| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 前言 | 第9-16页 |
| 1.1 铬对环境的污染现状及治理 | 第9-12页 |
| 1.1.1 铬污染现状及毒性 | 第9-10页 |
| 1.1.2 铬污染的治理办法 | 第10-12页 |
| 1.2 常见的铬还原酶 | 第12-13页 |
| 1.3 萘污染现状及污染处理 | 第13-14页 |
| 1.3.1 萘污染现状及毒性 | 第13-14页 |
| 1.3.2 萘的生物修复 | 第14页 |
| 1.4 蛋白质结构生物学发展及意义 | 第14-15页 |
| 1.5 本研究的立项依据及目的 | 第15-16页 |
| 第二章 材料和方法 | 第16-24页 |
| 2.1 蛋白质表达载体构建 | 第16-17页 |
| 2.1.1 LZ-4 基因组DNA的提取和PCR扩增 | 第16页 |
| 2.1.2 质粒提取和感受态的制备 | 第16-17页 |
| 2.1.3 双酶切及连接 | 第17页 |
| 2.1.4 转化 | 第17页 |
| 2.1.5 酶切验证及测序 | 第17页 |
| 2.2 蛋白质表达检测 | 第17-19页 |
| 2.2.1 蛋白质诱导表达及条件优化 | 第17-18页 |
| 2.2.2 蛋白质表达初步检测 | 第18页 |
| 2.2.3 蛋白质相关参数 | 第18-19页 |
| 2.3 蛋白过表达、纯化及浓缩 | 第19-20页 |
| 2.3.1 蛋白过表达 | 第19页 |
| 2.3.2 蛋白质纯化 | 第19-20页 |
| 2.3.3 蛋白浓缩 | 第20页 |
| 2.4 酶活反应 | 第20-22页 |
| 2.4.1 NahG和NahAa体外酶活实验 | 第20-21页 |
| 2.4.2 NahG和NahAa体内酶活反应 | 第21页 |
| 2.4.3 酶活反应相关系数的测定 | 第21-22页 |
| 2.4.4 六价铬的测定 | 第22页 |
| 2.5 蛋白质辅因子检测 | 第22页 |
| 2.6 NahE蛋白结晶 | 第22-24页 |
| 2.6.1 蛋白初筛 | 第22-23页 |
| 2.6.2 结晶条件优化 | 第23-24页 |
| 第三章 结果 | 第24-40页 |
| 3.1 NahAa | 第24-28页 |
| 3.1.1 NahAa蛋白过表达及纯化 | 第24页 |
| 3.1.2 NahAa蛋白辅因子检测 | 第24-27页 |
| 3.1.3 NahAa蛋白体外酶活 | 第27页 |
| 3.1.4 NahAa蛋白体内酶活 | 第27-28页 |
| 3.2 NahG | 第28-36页 |
| 3.2.1 NahG蛋白过表达及纯化 | 第28-29页 |
| 3.2.2 NahG蛋白辅因子检测 | 第29-30页 |
| 3.2.3 NahG蛋白体外酶活 | 第30-33页 |
| 3.2.4 NahG蛋白酶活相关系数测定 | 第33-36页 |
| 3.2.5 NahG蛋白体内酶活 | 第36页 |
| 3.3 NahE | 第36-37页 |
| 3.3.1 NahE晶体初筛结果 | 第36-37页 |
| 3.3.2 NahE晶体优化结果 | 第37页 |
| 3.4 NahR | 第37-40页 |
| 3.4.1 NahR蛋白表达检测 | 第37-40页 |
| 第四章 讨论 | 第40-42页 |
| 4.1 NahAa | 第40页 |
| 4.2 NahG | 第40-41页 |
| 4.3 NahE | 第41页 |
| 4.4 NahR | 第41-42页 |
| 第五章 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 在学期间的研究成果 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 附录 | 第51-54页 |