| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略语表 | 第12-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-37页 |
| 1 引言 | 第15-16页 |
| 2 豆科植物中根瘤的发生及发育过程 | 第16-22页 |
| 2.1 豆科植物和生物固氮的重要性 | 第16页 |
| 2.2 根瘤的形成 | 第16-17页 |
| 2.3 结瘤因子(NF)的响应 | 第17-19页 |
| 2.4 结瘤因子(NF)的信号传递 | 第19-20页 |
| 2.5 根瘤发育过程的调控 | 第20-22页 |
| 2.5.1 根瘤的自我调控 | 第20-21页 |
| 2.5.2 激素对根瘤发育的调控 | 第21页 |
| 2.5.3 其它因素对根瘤发育的调控 | 第21-22页 |
| 3 定型根瘤和不定型根瘤的形成及根瘤的衰亡 | 第22-26页 |
| 3.1 定型根瘤和不定型根瘤形成的不同 | 第22-23页 |
| 3.2 根瘤的衰亡 | 第23-24页 |
| 3.2.1 根瘤衰亡的结构变化 | 第23页 |
| 3.2.2 根瘤衰亡的影响因素 | 第23-24页 |
| 3.3 控制根瘤衰老的应用 | 第24-26页 |
| 3.3.1 根-茎信号传导的控制 | 第25页 |
| 3.3.2 改善根瘤生长环境延缓根瘤的衰亡 | 第25页 |
| 3.3.3 挖掘控制共生的关键基因 | 第25页 |
| 3.3.4 根瘤菌工程菌的改造延缓根瘤的衰亡 | 第25-26页 |
| 4 植物磷脂酶D | 第26-35页 |
| 4.1 植物中的磷脂酶种类 | 第26-27页 |
| 4.2 植物中PLD基因家族及其亚家族分类 | 第27-28页 |
| 4.3 植物中PLD的功能 | 第28-31页 |
| 4.3.1 植物中PLDs在胁迫响应方面的功能 | 第28-29页 |
| 4.3.2 植物中PLDs在植物生理响应方面的功能 | 第29-30页 |
| 4.3.3 植物抗病响应中PLDs的功能 | 第30-31页 |
| 4.3.3.1 PLDα1 在植物微生物互作过程中的作用 | 第30页 |
| 4.3.3.2 PLDβ1 在植物细菌、真菌侵染过程中的作用 | 第30-31页 |
| 4.3.3.3 PLDδ 在植物非寄生性真菌侵染过程中的作用 | 第31页 |
| 4.3.3.4 其它PLDs在植物免疫反应过程中的潜在作用 | 第31页 |
| 4.4 PLDs在细胞信号转导中的作用 | 第31-33页 |
| 4.4.1 PLDs及其互作蛋白 | 第31-32页 |
| 4.4.2 PLDs对细胞骨架蛋白的调控 | 第32页 |
| 4.4.3 PLD对膜泡运输的调控 | 第32页 |
| 4.4.4 PLD在脂类降解及膜成分改变上的作用 | 第32-33页 |
| 4.5 脂质信号分子PAs在细胞信号转导中的作用 | 第33-35页 |
| 4.5.1 胁迫情况下PAs的产生及其分子种类 | 第33页 |
| 4.5.2 PAs与目标蛋白互作产生的影响 | 第33-34页 |
| 4.5.2.1 PAs与目标蛋白互作改变其催化活性 | 第33-34页 |
| 4.5.2.2 PAs与目标蛋白互作改变细胞骨架 | 第34页 |
| 4.5.2.3 PAs与目标蛋白的结合对目标蛋白定位的影响 | 第34页 |
| 4.5.3 PAs对膜结构的影响 | 第34-35页 |
| 4.5.4 PAs对脂类运输和代谢的影响 | 第35页 |
| 5 本实验的目的和意义 | 第35-37页 |
| 第二章 大豆GmPLDα1、GmPLDβ5 对根瘤的影响以及根瘤发育过程中甘油三脂变化的解析 | 第37-78页 |
| 1 前言 | 第37-39页 |
| 2 材料和方法 | 第39-47页 |
| 2.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第39页 |
