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西瓜玉米黄质环氧化酶基因及启动子的克隆与分析

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
引言第10-23页
 1 高等植物体内的叶黄素循环第10-15页
   ·叶黄素循环的组成第10-11页
   ·叶黄素循环的主要功能第11-13页
   ·叶黄素循环能量耗散的分子机理第13-14页
   ·玉米黄质环氧化酶(ZE)第14-15页
   ·紫黄质脱环氧化酶(VDE)第15页
 2 植物体的启动子第15-22页
   ·植物启动子的结构特征第15-17页
   ·启动子的种类第17-19页
   ·启动子的克隆方法第19-21页
   ·启动子结构和功能的研究方法第21-22页
 3 论文研究的内容和意义第22-23页
第一章 西瓜ClZE 基因的克隆及分析第23-56页
 1 材料和方法第23-36页
   ·材料第23页
     ·植物材料第23页
     ·酶及主要试剂第23页
     ·载体与菌株第23页
   ·方法第23-36页
     ·RNA 的提取第23-24页
     ·ClZE 基因保守区EST 的获得第24-27页
     ·ClZE 基因3′UTR 的获得第27-28页
     ·ClZE 基因5′端延伸第28-29页
     ·ClZE 基因的5′UTR 的获得第29-30页
     ·ClZE 基因5′UTR 和3′UTR 片段回收测序第30-31页
     ·西瓜玉米黄质环氧化酶全长的克隆第31页
     ·ClZE 基因编码蛋白生物信息学分析第31-32页
     ·ClZE 基因的原核表达分析第32-36页
 2 结果与分析第36-52页
   ·总RNA 的质量第36页
   ·反转录RNA 成cDNA第36-37页
   ·ClZE 基因保守区的PCR 扩增第37-38页
   ·ClZE 基因3′末端序列PCR 扩增第38-39页
   ·ClZE 基因5′端延伸的PCR 扩增第39-41页
   ·ClZE 基因5′末端序列PCR 扩增第41-42页
   ·ClZE 基因全长的扩增第42-43页
   ·ClZE 基因编码蛋白的生物信息学分析第43-49页
     ·ClZE 基因编码蛋白的氨基酸序列分析第43-44页
     ·ClZE 基因编码蛋白的信号肽分析第44-45页
     ·ClZE 基因编码蛋白的亲疏水性分析第45页
     ·ClZE 基因编码蛋白的跨膜域预测第45-46页
     ·ClZE 基因编码蛋白的亚细胞定位预测第46页
     ·ClZE 基因编码蛋白的保守结构域分析第46页
     ·ClZE 基因和其它作物同源性分析第46-49页
   ·ClZE 基因的原核表达第49-52页
     ·目的片段的扩增、克隆及测序第49页
     ·表达载体和目的基因片段的连接第49-50页
     ·西瓜pET-ZE 原核表达载体的诱导表达分析第50-52页
 3 讨论第52-55页
   ·同源克隆技术获得ClZE 基因第52页
   ·ClZE 蛋白分析第52-53页
   ·RACE 技术获得ClZE 基因的3′端和5′端第53-55页
 4 结论第55-56页
第二章 启动子的克隆及分析第56-71页
 1 材料与方法第56-60页
   ·试验材料及培养第56页
   ·ClZE 基因启动子的克隆第56-57页
   ·ClZE 基因启动子顺式作用元件的分析第57页
   ·融合ClZE 启动子的表达载体构建和农杆菌遗传转化第57-58页
   ·融合ClZE 启动子表达载体的农杆菌遗传转化第58-59页
   ·烟草遗传转化第59页
   ·转基因植株的组织化学染色第59-60页
 2 结果与分析第60-69页
   ·ClZE 基因启动子的克隆和序列特征第60-62页
   ·ClZE 基因启动子含有的重要调控元件分析第62-67页
   ·融合ClZE 启动子的表达载体构建第67-69页
 3 讨论第69-70页
 4 结论第70-71页
参考文献第71-77页
在读期间发表的学术论文第77-78页
作者简历第78-79页
致谢第79-80页
附录I:试验所用载体图第80-81页
附录II:试验中所用试剂配方第81-82页

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