中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-9页 |
前言 | 第10-12页 |
材料与方法 | 第12-25页 |
一、实验材料 | 第12-16页 |
1、主要仪器 | 第12-13页 |
2、主要试剂 | 第13-14页 |
3、主要抗体 | 第14页 |
4、主要试剂配制 | 第14-16页 |
二、实验方法 | 第16-25页 |
2.1 | 第16-18页 |
2.1.1 临床病理标本采集及细胞系来源 | 第16页 |
2.1.2 细胞复苏 | 第16-17页 |
2.1.3 各组细胞系的传代 | 第17页 |
2.1.4 细胞冻存 | 第17页 |
2.1.5 细胞转染 | 第17-18页 |
2.2 组织及细胞总RNA提取(Trizol法) | 第18页 |
2.3 逆转录反应和实时荧光定量 PCR 检测 | 第18-20页 |
2.4 细胞总蛋白的提取 | 第20页 |
2.5 蛋白印迹分析方法(Western Blot) | 第20-21页 |
2.6 质粒的构建 | 第21-23页 |
2.7 细胞增殖检测 | 第23-24页 |
2.8 细胞凋亡分析 | 第24页 |
2.9 细胞迁移实验及侵袭实验 | 第24-25页 |
三、统计分析 | 第25页 |
实验结果 | 第25-35页 |
1、PTENP1在胃癌中表达下降,并且其表达下降部分与PTENP1异常甲基化相关 | 第25-26页 |
1.1 胃癌组织中PTENP1的表达水平 | 第25页 |
1.2 胃癌组织中PTENP1的表达水平与胃癌病人临床病理资料之间的关系 | 第25页 |
1.3 胃癌细胞系中PTENP1的表达水平 | 第25-26页 |
1.4 胃癌中PTENP1的低表达部分与其启动子区域甲基化相关 | 第26页 |
2、PTENP1能影响胃癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力 | 第26-27页 |
2.1 转染p LJM-3’UTR后PTENP13’UTR的表达水平显著上调 | 第26页 |
2.2 PTENP1在体外影响胃癌细胞的增殖 | 第26-27页 |
2.3 PTENP1在体外影响胃癌细胞的凋亡 | 第27页 |
2.4 PTENP1在体外抑制胃癌细胞的迁移和侵袭 | 第27页 |
3、PTENP1调节PTEN蛋白的表达 | 第27-35页 |
讨论 | 第35-37页 |
参考文献 | 第37-40页 |
文献综述 | 第40-52页 |
参考文献 | 第45-52页 |
附件 | 第52-54页 |
附录 | 第54-55页 |
攻读硕士期间发表文章情况 | 第55-56页 |
致谢 | 第56页 |