中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第一章 文献综述 | 第12-21页 |
1 植物中的萜类化合物 | 第12-13页 |
2 金龙胆草中的萜类 | 第13-14页 |
3 萜类的代谢途径 | 第14-15页 |
4 苦蒿素的代谢途径 | 第15页 |
5 1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶(DXS) | 第15-17页 |
5.1 DXS的基本结构及催化机制 | 第15-16页 |
5.2 DXS的结构特征 | 第16-17页 |
5.3 DXS的调控机制 | 第17页 |
6 牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶(GGPPS) | 第17-19页 |
6.1 GGPPS的结构特征 | 第17-18页 |
6.2 GGPPS的基因克隆及蛋白定位 | 第18-19页 |
6.3 GGPPS基因的表达调控 | 第19页 |
7 植物基因克隆技术的进展 | 第19页 |
8 本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
第二章 金龙胆草管家基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因的克隆 | 第21-32页 |
1 材料 | 第21-22页 |
1.1 样品来源 | 第21页 |
1.2 菌株及载体 | 第21页 |
1.3 分子生物学试剂 | 第21-22页 |
1.4 培养基 | 第22页 |
1.5 主要仪器 | 第22页 |
2 实验方法 | 第22-27页 |
2.1 总RNA的提取 | 第22页 |
2.2 cDNA第一链的合成 | 第22-23页 |
2.3 引物设计 | 第23页 |
2.4 GAPDH基因的克隆 | 第23-26页 |
2.5 序列的生物信息学分析 | 第26页 |
2.6 内参基因验证 | 第26-27页 |
3 结果与分析 | 第27-30页 |
3.1 总RNA质量分析 | 第27页 |
3.2 保守片段的扩增 | 第27-28页 |
3.3 CbGAPDH基因全长cDNA的克隆 | 第28-29页 |
3.4 cDNA全长序列的生物信息学分析 | 第29-30页 |
3.5 内参作用验证 | 第30页 |
4 讨论 | 第30-32页 |
第三章 金龙胆草1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶基因的克隆及表达分析 | 第32-44页 |
1 材料 | 第32页 |
2 实验方法 | 第32-34页 |
2.1 CbDXS基因的克隆 | 第32-33页 |
2.2 序列的生物信息学分析 | 第33页 |
2.3 CbDXS基因在金龙胆草苗期及花期各组织的表达量分析 | 第33页 |
2.4 金龙胆草苗期及花期各组织的苦蒿素含量分析 | 第33-34页 |
3 结果与分析 | 第34-42页 |
3.1 CbDXS基因的克隆 | 第34-35页 |
3.2 CbDXS基因的生物信息学分析 | 第35-39页 |
3.3 CbDXS基因的表达量分析 | 第39-40页 |
3.4 苗期和花期各组织苦蒿素含量的测定 | 第40-42页 |
3.5 CbDXS表达量与苦蒿素含量相关性分析 | 第42页 |
4 讨论 | 第42-44页 |
第四章 金龙胆草牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶基因的克隆及表达分析 | 第44-57页 |
1 材料 | 第44-45页 |
1.1 样品来源 | 第44页 |
1.2 菌株及载体 | 第44-45页 |
2 实验方法 | 第45-48页 |
2.1 CbGGPPS基因的克隆 | 第45页 |
2.2 序列的生物信息学分析 | 第45-46页 |
2.3 CbGGPPS基因在金龙胆草苗期及花期各组织的表达量分析 | 第46页 |
2.4 金龙胆草苗期及花期各组织的苦蒿素含量分析 | 第46页 |
2.5 CbGGPPS基因的原核表达 | 第46-48页 |
3 结果与分析 | 第48-55页 |
3.1 CbGGPPS基因的克隆 | 第48-49页 |
3.2 CbGGPPS基因的生物信息学分析 | 第49-52页 |
3.3 CbGGPPS基因的表达谱分析 | 第52-53页 |
3.4 苗期和花期各组织苦蒿素含量的测定 | 第53页 |
3.5 CbGGPPS表达量与苦蒿素含量相关性分析 | 第53-54页 |
3.6 CbGGPPS基因原核表达 | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55-57页 |
4.1 CbGGPPS基因的克隆 | 第55-56页 |
4.2 CbGGPPS基因的表达分析 | 第56页 |
4.3 CbGGPPS基因的原核表达 | 第56-57页 |
结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-63页 |
致谢 | 第63-65页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第65页 |