| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1 骨骼肌肌纤维的分类、特征及对肉质的影响 | 第13-16页 |
| 1.1 骨骼肌肌纤维的分类 | 第13-14页 |
| 1.2 骨骼肌肌纤维不同类型的特征 | 第14-15页 |
| 1.3 骨骼肌不同肌纤维类型对肉质的影响 | 第15-16页 |
| 2 调控肌纤维类型的信号通路 | 第16-19页 |
| 2.1 胰岛素样生长因子（IGFS）信号通路 | 第17页 |
| 2.2 钙调磷酸酶-活性T细胞核因子（CaN-NFAT）信号通路 | 第17-18页 |
| 2.3 生肌调节因子（MRFS）途径 | 第18-19页 |
| 3 FHL3家族的研究进展 | 第19-22页 |
| 3.1 LIM蛋白的分类和功能 | 第19-20页 |
| 3.2 FHL家族成员及特点 | 第20-21页 |
| 3.3 FHL3的功能及其调控机制 | 第21-22页 |
| 4 转基因动物的研究进展及制备方法 | 第22-24页 |
| 5 研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 第二章 材料和方法 | 第25-47页 |
| 1 试验材料 | 第25-30页 |
| 1.1 试验样品 | 第25页 |
| 1.2 主要仪器和设备 | 第25-27页 |
| 1.3 主要试剂与试剂盒 | 第27-28页 |
| 1.4 常用试剂及配制 | 第28-29页 |
| 1.5 应用的生物信息学网站及分析软件 | 第29-30页 |
| 1.6 所用载体 | 第30页 |
| 2 试验方法 | 第30-47页 |
| 2.1 细胞培养 | 第30-31页 |
| 2.1.1 细胞的复苏 | 第30-31页 |
| 2.1.2 C2C12细胞的增殖培养 | 第31页 |
| 2.1.3 C2C12细胞的分化培养 | 第31页 |
| 2.1.4 细胞的冻存 | 第31页 |
| 2.2 FHL3转基因载体构建 | 第31-36页 |
| 2.2.1 总RNA的提取和cDNA的制备 | 第31-33页 |
| 2.2.2 小鼠FHL3 cDNA的克隆 | 第33-34页 |
| 2.2.3 琼脂糖凝胶电泳和成像 | 第34页 |
| 2.2.4 PCR产物的胶回收和克隆测序 | 第34-35页 |
| 2.2.5 质粒提取 | 第35页 |
| 2.2.6 pEGFP-N1L-MCK-FHL3转基因载体的酶切鉴定 | 第35-36页 |
| 2.3 转基因小鼠的饲养 | 第36页 |
| 2.4 鼠尾DNA提取 | 第36-37页 |
| 2.5 Quantitative real-time PCR分析 | 第37-38页 |
| 2.6 转基因小鼠绝对定量拷贝数检测 | 第38-39页 |
| 2.7 转基因小鼠插入位点检测 | 第39-41页 |
| 2.7.1 热不对称交错式PCR及引物序列 | 第39-40页 |
| 2.7.2 琼脂糖凝胶电泳和成像 | 第40页 |
| 2.7.3 PCR产物的胶回收和克隆测序 | 第40页 |
| 2.7.4 外源基因插入位点验证 | 第40-41页 |
| 2.7.5 琼脂糖凝胶电泳和成像 | 第41页 |
| 2.8 Western blotting分析 | 第41-44页 |
| 2.8.1 蛋白提取 | 第41-42页 |
| 2.8.2 BCA蛋白浓度测定 | 第42页 |
| 2.8.3 SDS-PAGE电泳 | 第42-43页 |
| 2.8.4 转膜 | 第43页 |
| 2.8.5 封闭 | 第43页 |
| 2.8.6 免疫反应 | 第43页 |
| 2.8.7 ECL化学发光检测 | 第43-44页 |
| 2.9 转基因小鼠的形态学检测 | 第44-47页 |
| 2.9.1 转基因小鼠组织样品的采取 | 第44页 |
| 2.9.2 石蜡切片的制作 | 第44页 |
| 2.9.3 HE染色 | 第44-45页 |
| 2.9.4 骨骼肌冰冻切片及ATP酶染色 | 第45页 |
| 2.9.5 琥珀酸脱氢酶染色 | 第45-47页 |
| 第三章 研究结果与分析 | 第47-59页 |
| 1. 构建肌肉特异表达FHL3基因的转基因载体 | 第47-48页 |
| 2. 转FHL3基因小鼠传代以及PCR检测筛选 | 第48页 |
| 3. 转FHL3基因小鼠遗传性能及体重的变化 | 第48-50页 |
| 4. 转FHL3基因小鼠睾丸组织形态的变化 | 第50-51页 |
| 5. 外源基因拷贝数检测 | 第51-52页 |
| 6. 外源基因插入位点的研究 | 第52-54页 |
| 7. 转FHL3基因小鼠的组织表达谱 | 第54页 |
| 8. 转FHL3基因小鼠肌肉HE染色 | 第54-55页 |
| 9. 转FHL3基因小鼠中不同肌纤维类型的变化 | 第55-58页 |
| 10.转FHL3基因小鼠不同肌纤维类型的形态学鉴定 | 第58-59页 |
| 第四章 讨论 | 第59-63页 |
| 1. 转FHL3基因小鼠的拷贝数、插入位点研究 | 第59-60页 |
| 2. 转FHL3基因小鼠繁殖性状的研究 | 第60-61页 |
| 3. 转FHL3基因小鼠肌纤维数目和横截面积的变化 | 第61页 |
| 4. 转FHL3基因小鼠中不同肌纤维类型的变化 | 第61-63页 |
| 第五章 小结 | 第63-64页 |
| 1. 主要研究结果 | 第63页 |
| 2. 下一步工作计划 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-79页 |
| 在读期间发表的文章 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
