中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-12页 |
1 绪 论 | 第12-20页 |
·引言 | 第12-13页 |
·研究背景 | 第13-18页 |
·昆虫病原真菌的致病机制及研究进展 | 第13-15页 |
·真菌细胞壁的相关研究进展 | 第15-18页 |
·立题依据及研究目的 | 第18页 |
·研究内容 | 第18-19页 |
·技术路线 | 第19页 |
·本研究创新之处 | 第19-20页 |
2 绿僵菌MaFKS 的功能研究 | 第20-46页 |
·主要材料 | 第20-22页 |
·供试菌株 | 第20页 |
·主要试剂 | 第20-21页 |
·主要培养基及溶液 | 第21页 |
·主要设备 | 第21-22页 |
·主要方法 | 第22-34页 |
·真菌RNA 的提取及反转录 | 第22-24页 |
·大肠杆菌感受的制备及转化 | 第24页 |
·根癌农杆菌感受态的制备及转化 | 第24-25页 |
·真菌基因组提取方法 | 第25页 |
·绿僵菌MaFKS 基因DNA 序列的比对 | 第25-26页 |
·绿僵菌MaFKS 基因cDNA 全长的获得 | 第26-27页 |
·MaFKS 基因生物信息学分析 | 第27页 |
·MaFKS 基因干扰载体的构建 | 第27-30页 |
·农杆菌介导的绿僵菌的遗传转化 | 第30页 |
·MaFKS 基因干扰突变菌株的筛选 | 第30-31页 |
·荧光定量PCR 技术检测干扰效率 | 第31-32页 |
·干扰菌株对细胞壁干扰剂敏感性的分析 | 第32页 |
·干扰菌株渗透压耐受性的分析 | 第32页 |
·产孢量的测定 | 第32页 |
·菌丝β-1,3-葡聚糖含量的测定及荧光染色 | 第32-34页 |
·结果与分析 | 第34-43页 |
·获取MaFKS 基因的cDNA 序列的克隆及序列分析 | 第34页 |
·MaFKS 基因的生物信息学分析 | 第34-37页 |
·干扰突变菌株的筛选与分子验证 | 第37页 |
·干扰突变菌株MaFKS 基因的表达被有效降低 | 第37-38页 |
·MaFKS 影响绿僵菌细胞壁的完整性 | 第38-40页 |
·MaFKS 影响绿僵菌对高渗透压的耐受性 | 第40-41页 |
·MaFKS 影响绿僵菌的产孢量 | 第41-42页 |
·MaFKS 干扰突变菌株菌丝β-1,3-葡聚糖的含量降低 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-46页 |
·MaFKS 基因与细胞壁的完整性相关 | 第43-44页 |
·MaFKS 与绿僵菌对高渗透压的耐受性有关 | 第44页 |
·MaFKS 的表达水平影响绿僵菌的产孢量 | 第44页 |
·RNA 干扰(RNAi)技术 | 第44-46页 |
3 MaChsⅦ 的功能研究 | 第46-60页 |
·主要材料 | 第46页 |
·供试菌株和昆虫 | 第46页 |
·主要试剂 | 第46页 |
·主要培养基及溶液 | 第46页 |
·主要设备 | 第46页 |
·主要方法 | 第46-50页 |
·真菌RNA 及基因组DNA 的提取 | 第46页 |
·大肠杆菌感受的制备及转化 | 第46页 |
·根癌农杆菌感受态的制备及转化 | 第46页 |
·MaChsⅦ cDNA 序列的克隆及DNA 序列的获得 | 第46页 |
·MaChsⅦ 基因的生物信息学分析 | 第46-47页 |
·MaChsⅦ 基因敲除载体的构建策略 | 第47-49页 |
·绿僵菌的遗传转化 | 第49页 |
·MaChsⅦ 基因敲除突变菌株的筛选 | 第49页 |
·MaChsⅦ缺失菌株对细胞壁干扰剂敏感性的分析 | 第49页 |
·MaChsⅦ缺失菌株渗透压耐受性的分析 | 第49页 |
·MaChsⅦ缺失菌株对氧胁迫的分析 | 第49-50页 |
·生物测定 | 第50页 |
·结果与分析 | 第50-57页 |
·MaChsⅦ 基因的克隆及序列分析 | 第50-53页 |
·缺失突变菌株的筛选与分子验证 | 第53-54页 |
·MaChsⅦ 影响绿僵菌细胞壁的完整性 | 第54-55页 |
·MaChsⅦ 影响绿僵菌对高渗透压的耐受性 | 第55-56页 |
·MaChsⅦ 影响绿僵菌的毒力 | 第56-57页 |
·讨论 | 第57-60页 |
·MaChsⅦ基因与绿僵菌细胞壁的完整性相关 | 第58页 |
·MaChsⅦ基因与绿僵菌渗透压的耐受性相关 | 第58页 |
·MaChsⅦ基因的缺失降低了绿僵菌的毒力 | 第58-59页 |
·基因敲除 | 第59-60页 |
4 主要结论及后续工作展望 | 第60-64页 |
·主要研究结论 | 第60-62页 |
·后续试验建议 | 第62-64页 |
致谢 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-75页 |
附录 | 第75-82页 |
A. 序列 | 第75-81页 |
B. 缩写 | 第81-82页 |
C. 作者硕士学习期间发表论文目录 | 第82页 |