摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
引言 | 第10-23页 |
1 高等植物体内的叶黄素循环 | 第10-15页 |
·叶黄素循环的组成 | 第10-11页 |
·叶黄素循环的主要功能 | 第11-13页 |
·叶黄素循环能量耗散的分子机理 | 第13-14页 |
·玉米黄质环氧化酶(ZE) | 第14-15页 |
·紫黄质脱环氧化酶(VDE) | 第15页 |
2 植物体的启动子 | 第15-22页 |
·植物启动子的结构特征 | 第15-17页 |
·启动子的种类 | 第17-19页 |
·启动子的克隆方法 | 第19-21页 |
·启动子结构和功能的研究方法 | 第21-22页 |
3 论文研究的内容和意义 | 第22-23页 |
第一章 西瓜ClZE 基因的克隆及分析 | 第23-56页 |
1 材料和方法 | 第23-36页 |
·材料 | 第23页 |
·植物材料 | 第23页 |
·酶及主要试剂 | 第23页 |
·载体与菌株 | 第23页 |
·方法 | 第23-36页 |
·RNA 的提取 | 第23-24页 |
·ClZE 基因保守区EST 的获得 | 第24-27页 |
·ClZE 基因3′UTR 的获得 | 第27-28页 |
·ClZE 基因5′端延伸 | 第28-29页 |
·ClZE 基因的5′UTR 的获得 | 第29-30页 |
·ClZE 基因5′UTR 和3′UTR 片段回收测序 | 第30-31页 |
·西瓜玉米黄质环氧化酶全长的克隆 | 第31页 |
·ClZE 基因编码蛋白生物信息学分析 | 第31-32页 |
·ClZE 基因的原核表达分析 | 第32-36页 |
2 结果与分析 | 第36-52页 |
·总RNA 的质量 | 第36页 |
·反转录RNA 成cDNA | 第36-37页 |
·ClZE 基因保守区的PCR 扩增 | 第37-38页 |
·ClZE 基因3′末端序列PCR 扩增 | 第38-39页 |
·ClZE 基因5′端延伸的PCR 扩增 | 第39-41页 |
·ClZE 基因5′末端序列PCR 扩增 | 第41-42页 |
·ClZE 基因全长的扩增 | 第42-43页 |
·ClZE 基因编码蛋白的生物信息学分析 | 第43-49页 |
·ClZE 基因编码蛋白的氨基酸序列分析 | 第43-44页 |
·ClZE 基因编码蛋白的信号肽分析 | 第44-45页 |
·ClZE 基因编码蛋白的亲疏水性分析 | 第45页 |
·ClZE 基因编码蛋白的跨膜域预测 | 第45-46页 |
·ClZE 基因编码蛋白的亚细胞定位预测 | 第46页 |
·ClZE 基因编码蛋白的保守结构域分析 | 第46页 |
·ClZE 基因和其它作物同源性分析 | 第46-49页 |
·ClZE 基因的原核表达 | 第49-52页 |
·目的片段的扩增、克隆及测序 | 第49页 |
·表达载体和目的基因片段的连接 | 第49-50页 |
·西瓜pET-ZE 原核表达载体的诱导表达分析 | 第50-52页 |
3 讨论 | 第52-55页 |
·同源克隆技术获得ClZE 基因 | 第52页 |
·ClZE 蛋白分析 | 第52-53页 |
·RACE 技术获得ClZE 基因的3′端和5′端 | 第53-55页 |
4 结论 | 第55-56页 |
第二章 启动子的克隆及分析 | 第56-71页 |
1 材料与方法 | 第56-60页 |
·试验材料及培养 | 第56页 |
·ClZE 基因启动子的克隆 | 第56-57页 |
·ClZE 基因启动子顺式作用元件的分析 | 第57页 |
·融合ClZE 启动子的表达载体构建和农杆菌遗传转化 | 第57-58页 |
·融合ClZE 启动子表达载体的农杆菌遗传转化 | 第58-59页 |
·烟草遗传转化 | 第59页 |
·转基因植株的组织化学染色 | 第59-60页 |
2 结果与分析 | 第60-69页 |
·ClZE 基因启动子的克隆和序列特征 | 第60-62页 |
·ClZE 基因启动子含有的重要调控元件分析 | 第62-67页 |
·融合ClZE 启动子的表达载体构建 | 第67-69页 |
3 讨论 | 第69-70页 |
4 结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-77页 |
在读期间发表的学术论文 | 第77-78页 |
作者简历 | 第78-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
附录I:试验所用载体图 | 第80-81页 |
附录II:试验中所用试剂配方 | 第81-82页 |