| 摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 符号说明 | 第10-12页 |
| 综述 | 第12-32页 |
| 1 PCV2的病原学 | 第12-15页 |
| 1.1 病原学背景 | 第12-13页 |
| 1.2 PCV的理化特性 | 第13页 |
| 1.3 PCV的分子生物学 | 第13-15页 |
| 1.3.1 病毒的基因组结构 | 第13页 |
| 1.3.2 编码的蛋白 | 第13-14页 |
| 1.3.3 PCV2致病机理 | 第14-15页 |
| 2 细胞培养特性 | 第15页 |
| 3 PCV2的流行病学 | 第15-16页 |
| 4 PCV2相关疾病 | 第16-18页 |
| 4.1 断奶仔猪多系统衰竭综合征 | 第16页 |
| 4.2 猪皮炎与肾病综合征 | 第16页 |
| 4.3 猪呼吸道疾病综合征 | 第16-17页 |
| 4.4 增生性坏死性间质性肺炎 | 第17页 |
| 4.5 繁殖障碍 | 第17页 |
| 4.6 仔猪先天性震颤 | 第17-18页 |
| 5 PCV2诊断方法 | 第18-19页 |
| 5.1 病毒的分离与鉴定 | 第18页 |
| 5.2 血清学方法 | 第18-19页 |
| 5.2.1 酶联免疫吸附试验 | 第18-19页 |
| 5.2.2 间接免疫荧光试验 | 第19页 |
| 6 聚合酶链式反应 | 第19-20页 |
| 7 免疫组织化学方法技术 | 第20页 |
| 8 猪圆环病毒疫苗研究现状 | 第20-21页 |
| 9 PCV2的防控 | 第21-22页 |
| 10 研究的目的及意义 | 第22-24页 |
| 参考文献 | 第24-32页 |
| 第一章 江苏部分地区猪圆环病毒2型分子流行病学调查与PCV2的分离鉴定 | 第32-50页 |
| 1 材料 | 第32-34页 |
| 1.1 试剂 | 第32页 |
| 1.2 仪器 | 第32-33页 |
| 1.3 细胞和细胞培养基的配置 | 第33页 |
| 1.4 分子生物学软件 | 第33-34页 |
| 1.4.1 序列分析软件 | 第33页 |
| 1.4.2 引物设计软件 | 第33页 |
| 1.4.3 引物设计与合成 | 第33-34页 |
| 2 方法 | 第34-39页 |
| 2.1 病料的采集和处理方法 | 第34-35页 |
| 2.2 病毒DNA的提取 | 第35页 |
| 2.3 病毒RNA的提取 | 第35页 |
| 2.4 病毒的PCR检测 | 第35-36页 |
| 2.4.1 DNA病毒检测 | 第35-36页 |
| 2.4.2 RNA病毒的检测 | 第36页 |
| 2.5 病毒的分离与鉴定 | 第36-37页 |
| 2.6 PCV2全基因组分段测序 | 第37-38页 |
| 2.7 病毒纯度测定 | 第38页 |
| 2.8 间接免疫荧光试验 | 第38页 |
| 2.9 进化树的构建 | 第38-39页 |
| 3 结果 | 第39-47页 |
| 3.1 六种常见病毒PCV1、PCV2、PPV、PRV、PRRSV和CSFV的PCR或RT-PCR扩增特异性条带大小 | 第39-40页 |
| 3.2 PCV2全基因组的分段测序与拼接 | 第40-41页 |
| 3.3 六种病毒流行病学调查结果统计 | 第41-43页 |
| 3.4 混合感染统计结果 | 第43-44页 |
| 3.5 PCV2分离株纯度检测 | 第44-45页 |
| 3.6 间接免疫荧光检测 | 第45页 |
| 3.7 PCV2分离毒株遗传进化分析 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-50页 |
| 第二章 猪圆环病毒2型分离株的致病性研究 | 第50-67页 |
| 1 材料 | 第50-51页 |
| 1.1 PCV2毒株 | 第50页 |
| 1.2 细胞 | 第50页 |
| 1.3 实验动物 | 第50-51页 |
| 1.4 试剂和仪器 | 第51页 |
| 1.4.1 主要试剂 | 第51页 |
| 1.4.2 主要仪器 | 第51页 |
| 2 方法 | 第51-55页 |
| 2.1 病毒的培养及TCID_(50)的测定 | 第51-52页 |
| 2.1.1 PCV2病毒培养液的制备 | 第51-52页 |
| 2.1.2 组织细胞半数感染量的测定 | 第52页 |
| 2.1.3 外源病毒的检测 | 第52页 |
| 2.2 病毒核酸的测定 | 第52-53页 |
| 2.2.1 荧光定量PCR引物设计 | 第52-53页 |
| 2.2.2 PCV2病毒DNA的提取 | 第53页 |
| 2.2.3 标准品的制备 | 第53页 |
| 2.3 分离株的动物致病性实验 | 第53-55页 |
| 2.3.1 实验动物的分组及处理 | 第53页 |
| 2.3.2 攻毒猪实验效果评定 | 第53-54页 |
| 2.3.3 病理组织切片的制备与HE染色 | 第54-55页 |
| 2.3.4 免疫组化试验 | 第55页 |
| 3 结果与分析 | 第55-64页 |
| 3.1 PCV2毒株的纯度检测 | 第55-56页 |
| 3.2 PCV2毒株的TCID_(50)的测定 | 第56页 |
| 3.3 PCV2毒株在Dulac细胞上增殖 | 第56页 |
| 3.4 PCV2的人工感染实验 | 第56-64页 |
| 2.4.1 临床表现 | 第56页 |
| 3.4.2 病理变化 | 第56-57页 |
| 3.4.3 血清抗体效价的动态变化 | 第57-58页 |
| 3.4.4 普通PCR方法检测血清中的病毒血症 | 第58页 |
| 3.4.5 普通PCR方法检测试验猪排毒情况 | 第58页 |
| 3.4.6 荧光定量PCR对腹股沟淋巴结、血清、鼻拭子和肛拭子中PCV2 DNA拷贝数的检测结果 | 第58-61页 |
| 3.4.7 PCV2病毒回收分离的结果 | 第61页 |
| 3.4.8 组织病理学变化 | 第61-64页 |
| 3.4.9 免疫组织化学检测结果 | 第64页 |
| 4 讨论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-67页 |
| 全文总结 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
