的病因及分类第15-16页
        1.1.2 奶牛乳腺炎防治研究进展第16-17页
        1.1.3 奶牛乳腺炎小鼠模型第17页
    1.2 金黄色葡萄球菌第17-24页
        1.2.1 金黄色葡萄球菌侵染宿主细胞第18-19页
        1.2.2 金黄色葡萄球菌的抗生素耐药性发生原因第19页
        1.2.3 ROS在细菌抗生素耐药性进化中的作用第19-23页
        1.2.4 金黄色葡萄球菌的抗生素耐药性机制第23-24页
    1.3 抗菌肽第24-33页
        1.3.1 抗菌肽来源及分类第24-25页
        1.3.2 抗菌肽的直接杀菌机制第25-27页
        1.3.3 抗菌肽的免疫调节作用第27-28页
        1.3.4 抗菌肽在畜牧业中的应用第28-30页
        1.3.5 菌丝霉素源抗菌肽研究进展第30-31页
        1.3.6 抗菌肽耐药性的研究进展第31-33页
    1.4 本研究的目的意义第33-34页
第二章 菌丝霉素源抗菌肽对牛奶源金黄色葡萄球菌体外杀菌特性的研究第34-43页
    2.1 试验材料第35页
        2.1.1 培养基及试剂第35页
        2.1.2 试验菌株及细胞第35页
    2.2 试验方法第35-37页
        2.2.1 最小抑菌浓度(MIC)测定第35-36页
        2.2.2 杀菌时间曲线测定第36页
        2.2.3 牛奶中杀菌活性测定第36页
        2.2.4 奶牛乳腺上皮细胞培养及毒性试验第36页
        2.2.5 利用奶牛乳腺上皮细胞评估抗菌肽胞内杀菌能力第36-37页
        2.2.6 数据处理第37页
    2.3 结果与分析第37-40页
        2.3.1 抗菌剂对多株牛奶源金黄色葡萄球菌的MIC值第37-38页
        2.3.2 杀菌时间曲线第38-39页
        2.3.3 牛奶中杀菌活性第39-40页
        2.3.4 胞内杀菌活性第40页
    2.4 讨论第40-42页
    2.5 小结第42-43页
第三章 菌丝霉素源抗菌肽对金黄色葡萄球菌乳腺炎的治疗作用第43-49页
    3.1 试验材料第43页
        3.1.1 试验菌株及动物第43页
        3.1.2 试剂及器材第43页
    3.2 试验方法第43-45页
        3.2.1 动物试验设计第43-44页
        3.2.2 金黄色葡萄球菌接种液的准备第44页
        3.2.3 金黄色葡萄球菌小鼠乳腺炎模型制备及治疗第44页
        3.2.4 金黄色葡萄球菌计数第44页
        3.2.5 组织病理学观察第44-45页
        3.2.6 炎症因子ELISA分析第45页
        3.2.7 数据处理第45页
    3.3 结果与分析第45-47页
        3.3.1 抗菌肽对乳腺组织中金黄色葡萄球菌感染数量的影响第45-46页
        3.3.2 乳腺组织病理学观察第46页
        3.3.3 抗菌肽对感染金黄色葡萄球菌的乳腺组织中TNF-α和IL-6含量的影响第46-47页
    3.4 讨论第47-48页
    3.5 小结第48-49页
第四章 耐抗菌肽金黄色葡萄球菌的诱导及其耐药分子机制第49-66页
    4.1 试验材料第50-52页
        4.1.1 主要试剂第50页
        4.1.2 质粒与菌株第50页
        4.1.3 引物和序列第50页
        4.1.4 主要仪器第50-52页
    4.2 试验方法第52-56页
        4.2.1 MIC测定第52页
        4.2.2 体外诱导耐药试验第52页
        4.2.3 耐药菌株遗传性的测定第52-53页
        4.2.4 基因组提取与全基因组测序第53页
        4.2.5 突变基因的回补第53-56页
        4.2.6 数据处理第56页
    4.3 结果与分析第56-62页
        4.3.1 体外诱导金黄色葡萄球菌的耐药试验第56-57页
        4.3.2 金黄色葡萄球菌抗菌肽耐药性的可遗传性测定第57-59页
        4.3.3 耐药菌株的全基因组测序第59-60页
        4.3.4 BA01611nzR菌株中突变基因的回补第60-62页
    4.4 讨论第62-65页
    4.5 小结第65-66页
第五章 ROS在金黄色葡萄球菌抗菌肽耐药性产生中的作用第66-79页
    5.1 试验材料第67-68页
        5.1.1 主要试剂第67页
        5.1.2 质粒与菌株第67页
        5.1.3 引物及序列第67页
        5.1.4 主要仪器第67-68页
    5.2 试验方法第68-71页
        5.2.1 细菌胞内ROS产量的测定第68-69页
        5.2.2 细菌胞内与ROS清除相关基因的表达量第69页
        5.2.3 细菌突变率的测定第69页
        5.2.4 金黄色葡萄球菌BA01611的基因敲除第69-71页
        5.2.5 数据处理第71页
    5.3 结果与分析第71-76页
        5.3.1 抗菌肽处理后金黄色葡萄球菌胞内ROS的变化第71-72页
        5.3.2 抗菌肽处理后金黄色葡萄球菌中ROS清除酶相关基因的表达量第72页
        5.3.3 抗菌肽处理对金黄色葡萄球菌利福平突变率的影响第72-73页
        5.3.4 胞内ROS的产生与金黄色葡萄球菌利福平突变率的关系第73-76页
    5.4 讨论第76-77页
    5.5 小结第77-79页
第六章 论文总结第79-80页
    6.1 研究结论第79页
    6.2 创新点第79页
    6.3 下一步研究思路第79-80页
参考文献第80-92页
附录第92-101页
缩略词第101-102页
致谢第102-103页
作者简介第103页

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