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程序性坏死诱导系统的建立

中文摘要第3-4页
Abstract第4页
第一章 前言第8-17页
    1.1 定义坏死的研究第8-9页
    1.2 程序性坏死的信号通路第9-11页
    1.3 坏死的执行第11-12页
    1.4 程序性坏死在生理病理过程中的作用第12-13页
    1.5 程序性坏死抑制剂第13-14页
    1.6 四环素控制的转录激活第14-16页
    1.7 研究目的和意义第16-17页
第二章 材料和方法第17-33页
    2.1 材料第17-19页
        2.1.1 细胞第17页
        2.1.2 质粒第17页
        2.1.3 感受态第17页
        2.1.4 主要仪器第17-18页
        2.1.5 主要试剂第18-19页
    2.2 实验方法第19-33页
        2.2.1 主要溶液配制第19-20页
        2.2.2 贴壁细胞RNA的提取第20-21页
        2.2.3 PCR反应第21-22页
        2.2.4 PCR产物纯化第22页
        2.2.5 载体和目的片段酶切反应第22-23页
        2.2.6 胶回收第23页
        2.2.7 载体与目的片段连接第23-24页
        2.2.8 转化第24-25页
        2.2.9 质粒提取第25页
        2.2.10 重组质粒酶切鉴定体系第25-26页
        2.2.11 细胞培养第26页
        2.2.12 DNA转染步骤第26-27页
        2.2.13 上清细胞蛋白提取第27页
        2.2.14 贴壁细胞蛋白提取第27-28页
        2.2.15 组织蛋白提取第28页
        2.2.16 Western blot实验第28-29页
        2.2.17 细胞的免疫荧光第29-30页
        2.2.18 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳第30-31页
        2.2.19 肿瘤细胞系皮下荷瘤移植模型的建立第31页
        2.2.20 冰冻组织切片的制备及免疫荧光第31-33页
第三章 实验结果第33-43页
    3.1 pLVX-Tet One-Puro-RIPK3-2×FKBP重组质粒鉴定第33-34页
    3.2 RIPK3-2×FKBP表达依赖于DOX第34-35页
    3.3 RIPK3-2×FKBP表达与DOX的剂量和诱导时间呈依赖关系第35-36页
    3.4 DOX和Idimer诱导细胞死亡第36-37页
    3.5 DOX和Idimer诱导细胞发生程序性坏死第37-38页
    3.6 DOX和Idimer诱导体系在多种细胞中都能工作第38-39页
    3.7 DOX和Idimer能快速诱导MLKL蛋白磷酸化第39-40页
    3.8 DOX和Idimer诱导体系效率更高可控性更好第40-41页
    3.9 DOX诱导小鼠肿瘤组织中RIPK3表达和MLKL磷酸化第41-43页
第四章 讨论与展望第43-46页
第五章 结论第46-47页
参考文献第47-53页
英文缩略词表第53-54页
在学期间的研究成果第54-55页
致谢第55页

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