| 学位论文数据集 | 第3-4页 |
| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第16-26页 |
| 1.1 手性药物 | 第16-17页 |
| 1.1.1 手性药物简介 | 第16页 |
| 1.1.2 手性药物的拆分方法 | 第16-17页 |
| 1.2 他汀类药物 | 第17-19页 |
| 1.2.1 他汀类药物简介 | 第17-18页 |
| 1.2.2 他汀类药物的结构 | 第18-19页 |
| 1.3 还原酶/脱氢酶 | 第19-24页 |
| 1.3.1 还原酶/脱氢酶简介 | 第19-20页 |
| 1.3.2 还原酶/脱氢酶的分类 | 第20-22页 |
| 1.3.3 还原酶/脱氢酶在他汀类药物手性侧链合成中的应用 | 第22-24页 |
| 1.4 辅酶再生系统 | 第24页 |
| 1.5 结构模拟与分子对接 | 第24-25页 |
| 1.6 本课题的研究目的及意义 | 第25-26页 |
| 第二章 产酸克雷伯菌中一种新型羰基还原酶的克隆表达及His-tag蛋白纯化 | 第26-38页 |
| 2.1 引言 | 第26页 |
| 2.2 实验仪器与材料 | 第26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-31页 |
| 2.3.1 产酸克雷伯菌全基因组的提取 | 第26页 |
| 2.3.2 KleADH目的片段的扩增 | 第26-28页 |
| 2.3.3 构建pET28-KleADH重组质粒 | 第28-29页 |
| 2.3.4 重组目的蛋白KleADH的诱导表达 | 第29-30页 |
| 2.3.5 重组目的蛋白KleADH的His-tag纯化 | 第30-31页 |
| 2.3.6 重组目的蛋白KleADH的活性检测 | 第31页 |
| 2.4 实验结果与分析 | 第31-36页 |
| 2.4.1 KleADH目的片段的扩增 | 第31-32页 |
| 2.4.2 构建pET28-KleADH重组质粒 | 第32-34页 |
| 2.4.3 重组目的蛋白KleADH的诱导表达 | 第34-35页 |
| 2.4.4 重组目的蛋白KleADH的活性检测 | 第35-36页 |
| 2.5 本章小结 | 第36-38页 |
| 第三章 GST标签重组蛋白KleADH的克隆表达及纯化 | 第38-46页 |
| 3.1 引言 | 第38页 |
| 3.2 实验仪器与材料 | 第38页 |
| 3.3 实验方法 | 第38-41页 |
| 3.3.1 KleADH目的片段的扩增 | 第38-39页 |
| 3.3.2 构建PGEX-6p-1-KleADH重组质粒 | 第39-40页 |
| 3.3.3 重组目的蛋白KleADH的诱导表达及活性测定 | 第40-41页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第41-44页 |
| 3.4.1 KleADH目的片段的扩增 | 第41页 |
| 3.4.2 构建PGEX-6p-1-KleADH重组质粒 | 第41-43页 |
| 3.4.3 重组目的蛋白KleADH的诱导表达 | 第43-44页 |
| 3.5 本章小结 | 第44-46页 |
| 第四章 KleADH分子对接及活性中心的确定 | 第46-54页 |
| 4.1 引言 | 第46页 |
| 4.2 实验仪器与材料及软件 | 第46页 |
| 4.3 实验方法 | 第46-49页 |
| 4.3.1 同源建模 | 第46页 |
| 4.3.2 分子对接 | 第46-47页 |
| 4.3.3 KleADH催化活性中心的验证 | 第47-49页 |
| 4.4 实验结果与分析 | 第49-52页 |
| 4.4.1 同源建模 | 第49-50页 |
| 4.4.2 分子对接 | 第50-51页 |
| 4.4.3 KleADH催化活性中心的验证 | 第51-52页 |
| 4.5 本章小结 | 第52-54页 |
| 第五章 KleADH全细胞催化不对称还原反应的反应条件的优化 | 第54-66页 |
| 5.1 引言 | 第54页 |
| 5.2 实验仪器与材料 | 第54页 |
| 5.3 实验方法 | 第54-57页 |
| 5.3.1 反应时间对不对称还原反应的影响 | 第54-55页 |
| 5.3.2 湿菌体量对不对称还原反应的影响 | 第55页 |
| 5.3.3 反应温度对不对称还原反应的影响 | 第55页 |
| 5.3.4 反应pH对不对称还原反应的影响 | 第55页 |
| 5.3.5 金属离子对不对称还原反应的影响 | 第55-56页 |
| 5.3.6 两相反应体系对不对称还原反应的影响 | 第56页 |
| 5.3.7 KleADH底物耐受性的研究 | 第56页 |
| 5.3.8 KleADH底物特异性的研究 | 第56-57页 |
| 5.4 实验结果与分析 | 第57-63页 |
| 5.4.1 反应时间对不对称还原反应的影响 | 第57页 |
| 5.4.2 湿菌体量对不对称还原反应的影响 | 第57-58页 |
| 5.4.3 反应温度对不对称还原反应的影响 | 第58-59页 |
| 5.4.4 反应pH对不对称还原反应的影响 | 第59-60页 |
| 5.4.5 金属离子对不对称还原反应的影响 | 第60-61页 |
| 5.4.6 两相反应体系对不对称还原反应的影响 | 第61页 |
| 5.4.7 KleADH底物耐受性的研究 | 第61-62页 |
| 5.4.8 KleADH底物特异性的研究 | 第62-63页 |
| 5.5 本章小结 | 第63-66页 |
| 第六章 总结 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 附录 | 第74-82页 |
| 致谢 | 第82-84页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第84-86页 |
| 作者与导师简介 | 第86-87页 |
| 附件 | 第87-88页 |