| 2.1.2 实验所用菌株及载体 | 第39页 |
| 2.1.3 实验所用试剂 | 第39-40页 |
| 2.1.4 实验所用培养基 | 第40页 |
| 2.1.5 引物合成和测序 | 第40页 |
| 2.2 实验方法 | 第40-47页 |
| 2.2.1 大肠杆菌DH5α 的培养及质粒提取 | 第40-41页 |
| 2.2.2 热击法转化目标表达载体到大肠杆菌DH5α 中 | 第41-42页 |
| 2.2.3 电击法转化目标表达载体到发根农杆菌K599中 | 第42页 |
| 2.2.4 大豆毛根转化流程 | 第42-43页 |
| 2.2.5 转基因发根RNA表达量检测 | 第43-45页 |
| 2.2.6 WesternBlot检测 | 第45-46页 |
| 2.2.7 根瘤菌固氮酶活性测定 | 第46-47页 |
| 2.2.8 根瘤及发根的脂质的提取及定量分析 | 第47页 |
| 2.2.9 大豆叶片或者根的胁迫处理 | 第47页 |
| 3 结果及分析 | 第47-74页 |
| 3.1 大豆PLDs家族基因的生物信息学分析 | 第47-50页 |
| 3.1.1 大豆PLDs家族基因同源序列的获得 | 第47-49页 |
| 3.1.2 大豆PLDs基因家族的结构域分析 | 第49-50页 |
| 3.2 GmPLDs基因家族的表达情况 | 第50-54页 |
| 3.2.1 GmPLDs基因家族的组织特异性表达 | 第50-51页 |
| 3.2.2 GmPLDs基因家族在生物或非生物胁迫情况下的表达 | 第51-52页 |
| 3.2.3 GmPLDs基因家族在不同发育时期根瘤中的表达 | 第52-53页 |
| 3.2.4 GmPLDα1 和GmPLDβ5 在根瘤菌处理下的根中的表达 | 第53-54页 |
| 3.3 GmPLDα1 和GmPLDβ5 相关载体的构建及转基因发根的验证 | 第54-56页 |
| 3.3.1 GmPLDα1 和GmPLDβ5 基因过表达和抑制载体的构建 | 第54-55页 |
| 3.3.2 GmPLDα1 和GmPLDβ5 转基因发根的验证 | 第55-56页 |
| 3.4 GmPLDα1 和GmPLDβ5 基因对根瘤及茎长的影响 | 第56-59页 |
| 3.4.1 GmPLDα1 和GmPLDβ5 基因对结瘤数目的影响 | 第56-57页 |
| 3.4.2 GmPLDα1 和GmPLDβ5 基因对根瘤固氮酶活性的影响 | 第57-58页 |
| 3.4.3 GmPLDα1 和GmPLDβ5 转基因发根对地上部分茎长的影响 | 第58-59页 |
| 3.5 GmPLDα1 和GmPLDβ5 转基因发根对根瘤形成相关基因的影响 | 第59-61页 |
| 3.6 GmPLDα1 和GmPLDβ5 转基因发根对糖脂和磷脂含量的影响 | 第61-65页 |
| 3.6.1 GmPLDα1 和GmPLDβ5 转基因发根对总脂含量的影响 | 第61-63页 |
| 3.6.2 GmPLDα1 和GmPLDβ5 转基因发根对脂质种类的影响 | 第63-65页 |
| 3.7 根瘤菌侵染GmPLDα1 转基因发根下根瘤合成相关基因的表达 | 第65-67页 |
| 3.8 根瘤发育过程中脂质含量的变化 | 第67-71页 |
| 3.8.1 根和根瘤中甘油三脂和总脂肪酸的变化情况 | 第67-68页 |
| 3.8.2 根瘤发育不同时期的各个甘油三脂分子种类含量的变化情况 | 第68-71页 |
| 3.9 根瘤发育过程中磷脂、糖脂代谢相关基因的分析 | 第71-74页 |
| 3.9.1 真核生物中磷脂、糖脂等的生物合成途径 | 第71-72页 |
| 3.9.2 DGE数据库中糖脂和磷脂代谢相关基因的分析 | 第72-74页 |
| 4 讨论 | 第74-78页 |
| 第三章 大豆GmPLDα 对油脂代谢和磷脂代谢及其对种子活力的影响 | 第78-96页 |
| 1 前言 | 第78-80页 |
| 2 材料与方法 | 第80-84页 |
