| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-19页 |
| 1.1 蛋白质组学研究的背景及意义 | 第13-14页 |
| 1.2 低丰度蛋白质的富集鉴定 | 第14-17页 |
| 1.2.1 蛋白质组学研究的深度覆盖 | 第14-15页 |
| 1.2.2 低丰度蛋白质富集方法的发展与应用 | 第15-16页 |
| 1.2.3 本课题研究内容及意义 | 第16-17页 |
| 1.3 固定化蛋白酶在蛋白质组学研究中的应用 | 第17-19页 |
| 1.3.1 “鸟枪法”策略在蛋白质组研究中的应用 | 第17页 |
| 1.3.2 固定化酶技术及其在“鸟枪法”蛋白质组学策略中的应用 | 第17-18页 |
| 1.3.3 本课题研究内容及意义 | 第18-19页 |
| 第二章 基于合成RNA的低丰度蛋白质富集鉴定新策略研究 | 第19-39页 |
| 2.1 仪器和试剂 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-26页 |
| 2.2.1 C57BL/6雄性小鼠肝脏细胞核蛋白质的提取 | 第20-21页 |
| 2.2.2 含目的基因的质粒的提取 | 第21页 |
| 2.2.3 目的基因的PCR扩增 | 第21-22页 |
| 2.2.4 PCR扩增产物体外转录RNA | 第22页 |
| 2.2.5 转录所得RNA的RT-PCR验证 | 第22-23页 |
| 2.2.6 合成RNA用于小鼠肝脏细胞核低丰度蛋白质的富集和质谱鉴定 | 第23-24页 |
| 2.2.7 所富集蛋白质的酶解 | 第24页 |
| 2.2.8 质谱检测,数据搜库 | 第24页 |
| 2.2.9 数据分析与处理 | 第24-26页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第26-38页 |
| 2.3.1 体外转录合成RNA的序列正确性评价 | 第28-32页 |
| 2.3.2 体外转录合成RNA探针用于鼠肝细胞核低丰度蛋白质的富集和鉴定 | 第32-38页 |
| 2.4 本章小结 | 第38-39页 |
| 第三章 基于温度敏感型载体材料的固定化蛋白酶的制备及在蛋白质组学研究中的应用 | 第39-53页 |
| 3.1 仪器和试剂 | 第39-40页 |
| 3.2 实验方法 | 第40-43页 |
| 3.2.1 N-丙烯酰甘氨酰胺(NAGA)的合成 | 第40页 |
| 3.2.2 UCST温敏型共聚物poly(NAGA-co-UnAl)的合成 | 第40页 |
| 3.2.3 UCST温敏型共聚物poly(NAGA-co-UnAl)红外光谱(FT-IR)测定 | 第40-41页 |
| 3.2.4 UCST温敏型共聚物poly(NAGA-co-UnAl)温敏性能测试 | 第41页 |
| 3.2.5 胰蛋白酶在poly(NAGA-co-UnAl)上的固定 | 第41页 |
| 3.2.6 poly(NAGA-co-UnAl)-trypsin酶解标准蛋白 | 第41-42页 |
| 3.2.7 人宫颈癌细胞(HeLa)全蛋白的提取 | 第42页 |
| 3.2.8 poly(NAGA-co-UnAl)-trypsin酶解全蛋白 | 第42页 |
| 3.2.9 对标准蛋白BSA酶解产物的质谱鉴定 | 第42页 |
| 3.2.10 对复杂蛋白HeLa全蛋白酶解产物的质谱鉴定 | 第42-43页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第43-52页 |
| 3.3.1 UCST温敏型共聚物的表征 | 第44-47页 |
| 3.3.2 UCST温敏型载体固定化胰蛋白酶的性能评价及在蛋白质酶解和质谱鉴定中的应用 | 第47-52页 |
| 3.4 本章小结 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 附录 | 第61-71页 |
| 发表文章 | 第71-85页 |
| 个人简历 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
