| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 英文缩写词表 | 第9-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-64页 |
| 1.1 硬组织修复材料研究进展 | 第14-19页 |
| 1.1.1 硬组织修复材料概述 | 第14-15页 |
| 1.1.2 硬组织修复用无机生物材料 | 第15-17页 |
| 1.1.3 硬组织修复用金属材料 | 第17页 |
| 1.1.4 硬组织修复用高分子材料 | 第17-18页 |
| 1.1.5 硬组织修复用复合材料 | 第18-19页 |
| 1.2 羟基磷灰石研究进展 | 第19-23页 |
| 1.2.1 羟基磷灰石的骨传导性和骨诱导性 | 第19-21页 |
| 1.2.2 羟基磷灰石成骨诱导的研究方法 | 第21-22页 |
| 1.2.3 羟基磷灰石的来源及其比较 | 第22-23页 |
| 1.3 间充质干细胞及其成骨分化研究进展 | 第23-35页 |
| 1.3.1 间充质干细胞的来源、提取方法及表面标志物 | 第24-29页 |
| 1.3.2 间充质干细胞的培养 | 第29-30页 |
| 1.3.3 间充质干细胞的分化潜能及各分化方向标志物 | 第30-34页 |
| 1.3.4 国内关于小鼠骨髓间充质干细胞的分离、提取及分化的相关研究 | 第34-35页 |
| 1.4 蛋白质组学技术及其生物信息学分析 | 第35-42页 |
| 1.4.1 蛋白质组学简介 | 第35-36页 |
| 1.4.2 蛋白质组学研究的主要技术手段 | 第36-38页 |
| 1.4.3 蛋白质组学数据的生物信息学分析 | 第38-41页 |
| 1.4.4 系统生物学及不同组学数据的生物信息学联合分析 | 第41-42页 |
| 1.5 microRNA及其在成骨中的调节作用研究进展 | 第42-44页 |
| 1.5.1 microRNA简介 | 第42-43页 |
| 1.5.2 microRNA的研究方法 | 第43-44页 |
| 1.5.3 microRNA在成骨中的调节作用进展 | 第44页 |
| 1.6 本论文的工作基础和主要研究内容 | 第44-46页 |
| 1.6.1 本课题组前期工作基础 | 第45页 |
| 1.6.2 本文主要研究内容 | 第45-46页 |
| 1.7 参考文献 | 第46-64页 |
| 第一部分 天然和合成羟基磷灰石理化性质及生物学性能的比较研究 | 第64-162页 |
| 第二章 天然与合成羟基磷灰石材料的制备与表征 | 第64-79页 |
| 2.1 天然和合成羟基磷灰石粉体及圆盘状试样的制备 | 第64-67页 |
| 2.1.1 实验材料与仪器 | 第64-65页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第65-67页 |
| 2.2 天然和合成羟基磷灰石圆盘状试样的表征 | 第67-76页 |
| 2.2.1 实验材料与仪器 | 第67-68页 |
| 2.2.2 试验方法 | 第68-70页 |
| 2.2.3 结果与讨论 | 第70-76页 |
| 2.3 本章小结 | 第76-77页 |
| 2.4 参考文献 | 第77-79页 |
| 第三章 培养于天然与合成羟基磷灰石表面的骨髓间充质干细胞的细胞学研究 | 第79-93页 |
| 3.1 小鼠骨髓间充质干细胞的分离与提取 | 第79-85页 |
| 3.1.1 实验材料与仪器 | 第79-81页 |
| 3.1.2 小鼠骨髓间充质干细胞的分离与培养 | 第81-83页 |
| 3.1.3 骨髓间充质干细胞的流式细胞鉴定 | 第83页 |
| 3.1.4 结果与讨论 | 第83-85页 |
| 3.2 小鼠骨髓间充质干细胞在天然与合成羟基磷灰石圆盘状试样表面的生长与增殖情况检测 | 第85-90页 |
| 3.2.1 实验材料与仪器 | 第85-87页 |
| 3.2.2 细胞在材料表面生长形态的荧光观察 | 第87页 |
| 3.2.3 天然与合成羟基磷灰石表面生长细胞的增殖测定 | 第87-88页 |
| 3.2.4 统计分析 | 第88页 |