| 2.1 实验材料 | 第80-81页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第80页 |
| 2.1.2 实验所用试剂 | 第80-81页 |
| 2.1.3 引物合成 | 第81页 |
| 2.2 实验方法 | 第81-84页 |
| 2.2.1 PLDαKD株系的产生和植物种植条件及取样 | 第81页 |
| 2.2.2 PLDαKD株系WesternBlot验证 | 第81页 |
| 2.2.3 种子总脂肪酸的提取及分析 | 第81-82页 |
| 2.2.4 种子三酰甘油脂肪酸的提取及分析 | 第82页 |
| 2.2.5 磷脂提取及分析方法 | 第82页 |
| 2.2.6 定量PCR检测相关基因的表达 | 第82页 |
| 2.2.7 种子发芽实验 | 第82-83页 |
| 2.2.8 植物激素的提取及分析 | 第83页 |
| 2.2.9 相关基因同源序列的获得 | 第83-84页 |
| 3 结果与分析 | 第84-93页 |
| 3.1 GmPLDα 缺失的鉴定及其对其它GmPLDs表达的影响 | 第84页 |
| 3.2 GmPLDα 的缺失导致种子脂肪酸有更高的不饱和度 | 第84-85页 |
| 3.3 GmPLDα 的缺失导致PC和PE含量升高、PA含量降低 | 第85-87页 |
| 3.4 GmPLDαKDs中的去饱和酶基因比在WT种子中的上调表达 | 第87-88页 |
| 3.5 GmPLDαKDs种子中相关基因的表达变化导致合成更多的脂肪酸和PA产量的降低 | 第88-91页 |
| 3.6 在大豆GmPLDαKDs种子中，PC和DAG间的相互转化更为活跃 | 第91页 |
| 3.7 GmPLDαKDs种子降低PLAs却增加了LPCATs的转录水平 | 第91-92页 |
| 3.8 GmPLDαKDs种子有更高的发芽率 | 第92-93页 |
| 4 讨论 | 第93-96页 |
| 第四章 近红外模型的建立及其在分析大豆营养成分上的应用 | 第96-108页 |
| 1 前言 | 第96-97页 |
| 2 材料和方法 | 第97-101页 |
| 2.1 实验材料 | 第97-98页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第97页 |
| 2.1.2 实验所用试剂 | 第97页 |
| 2.1.3 主要试验仪器 | 第97-98页 |
| 2.2 实验方法 | 第98-101页 |
| 2.2.1 近红外光谱分析技术分析模型的建立及其流程 | 第98页 |
| 2.2.2 总脂肪酸的提取及分析方法 | 第98页 |
| 2.2.3 维生素E的提取及分析方法 | 第98-99页 |
| 2.2.4 黄酮的提取及分析方法 | 第99页 |
| 2.2.5 异黄酮的提取及分析方法 | 第99页 |
| 2.2.6 皂苷的提取及分析方法 | 第99-100页 |
| 2.2.7 近红外对大豆粉末的分析 | 第100页 |
| 2.2.8 统计分析 | 第100-101页 |
| 3 结果及分析 | 第101-106页 |
| 3.1 统计结果及相关分析结果 | 第101-102页 |
| 3.2 近红外模型的建立 | 第102-104页 |
| 3.3 脂肪酸的NIRS模型的外部校验 | 第104-105页 |
| 3.4 大豆种质资源的筛选 | 第105-106页 |
| 4 讨论 | 第106-108页 |
| 第五章 总结 | 第108-112页 |
| 1 GmPLDα1、GmPLDβ5 影响根瘤的形成和发育 | 第108-109页 |
| 2 GmPLDα 影响种子油脂代谢和其活力 | 第109-111页 |
| 3 近红外模型与筛选大规模种质资源 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-138页 |
| 附录A | 第138-142页 |
| 附录B | 第142-149页 |
| 附录C | 第149-155页 |
| 致谢 | 第155-156页 |
| 作者简介 | 第156-157页 |
