| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-22页 |
| 1.1 水稻稻瘟病 | 第10-12页 |
| 1.1.1 水稻稻瘟病的危害 | 第10页 |
| 1.1.2 稻瘟病侵染机理 | 第10-11页 |
| 1.1.3 稻瘟病的防治措施 | 第11-12页 |
| 1.2 植物免疫机制 | 第12-13页 |
| 1.3 水稻抗稻瘟病基因的研究 | 第13-15页 |
| 1.3.1 完全抗性基因 | 第13-14页 |
| 1.3.2 部分抗性基因 | 第14-15页 |
| 1.4 植物类受体蛋白激酶 | 第15-16页 |
| 1.5 水稻抗病相关的激素 | 第16-18页 |
| 1.6 RNA干扰技术 | 第18-19页 |
| 1.7 基因编辑技术的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.7.1 锌指核酸酶技术 | 第19页 |
| 1.7.2 TALEN核酸酶技术 | 第19-20页 |
| 1.7.3 CRISPR/Cas技术 | 第20-21页 |
| 1.8 本研究的意义 | 第21-22页 |
| 第2章 水稻品种TJ394对不同稻瘟菌菌株的接种反应 | 第22-28页 |
| 2.1 材料和方法 | 第22-25页 |
| 2.1.1 供试水稻品种 | 第22页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第23页 |
| 2.1.4 水稻发芽和育苗 | 第23-24页 |
| 2.1.5 稻瘟病菌活化培养和孢子收集 | 第24页 |
| 2.1.6 稻瘟菌孢子喷雾接种 | 第24-25页 |
| 2.1.7 病级数据的统计分析 | 第25页 |
| 2.2 结果与分析 | 第25-27页 |
| 2.3 小结 | 第27-28页 |
| 第3章 水稻抗性相关基因RNAi转基因株系的接种鉴定 | 第28-48页 |
| 3.1 材料和方法 | 第28-34页 |
| 3.1.1 供试水稻品种 | 第28-29页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第29-30页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第30页 |
| 3.1.4 转基因水稻育苗 | 第30-31页 |
| 3.1.5 稻瘟病菌活化培养和孢子收集 | 第31页 |
| 3.1.6 稻瘟菌孢子喷雾接种 | 第31-32页 |
| 3.1.7 病级数据的统计分析 | 第32页 |
| 3.1.8 水稻叶片组织取样 | 第32页 |
| 3.1.9 水稻RNA提取和纯化 | 第32-33页 |
| 3.1.10 cDNA的合成与半定量RT-PCR检测 | 第33-34页 |
| 3.1.11 水稻靶基因的qRT-PCR检测 | 第34页 |
| 3.2 结果和分析 | 第34-45页 |
| 3.2.1 RNAi转基因水稻的稻瘟病抗性鉴定 | 第34-41页 |
| 3.2.2 RNAi转基因水稻靶基因转录水平的qRT-PCR分析 | 第41-42页 |
| 3.2.3 XY23和XY14基因的独立转化系接种鉴定 | 第42-45页 |
| 3.3 讨论 | 第45-48页 |
| 第4章 基于CRISPR/Cas9技术的水稻pi21基因编辑材料的创制及稻瘟病抗性鉴定 | 第48-68页 |
| 4.1 材料和方法 | 第48-53页 |
| 4.1.1 供试材料 | 第48页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第48-49页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第49页 |
| 4.1.4 DNA载体构建 | 第49-50页 |
| 4.1.5 阳性转基因水稻植株的获得及验证 | 第50页 |
| 4.1.6 靶序列酶切和测序分析 | 第50页 |
| 4.1.7 水稻发芽和育苗 | 第50-51页 |
| 4.1.8 稻瘟病菌活化培养和孢子收集 | 第51页 |
| 4.1.9 孢子喷雾接种和病级调查 | 第51页 |
| 4.1.10 水稻叶片接种后取样 | 第51页 |
| 4.1.11 水稻RNA提取和纯化 | 第51页 |
| 4.1.12 cDNA的合成与半定量RT-PCR检测 | 第51-52页 |
| 4.1.13 水稻病程相关基因的qRT-PCR检测 | 第52-53页 |
| 4.2 结果和分析 | 第53-64页 |
| 4.2.1 日本晴Pi21基因的靶位点设计 | 第53页 |
| 4.2.2 水稻T_0转化植株的突变检测 | 第53-54页 |
| 4.2.3 T_1植株T-DNA的剔除和pi21纯合突变的筛选 | 第54-57页 |
| 4.2.4 pi21基因编辑株系的抗稻瘟病接种鉴定 | 第57-63页 |
| 4.2.5 pi21基因编辑株系PR基因的表达分析 | 第63-64页 |
| 4.3 讨论 | 第64-68页 |
| 第5章 结论和展望 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-77页 |
| 附录1 培养基配制 | 第77-79页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80-82页 |