| 3.2.5 实验结果与讨论 | 第88-90页 |
| 3.3 本章小结 | 第90-91页 |
| 3.4 参考文献 | 第91-93页 |
| 第四章 天然与合成羟基磷灰石表面生长细胞的蛋白质组学实验及Western blot验证 | 第93-108页 |
| 4.1 蛋白质组学预实验 | 第93-99页 |
| 4.1.1 实验材料与仪器 | 第93-94页 |
| 4.1.2 总蛋白提取及蛋白质组学预实验 | 第94-97页 |
| 4.1.3 蛋白质组学实验中外源高丰度蛋白质的去除实验 | 第97-99页 |
| 4.2 基于iTRAQ标记的二维液相色谱串联质谱联用技术的蛋白质组学实验 | 第99-103页 |
| 4.2.1 实验原理 | 第99-100页 |
| 4.2.2 天然与合成羟基磷灰石圆盘状试样表面的细胞培养与蛋白质收集 | 第100-101页 |
| 4.2.3 基于iTRAQ标记的二维液相色谱串联质谱联用技术的蛋白质组学实验方法 | 第101页 |
| 4.2.4 结果与讨论 | 第101-103页 |
| 4.3 蛋白质组学实验的Western blot验证试验 | 第103-105页 |
| 4.3.1 原理 | 第103页 |
| 4.3.2 Western blot验证试验蛋白质的选择 | 第103-104页 |
| 4.3.3 实验材料与仪器 | 第104页 |
| 4.3.4 实验方法 | 第104页 |
| 4.3.5 结果与讨论 | 第104-105页 |
| 4.4 本章小结 | 第105-106页 |
| 4.5 参考文献 | 第106-108页 |
| 第五章 蛋白质组学实验数据的生物信息学分析 | 第108-162页 |
| 5.1 蛋白质组学数据的聚类分析 | 第108-110页 |
| 5.1.1 聚类分析及其分析步骤 | 第108页 |
| 5.1.2 聚类分析结果与讨论 | 第108-110页 |
| 5.2 染色体定位分析 | 第110-112页 |
| 5.2.1 染色体定位分析及其分析方法 | 第110页 |
| 5.2.2 染色体定位分析的结果与讨论 | 第110-112页 |
| 5.3 蛋白质组学数据的Gene Ontology(GO)分析 | 第112-131页 |
| 5.3.1 GO分析及其分析方法 | 第112-113页 |
| 5.3.2 GOSurfer软件分析结果 | 第113-122页 |
| 5.3.3 DAVID分析结果 | 第122-131页 |
| 5.4 蛋白质组学数据的生物学通路分析 | 第131-140页 |
| 5.4.1 生物学通路分析及其分析方法 | 第131-132页 |
| 5.4.2 生物学通路分析结果 | 第132-140页 |
| 5.5 蛋白质组学试验数据的IPA网络分析 | 第140-155页 |
| 5.5.1 蛋白质相互作用网络分析方法 | 第140-141页 |
| 5.5.2 蛋白质相互作用网络分析结果与讨论 | 第141-155页 |
| 5.6 天然与合成羟基磷灰石理化性质与生物学性能的综合分析及验证 | 第155-159页 |
| 5.6.1 天然与合成羟基磷灰石理化性质与生物学性能的综合分析 | 第155-156页 |
| 5.6.2 天然与合成羟基磷灰石矿化性能的验证和比较 | 第156-159页 |
| 5.7 本章小结 | 第159-160页 |
| 5.8 参考文献 | 第160-162页 |
| 第二部分 天然羟基磷灰石成骨诱导机理的转录组学、蛋白质组学和microRNA联合分析 | 第162-224页 |
| 第六章 天然羟基磷灰石对骨髓间充质干细胞作用的蛋白质组学和基因表达谱芯片数据的比较与联合分析 | 第162-184页 |
| 6.1 基因表达谱芯片和蛋白质组学数据介绍 | 第162-164页 |
| 6.1.1 本课题组前期基因表达谱芯片实验结果 | 第162-164页 |
| 6.1.2 天然羟基磷灰石对细胞影响的蛋白质组学实验结果介绍 | 第164页 |
| 6.2 蛋白质组学和基因表达谱芯片数据的比较研究 | 第164-167页 |
| 6.2.1 基因表达谱芯片与蛋白质组学整体数据比较 | 第164-165页 |
