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二十五株丝状真菌及其次级代谢产物的分离纯化与鉴定

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 绪论第13-34页
    1.1 天然产物的研究现状第13-14页
    1.2 植物内生真菌次级代谢产物的研究第14-22页
        1.2.1 萜类第15-16页
        1.2.2 生物碱第16-18页
        1.2.3 酯类第18-20页
        1.2.4 醌类第20-21页
        1.2.5 酚类及有机酸类第21页
        1.2.6 其他第21-22页
    1.3 毛壳属真菌次级代谢产物的研究第22-26页
        1.3.1 球毛壳素第23-24页
        1.3.2 Azaphilones第24页
        1.3.3 二酮哌嗪第24-25页
        1.3.4 甾体化合物第25页
        1.3.5 色酮和吡喃酮第25-26页
        1.3.6 其他第26页
    1.4 表观遗传修饰第26-32页
        1.4.1 DNA甲基化第27-28页
        1.4.2 组蛋白修饰第28页
        1.4.3 表观遗传修饰应用于植物内生真菌第28-30页
        1.4.4 表观遗传修饰应用于毛壳属真菌第30-32页
    1.5 本论文的研究内容和意义第32-34页
第二章 植物内生真菌的分离纯化及鉴定第34-50页
    2.1 前言第34页
    2.2 材料与方法第34-39页
        2.2.1 植物的采摘第34-35页
        2.2.2 分离培养基的制备第35页
        2.2.3 植物内生真菌的分离纯化第35-36页
        2.2.4 植物内生真菌DNA的提取第36-37页
        2.2.5 目标DNA片段的PCR扩增第37页
        2.2.6 DNA片段的回收第37-38页
        2.2.7 测序第38-39页
        2.2.8 测序结果分析第39页
    2.3 实验结果第39-48页
        2.3.1 菌落形态特征第39-41页
        2.3.2 PCR产物的检测第41-42页
        2.3.3 28S rDNA D1/D2 区域序列的分析第42-47页
        2.3.4 多重序列对比及构建系统发育树第47-48页
    2.4 本章小结第48-50页
第三章 二十五株丝状真菌的发酵培养第50-70页
    3.1 前言第50页
    3.2 材料与方法第50-53页
        3.2.1 供试菌株第50-51页
        3.2.2 培养基第51页
        3.2.3 菌株的发酵培养第51-52页
        3.2.4 真菌次级代谢产物的分析第52页
        3.2.5 表观遗传试剂的添加第52页
        3.2.6 细菌脂多糖的添加第52-53页
    3.3 实验结果第53-69页
        3.3.1 表观遗传试剂对植物内生真菌次级代谢产物的影响第53-64页
        3.3.2 表观遗传试剂对毛壳属真菌次级代谢产物的影响第64-67页
        3.3.3 细菌脂多糖对植物内生真菌次级代谢产物的影响第67-68页
        3.3.4 真菌的大量培养第68-69页
    3.4 本章小结第69-70页
第四章 真菌次级代谢产物的分离纯化及结构鉴定第70-127页
    4.1 前言第70页
    4.2 材料与方法第70-73页
        4.2.1 硅胶柱层析第70页
        4.2.2 Sephadex LH-20 凝胶柱层析第70-71页
        4.2.3 ODS反相柱层析第71页
        4.2.4 薄层色谱分析及纯化第71页
        4.2.5 质谱的测定第71页
        4.2.6 核磁共振波谱的测定第71-72页
        4.2.7 旋光度的测定第72页
        4.2.8 Mosher法测定绝对构型第72页
        4.2.9 VCD法测定绝对构型第72-73页
    4.3 实验结果第73-126页
        4.3.1 菌株ZYHY培养液粗提物中化合物的分离过程第73页
        4.3.2 菌株ZYHY培养液中分离得到的化合物的结构鉴定第73-82页
        4.3.3 菌株HGZJ培养液粗提物中化合物的分离过程第82-83页
        4.3.4 菌株HGZJ培养液中分离得到的化合物的结构鉴定第83-105页
        4.3.5 菌株C. pil培养液粗提物中化合物的分离过程第105-106页
        4.3.6 菌株C. pil培养液中分离得到的化合物的结构鉴定第106-122页
        4.3.7 化合物CPIL-3 和CPIL-4 旋光度的测定第122页
        4.3.8 化合物CPIL-4 绝对构型的测定第122-126页
    4.4 本章小结第126-127页
第五章 化合物生物活性的初步评定第127-148页
    5.1 前言第127页
    5.2 材料与方法第127-131页
        5.2.1 抗氧化活性的测定第127-128页
        5.2.2 抗癌活性的测定第128-129页
            5.2.2.1 细胞培养第128-129页
            5.2.2.2 MTT实验第129页
        5.2.3 抗肝损伤活性的测定第129-131页
            5.2.3.1 细胞培养第130页
            5.2.3.2 细胞毒性的测定第130页
            5.2.3.3 CCl_4损伤肝细胞模型的建立第130-131页
            5.2.3.4 对CCl_4损伤肝细胞的保护作用的测定第131页
    5.3 实验结果第131-146页
        5.3.1 DPPH自由基清除能力第131-132页
        5.3.2 抗癌活性第132-142页
            5.3.2.1 细胞形态的变化第132-138页
            5.3.2.2 细胞增殖抑制率的变化第138-142页
        5.3.3 护肝损伤活性第142-146页
            5.3.3.1 细胞毒性第142-143页
            5.3.3.2 肝细胞损伤模型第143-145页
            5.3.3.3 对肝细胞的保护作用第145-146页
    5.4 本章小结第146-148页
结论第148-152页
参考文献第152-166页
攻读博士学位期间取得的研究成果第166-168页
致谢第168-169页
附件第169页

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