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金龙胆草苦蒿素途径两个关键酶基因的克隆以及表达分析

中文摘要第4-6页
Abstract第6-8页
第一章 文献综述第12-21页
    1 植物中的萜类化合物第12-13页
    2 金龙胆草中的萜类第13-14页
    3 萜类的代谢途径第14-15页
    4 苦蒿素的代谢途径第15页
    5 1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶(DXS)第15-17页
        5.1 DXS的基本结构及催化机制第15-16页
        5.2 DXS的结构特征第16-17页
        5.3 DXS的调控机制第17页
    6 牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶(GGPPS)第17-19页
        6.1 GGPPS的结构特征第17-18页
        6.2 GGPPS的基因克隆及蛋白定位第18-19页
        6.3 GGPPS基因的表达调控第19页
    7 植物基因克隆技术的进展第19页
    8 本研究的目的和意义第19-21页
第二章 金龙胆草管家基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因的克隆第21-32页
    1 材料第21-22页
        1.1 样品来源第21页
        1.2 菌株及载体第21页
        1.3 分子生物学试剂第21-22页
        1.4 培养基第22页
        1.5 主要仪器第22页
    2 实验方法第22-27页
        2.1 总RNA的提取第22页
        2.2 cDNA第一链的合成第22-23页
        2.3 引物设计第23页
        2.4 GAPDH基因的克隆第23-26页
        2.5 序列的生物信息学分析第26页
        2.6 内参基因验证第26-27页
    3 结果与分析第27-30页
        3.1 总RNA质量分析第27页
        3.2 保守片段的扩增第27-28页
        3.3 CbGAPDH基因全长cDNA的克隆第28-29页
        3.4 cDNA全长序列的生物信息学分析第29-30页
        3.5 内参作用验证第30页
    4 讨论第30-32页
第三章 金龙胆草1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶基因的克隆及表达分析第32-44页
    1 材料第32页
    2 实验方法第32-34页
        2.1 CbDXS基因的克隆第32-33页
        2.2 序列的生物信息学分析第33页
        2.3 CbDXS基因在金龙胆草苗期及花期各组织的表达量分析第33页
        2.4 金龙胆草苗期及花期各组织的苦蒿素含量分析第33-34页
    3 结果与分析第34-42页
        3.1 CbDXS基因的克隆第34-35页
        3.2 CbDXS基因的生物信息学分析第35-39页
        3.3 CbDXS基因的表达量分析第39-40页
        3.4 苗期和花期各组织苦蒿素含量的测定第40-42页
        3.5 CbDXS表达量与苦蒿素含量相关性分析第42页
    4 讨论第42-44页
第四章 金龙胆草牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶基因的克隆及表达分析第44-57页
    1 材料第44-45页
        1.1 样品来源第44页
        1.2 菌株及载体第44-45页
    2 实验方法第45-48页
        2.1 CbGGPPS基因的克隆第45页
        2.2 序列的生物信息学分析第45-46页
        2.3 CbGGPPS基因在金龙胆草苗期及花期各组织的表达量分析第46页
        2.4 金龙胆草苗期及花期各组织的苦蒿素含量分析第46页
        2.5 CbGGPPS基因的原核表达第46-48页
    3 结果与分析第48-55页
        3.1 CbGGPPS基因的克隆第48-49页
        3.2 CbGGPPS基因的生物信息学分析第49-52页
        3.3 CbGGPPS基因的表达谱分析第52-53页
        3.4 苗期和花期各组织苦蒿素含量的测定第53页
        3.5 CbGGPPS表达量与苦蒿素含量相关性分析第53-54页
        3.6 CbGGPPS基因原核表达第54-55页
    4 讨论第55-57页
        4.1 CbGGPPS基因的克隆第55-56页
        4.2 CbGGPPS基因的表达分析第56页
        4.3 CbGGPPS基因的原核表达第56-57页
结论第57-58页
参考文献第58-63页
致谢第63-65页
攻读硕士学位期间发表的论文第65页

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