| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一篇 文献综述 | 第11-27页 |
| 第一章 干扰素研究概述 | 第11-27页 |
| 1 干扰素的发现 | 第11页 |
| 2 干扰素的分类及基本性质 | 第11-12页 |
| 3 干扰素的产生 | 第12-13页 |
| 4 干扰素的分子结构 | 第13页 |
| 5 干扰素受体及其分布 | 第13-15页 |
| 5.1 干扰素受体 | 第13-14页 |
| 5.2 干扰素受体的分布 | 第14-15页 |
| 6 干扰素的生物学功能及其机制 | 第15-19页 |
| 6.1 干扰素抗病毒作用及机制 | 第15-16页 |
| 6.2 干扰素抗肿瘤作用及机制 | 第16-17页 |
| 6.3 干扰素免疫调节作用及机制 | 第17页 |
| 6.4 干扰素控制细胞凋亡及机制 | 第17-18页 |
| 6.5 干扰素的免疫佐剂作用 | 第18页 |
| 6.6 干扰素的其他作用 | 第18-19页 |
| 7 干扰素的研究进展 | 第19页 |
| 8 干扰素的应用 | 第19-21页 |
| 8.1 干扰素在人医上的应用 | 第19-20页 |
| 8.2 干扰素在畜牧兽医上的应用 | 第20-21页 |
| 9 小结 | 第21-22页 |
| 参考文献 | 第22-27页 |
| 第二篇 试验部分 | 第27-57页 |
| 第一章 猫α和ω干扰素全基因合成及原核表达 | 第27-45页 |
| 1 材料与方法 | 第28-32页 |
| 1.1 试验用质粒与菌株 | 第28页 |
| 1.2 主要试剂与仪器 | 第28页 |
| 1.2.1 表达重组干扰素相关试剂 | 第28页 |
| 1.2.2 主要仪器设备和耗材 | 第28页 |
| 1.3 试验用溶液配制 | 第28页 |
| 1.4 重组干扰素基因的设计与合成 | 第28-29页 |
| 1.5 重组干扰素蛋白的原核表达 | 第29-31页 |
| 1.5.1 重组质粒转化感受态大肠杆菌BL21 | 第29页 |
| 1.5.2 质粒提取 | 第29页 |
| 1.5.3 重组质粒酶切鉴定 | 第29-30页 |
| 1.5.4 重组质粒测序鉴定 | 第30页 |
| 1.5.5 干扰素的诱导表达及鉴定 | 第30页 |
| 1.5.6 大肠杆菌表达的猫α和ω干扰素的可溶性鉴定 | 第30-31页 |
| 1.6 重组干扰素的大量表达 | 第31-32页 |
| 1.6.1 菌体破碎及包涵体提取 | 第31页 |
| 1.6.2 包涵体的洗涤及变性 | 第31页 |
| 1.6.3 目的蛋白透析复性 | 第31-32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-37页 |
| 2.1 优化后的猫α和ω干扰素基因序列 | 第32-33页 |
| 2.2 重组菌诱导表达产物鉴定 | 第33-35页 |
| 2.3 超声裂解后上清和包涵体电泳分析 | 第35-36页 |
| 2.4 重组蛋白纯化后SDS-PAGE分析 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-41页 |
| 3.1 研究意义 | 第38页 |
| 3.2 表达系统的选择 | 第38-39页 |
| 3.3 包涵体的形成及纯化 | 第39-40页 |
| 3.4 蛋白复性 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 第二章 猫α和ω干扰素抗病毒活性研究 | 第45-57页 |
| 1 材料与方法 | 第46-48页 |
| 1.1 试验用细胞及病毒 | 第46页 |
| 1.2 试剂 | 第46页 |
| 1.3 重组猫α干扰素抗VSV活性测定 | 第46-48页 |
| 1.3.1 细胞复苏 | 第46页 |
| 1.3.2 水疱性口炎病毒(VSV)的扩增与保存 | 第46-47页 |
| 1.3.3 病毒效价滴定 | 第47页 |
| 1.3.4 重组猫α干扰素在Vero上抗VSV活性测定 | 第47页 |
| 1.3.5 重组猫α干扰素在F81上抗VSV活性测定 | 第47-48页 |
| 1.4 重组猫ω干扰素抗VSV活性测定 | 第48页 |
| 1.4.1 水疱性口炎病毒(VSV)的扩增与保存 | 第48页 |
| 1.4.2 病毒效价滴定 | 第48页 |
| 1.4.3 重组猫ω干扰素在Vero上抗VSV活性测定 | 第48页 |
| 1.4.4 重组猫ω干扰素在F81上抗VSV活性测定 | 第48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-52页 |
| 2.1 VSV的TCID5o测定 | 第48-49页 |
| 2.1.1 Vero上VSV的增殖与TCID_(50)测定 | 第48-49页 |
| 2.1.2 F81上VSV的增殖与TCID_(50)测定 | 第49页 |
| 2.2 重组猫α干扰素抗VSV活性测定结果 | 第49-50页 |
| 2.2.1 Vero细胞上α干扰素活性的测定 | 第49页 |
| 2.2.2 F81细胞上α干扰素活性的测定 | 第49-50页 |
| 2.3 重组猫ω干扰素抗VSV活性测定结果 | 第50-52页 |
| 2.3.1 Vero细胞上ω干扰素活性的测定 | 第50-51页 |
| 2.3.2 F81细胞上ω干扰素活性的测定 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-55页 |
| 3.1 重组干扰素抗病毒活性的测定 | 第52-53页 |
| 3.2 重组猫α干扰素生物学活性测定 | 第53页 |
| 3.3 重组猫ω干扰素生物学活性测定 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| 全文总结 | 第57-59页 |
| 附录 | 第59-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