| 6.2.2 基因表达谱芯片与蛋白质组学数据的相关性分析 | 第165-166页 |
| 6.2.3 基因表达谱芯片与蛋白质组学数据的组蛋白表达情况比较 | 第166-167页 |
| 6.3 基因表达谱芯片与蛋白质组学数据的GO功能分析与比较 | 第167-171页 |
| 6.3.1 GO分析方法 | 第167页 |
| 6.3.2 GO分析结果与讨论 | 第167-171页 |
| 6.4 基因表达谱芯片与蛋白质组学数据中成骨相关功能节点的对比 | 第171-175页 |
| 6.4.1 成骨相关功能节点的分析方法 | 第171页 |
| 6.4.2 结果与讨论 | 第171-175页 |
| 6.5 蛋白质组学与基因表达谱芯片实验数据的生物学通路联合分析 | 第175-181页 |
| 6.5.1 蛋白质组学与基因表达谱芯片实验数据的生物学通路联合分析方法 | 第175-176页 |
| 6.5.2 结果与讨论 | 第176-181页 |
| 6.6 本章小结 | 第181-182页 |
| 6.7 参考文献 | 第182-184页 |
| 第七章 microRNA在天然羟基磷灰石成骨诱导中的调节作用分析 | 第184-200页 |
| 7.1 实验材料与仪器 | 第184-186页 |
| 7.1.1 实验材料 | 第184-185页 |
| 7.1.2 实验仪器 | 第185-186页 |
| 7.1.3 溶液配制 | 第186页 |
| 7.2 microRNA表达情况的qRT-PCR实验检测 | 第186-190页 |
| 7.2.1 microRNA引物的设计和合成 | 第186-187页 |
| 7.2.2 细胞培养与总RNA提取 | 第187-188页 |
| 7.2.3 反转录反应 | 第188-189页 |
| 7.2.4 实时PCR反应 | 第189页 |
| 7.2.5 基因相对表达比值计算 | 第189-190页 |
| 7.3 统计分析 | 第190页 |
| 7.4 结果与讨论 | 第190-197页 |
| 7.4.1 microRNA的扩增曲线、溶解曲线 | 第190-191页 |
| 7.4.2 microRNA的相对表达值 | 第191页 |
| 7.4.3 microRNA调控模式分析 | 第191-196页 |
| 7.4.4 天然羟基磷灰石诱导骨髓间充质干细胞成骨分化通路与机理分析 | 第196-197页 |
| 7.5 本章小结 | 第197-198页 |
| 7.6 参考文献 | 第198-200页 |
| 第八章 天然羟基磷灰石成骨诱导能力的实验验证 | 第200-217页 |
| 8.1 不同因素诱导骨髓间充质干细胞的成骨分化能力的碱性磷酸酶酶检测 | 第200-204页 |
| 8.1.1 实验原理 | 第200-201页 |
| 8.1.2 实验材料与仪器 | 第201-202页 |
| 8.1.3 试验方法 | 第202-203页 |
| 8.1.4 实验结果与讨论 | 第203-204页 |
| 8.2 天然羟基磷灰石成骨诱导通路的验证 | 第204-215页 |
| 8.2.1 实验原理 | 第204-205页 |
| 8.2.2 实验材料与仪器 | 第205-206页 |
| 8.2.3 特异性通路阻断剂适宜浓度的选择实验 | 第206-208页 |
| 8.2.4 通路阻断剂对成骨特异性标志物的影响分析 | 第208-215页 |
| 8.3 本章小结 | 第215页 |
| 8.4 参考文献 | 第215-217页 |
| 第九章 总结和展望 | 第217-224页 |
| 9.1 全文工作总结 | 第217-222页 |
| 9.2 展望 | 第222-223页 |
| 9.3 参考文献 | 第223-224页 |
| 在校期间发表论文情况 | 第224-225页 |
| 致谢 | 第225-226页 |
| 附录 | 第226-235页 |
| 附录1 细胞蛋白质的二维凝胶电泳实验(上海中科新生命生物公司提供) | 第226页 |
| 附录2 基于iTRAQ标记的蛋白质组学实验方法(上海博苑生物公司提供) | 第226-231页 |
| 附录3 Western blot实验方法(南京颂悦生物公司提供) | 第231-235页 |
