| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-9页 |
| 文献综述 | 第13-24页 |
| 第一章 棉酚雄性生殖毒性研究进展 | 第13-19页 |
| 1.1 棉酚的理化性质 | 第13-14页 |
| 1.2 棉副产品中棉酚的含量 | 第14-15页 |
| 1.3 传统脱毒方案的局限性 | 第15-16页 |
| 1.4 棉酚中毒病的一般情况 | 第16-17页 |
| 1.5 棉酚主要引起雄性生殖损伤 | 第17-18页 |
| 1.6 棉酚对反刍动物的雄性生殖毒性 | 第18页 |
| 1.7 棉酚损伤的靶细胞—精原干细胞 | 第18-19页 |
| 第二章 棉酚雄性生殖毒性的分子机理 | 第19-24页 |
| 2.1 精原干细胞凋亡的机理 | 第19-20页 |
| 2.2 ROS对雄性生殖系统的影响 | 第20-21页 |
| 2.3 棉酚致精原干细胞损伤的关键信号蛋白 | 第21-24页 |
| 2.3.1 SIRT1蛋白的性质和上下游调控 | 第21-22页 |
| 2.3.2 PUMA蛋白的性质 | 第22-24页 |
| 实验研究 | 第24-55页 |
| 第三章 棉酚致山羊精原干细胞的毒性研究 | 第24-40页 |
| 3.1 材料与方法 | 第24-30页 |
| 3.1.1 主要仪器 | 第24页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第24页 |
| 3.1.3 溶液配制 | 第24-25页 |
| 3.1.4 山羊精原干细胞的培养方法、冻存与复苏 | 第25-26页 |
| 3.1.5 细胞活力检测 | 第26页 |
| 3.1.6 细胞周期检测 | 第26-27页 |
| 3.1.7 Hoechst 33342 染色 | 第27页 |
| 3.1.8 Annexin V/PI早凋亡检测 | 第27页 |
| 3.1.9 Caspase-3 酶活力检测 | 第27-28页 |
| 3.1.10 Caspase-9 活力测定 | 第28页 |
| 3.1.11 线粒体膜电位检测 (JC-1 法) | 第28页 |
| 3.1.12 ATP浓度定量检测 | 第28-29页 |
| 3.1.13 精原干细胞内过氧化氢水平测定 | 第29页 |
| 3.1.14 DHE探针检测胞内的O2·- | 第29页 |
| 3.1.15 GSH和GSSG比率检测 | 第29页 |
| 3.1.16 统计学分析 | 第29-30页 |
| 3.2 结果 | 第30-38页 |
| 3.2.1 棉酚抑制山羊精原干细胞活力 | 第30-31页 |
| 3.2.2 棉酚处理影响精原干细胞的周期和数量 | 第31-32页 |
| 3.2.3 棉酚诱导精原干细胞凋亡 | 第32-33页 |
| 3.2.4 棉酚损伤精原干细胞线粒体 | 第33-34页 |
| 3.2.5 棉酚诱导精原干细胞ROS消除障碍 | 第34-35页 |
| 3.2.6 胞内ROS水平是精原干细胞抵御棉酚损伤的关键因素 | 第35-38页 |
| 3.3 讨论 | 第38-39页 |
| 3.4 小结 | 第39-40页 |
| 第四章 分子内醛基在棉酚致精原干细胞损伤中的作用 | 第40-45页 |
| 4.1 材料与方法 | 第40页 |
| 4.1.1 主要仪器 | 第40页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第40页 |
| 4.1.3 主要方法 | 第40页 |
| 4.2 结果 | 第40-43页 |
| 4.2.1 醛基是棉酚致ROS消除障碍的可能原因 | 第40-41页 |
| 4.2.2 棉酚去醛基衍生物不引起精原干细胞线粒体损伤 | 第41-42页 |
| 4.2.3 醛基是棉酚致精原干细胞凋亡的主要原因 | 第42-43页 |
| 4.3 讨论 | 第43-44页 |
| 4.4 小结 | 第44-45页 |
| 第五章 棉酚致精原干细胞凋亡的分子机理研究 | 第45-55页 |
| 5.1 材料与方法 | 第45-49页 |
| 5.1.1 主要仪器 | 第45页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第45页 |
| 5.1.3 主要方法 | 第45页 |
| 5.1.4 NAD+/NADH比率测定 | 第45-46页 |
| 5.1.5 SIRT1活力测定 | 第46页 |
| 5.1.6 Western blotting | 第46-49页 |
| 5.2 结果 | 第49-52页 |
| 5.2.1 棉酚通过ROS抑制SIRT1活性 | 第49-50页 |
| 5.2.2 棉酚影响精原干细胞的SIRT1-P53-PUMA信号通路 | 第50-51页 |
| 5.2.3 SIRT1-P53-PUMA信号是棉酚致精原干细胞凋亡的关键机理 | 第51-52页 |
| 5.3 讨论 | 第52-54页 |
| 5.4 小结 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-57页 |
| 创新之处及未来研究计划 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-71页 |
| 缩略词 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
| 作者简介 | 第75页 |
