| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-25页 |
| ·纳米材料 | 第14-17页 |
| ·概述 | 第14页 |
| ·纳米基因载体的种类 | 第14-16页 |
| ·纳米基因载体的特点 | 第16-17页 |
| ·纳米基因载体的转运机制 | 第17页 |
| ·磁性纳米材料 | 第17-19页 |
| ·磁性纳米材料的特点、种类及结构 | 第17-18页 |
| ·磁性纳米材料的应用 | 第18-19页 |
| ·磁性纳米基因载体 | 第19-24页 |
| ·磁性纳米基因载体的特点 | 第19-22页 |
| ·磁性纳米基因载体研究进展 | 第22-24页 |
| ·本研究的目的、意义及内容 | 第24-25页 |
| ·研究目的与意义 | 第24页 |
| ·研究内容 | 第24-25页 |
| 第二章 磁性纳米颗粒转运体系的建立及基因转运效率评价 | 第25-40页 |
| ·实验材料及仪器 | 第25-26页 |
| ·试剂 | 第25-26页 |
| ·菌株和载体 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·主要溶液的配制 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-31页 |
| ·质粒的提取 | 第26-28页 |
| ·磁性纳米颗粒的表征 | 第28页 |
| ·磁性纳米颗粒的 DNA 结合实验 | 第28-29页 |
| ·磁性纳米颗粒的 DNA 保护实验 | 第29页 |
| ·磁性纳米颗粒的细胞毒性实验 | 第29-30页 |
| ·细胞转染 | 第30-31页 |
| ·结果与分析 | 第31-38页 |
| ·磁性纳米颗粒的表征 | 第31-33页 |
| ·DNA 结合实验 | 第33-34页 |
| ·DNA 保护实验 | 第34-35页 |
| ·细胞毒性实验 | 第35-37页 |
| ·细胞转染 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| ·本章小结 | 第39-40页 |
| 第三章 磁性纳米颗粒介导 RC2 对 293T 细胞流感病毒感染的抑制作用 | 第40-56页 |
| ·实验材料及仪器 | 第40-43页 |
| ·试剂 | 第40-41页 |
| ·质粒和引物的合成及 DNA 测序 | 第41页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| ·主要溶液的配制 | 第41-43页 |
| ·实验方法 | 第43-50页 |
| ·基因的合成 | 第43页 |
| ·重组表达载体的构建和鉴定 | 第43-46页 |
| ·质粒的提取 | 第46页 |
| ·酶切片段的回收 | 第46页 |
| ·酶切、连接及转化 | 第46-47页 |
| ·H5N1 流感病毒毒株的分离培养及毒力测定 | 第47-48页 |
| ·细胞转染 | 第48页 |
| ·细胞样品的处理 | 第48-49页 |
| ·Western blotting | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-54页 |
| ·重组表达载体的构建和鉴定 | 第50-52页 |
| ·荧光蛋白和串联的 RC2 在 293T 细胞中的表达 | 第52-53页 |
| ·表达产物对流感病毒 H5N1 的抑制效果 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| ·本章小结 | 第55-56页 |
| 第四章 鸡胚成纤维细胞系及磁转鸡胚成纤维细胞体系的建立 | 第56-63页 |
| ·实验材料及仪器 | 第56-57页 |
| ·试剂 | 第56-57页 |
| ·SPF 鸡胚 | 第57页 |
| ·菌株和载体 | 第57页 |
| ·主要仪器 | 第57页 |
| ·主要溶液的配制 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-59页 |
| ·鸡胚胎成纤维细胞的制备 | 第57页 |
| ·鸡胚胎成纤维细胞的传代 | 第57-58页 |
| ·细胞的冷冻 | 第58页 |
| ·细胞的复苏 | 第58页 |
| ·鸡胚成纤维细胞对 G418 毒性敏感性检测 | 第58页 |
| ·质粒 pEGFP-N1 磁转染鸡胚成纤维细胞 | 第58页 |
| ·阳性细胞的筛选 | 第58页 |
| ·阳性细胞克隆的 PCR 检测 | 第58-59页 |
| ·结果与分析 | 第59-61页 |
| ·鸡胚胎成纤维细胞的分离建系 | 第59-60页 |
| ·鸡胚胎成纤维细胞对 G418 毒性敏感性检测 | 第60页 |
| ·质粒 pEGFP-N1 磁转染鸡胚胎成纤维细胞 | 第60-61页 |
| ·阳性细胞的 PCR 检测 | 第61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| ·本章小结 | 第62-63页 |
| 第五章 磁性纳米颗粒介导 RC2 对 CEF 细胞及鸡胚流感病毒感染的抑制作用 | 第63-68页 |
| ·实验材料及仪器 | 第63页 |
| ·实验方法 | 第63-65页 |
| ·CEF 细胞的复苏 | 第63页 |
| ·质粒 pCDNA4-dTomato-2A-3R2/6R2 磁转染鸡胚成纤维细胞 | 第63页 |
| ·转染细胞感染 H5N1 病毒 | 第63-64页 |
| ·质粒 pCDNA4-dTomato-2A-3R2/6R2 磁转染鸡胚及转染鸡胚感染 H5N1 病毒 | 第64页 |
| ·细胞 RNA 的提取及 cDNA 第一链的合成 | 第64页 |
| ·实时定量 PCR | 第64-65页 |
| ·结果与分析 | 第65-67页 |
| ·CEF 细胞中表达产物对流感病毒 H5N1 的抑制效果 | 第65-66页 |
| ·鸡胚中表达产物对流感病毒 H5N1 的抑制效果 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67页 |
| ·本章小结 | 第67-68页 |
| 第六章 结论与讨论 | 第68-70页 |
| ·全文结论 | 第68页 |
| ·论文的创新点 | 第68-69页 |
| ·存在问题及展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-82页 |
| 附录 | 第82-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 作者简历 | 第87页 |
