| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 缩略语 | 第13-14页 |
| 第一章 脂蛋白的研究进展 | 第14页 |
| 前言 | 第14-19页 |
| 1 脂蛋白的突破性发现 | 第14页 |
| 2 脂蛋白的分类、结构特点及功能 | 第14-16页 |
| 3 脂蛋白相关的疾病 | 第16-18页 |
| ·脂蛋白对冠心病（CHD）的影响 | 第16页 |
| ·脂蛋白对动脉粥样硬化（AS）的影响 | 第16-17页 |
| ·脂蛋白与丙型肝炎病毒（HCV）蛋白之间的相互作用 | 第17页 |
| ·脂蛋白对内皮细胞（VEC）的影响 | 第17-18页 |
| 4 研究脂蛋白的意义与展望 | 第18-19页 |
| 第二章 实验方案设计 | 第19-21页 |
| 1 实验目的和意义 | 第19页 |
| 2 研究内容 | 第19-20页 |
| 3 实验流程图 | 第20-21页 |
| 第三章 生物信息学分析 | 第21-29页 |
| 1 生物信息学工具 | 第21页 |
| 2 方法 | 第21-22页 |
| ·BmLp-c21 基因的获得 | 第21页 |
| ·BmLp-c21 基因的序列分析 | 第21-22页 |
| 3 结果 | 第22-27页 |
| ·BmLp-c21 的基本信息 | 第22页 |
| ·BmLp-c21 蛋白的疏水性分析 | 第22-23页 |
| ·BmLp-c21 蛋白的信号肽分析 | 第23-24页 |
| ·BmLp-c21 蛋白的跨膜区预测 | 第24-25页 |
| ·BmLp-c21 蛋白定位的预测 | 第25页 |
| ·BmLp-c21 蛋白功能位点分析 | 第25页 |
| ·BmLp-c21 蛋白的二级结构预测 | 第25-26页 |
| ·BmLp-c21 蛋白的高级结构预测 | 第26页 |
| ·BmLp-c21 氨基酸序列同源性分析 | 第26-27页 |
| 4 讨论 | 第27-29页 |
| 第四章 原核表达及抗体制备 | 第29-49页 |
| 1 试剂与材料 | 第29-33页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·试剂 | 第29页 |
| ·试剂的配制 | 第29-33页 |
| 2 方法 | 第33-42页 |
| ·PCR 扩增获得完整的ORF 序列 | 第33-34页 |
| ·纯化PCR 产物 | 第34页 |
| ·PCR 产物与表达载体pET-28a(+)的双酶切 | 第34-35页 |
| ·酶切产物的纯化 | 第35页 |
| ·连接反应 | 第35页 |
| ·E.coli TG1、Rosetta（DE3）感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
| ·连接产物的转化 | 第36页 |
| ·重组pET-28a(+)-BmLp-c21 质粒的筛选与鉴定 | 第36-37页 |
| ·序列的测定 | 第37-38页 |
| ·重组质粒的转化及鉴定 | 第38页 |
| ·BmLp-c21 融合蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第38-39页 |
| ·SDS-PAGE 电泳分析 | 第39页 |
| ·包涵体的洗涤与溶解 | 第39页 |
| ·融合蛋白的亲和层析 | 第39-40页 |
| ·Bradford 检测方法 | 第40页 |
| ·抗体的制备 | 第40-41页 |
| ·ELISA 测定抗体效价 | 第41-42页 |
| ·Western blotting 检测 | 第42页 |
| 3 结果 | 第42-46页 |
| ·PCR 扩增完整的ORF 序列 | 第42-43页 |
| ·重组质粒pET-28a(+)-BmLp-c21 的鉴定 | 第43-44页 |
| ·序列测定 | 第44页 |
| ·融合蛋白的诱导表达及纯化结果 | 第44-45页 |
| ·抗体的效价测定 | 第45页 |
| ·Western blotting 检测抗体的特异性 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-49页 |
| 第五章 组织定位 | 第49-60页 |
| 1 材料与试剂 | 第49-50页 |
| ·材料 | 第49页 |
| ·试剂 | 第49页 |
| ·试剂的配制 | 第49-50页 |
| 2 方法 | 第50-53页 |
| ·总RNA 的提取 | 第50页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第50-51页 |
| ·荧光定量PCR | 第51-53页 |
| ·总蛋白质的提取及定量 | 第53页 |
| ·Western blotting 检测BmLp-c21 蛋白的表达水平 | 第53页 |
| 3 结果 | 第53-58页 |
| ·家蚕发育过程中BmLp-c21 的mRNA 量的比较 | 第53-55页 |
| ·五龄幼虫各组织中BmLp-c21 的mRNA 量的比较 | 第55-57页 |
| ·Western blotting 检测家蚕发育过程中BmLp-c21 蛋白表达量的变化 | 第57页 |
| ·Western blotting 检测家蚕五龄幼虫各组织中BmLp-c21 蛋白表达量的变化 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| 第六章 亚细胞定位 | 第60-64页 |
| 1 材料与试剂 | 第60-61页 |
| ·材料 | 第60页 |
| ·试剂 | 第60页 |
| ·试剂配制 | 第60-61页 |
| 2 方法 | 第61页 |
| 3 结果 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-64页 |
| 总结 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
