| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-9页 |
| 缩略词 | 第9-10页 |
| 1 绪论 | 第10-17页 |
| ·引言 | 第10-11页 |
| ·绿僵菌研究背景及致病相关基因的研究进展 | 第11-12页 |
| ·绿僵菌Mapmi 基因研究背景及进展 | 第12页 |
| ·RNA 干扰技术在病原真菌基因功能研究中的应用进展 | 第12-13页 |
| ·根癌农杆菌介导的丝状真菌遗传转化的应用进展 | 第13-14页 |
| ·立题依据和研究目标 | 第14-15页 |
| ·研究内容 | 第15页 |
| ·技术路线 | 第15页 |
| ·本研究创新之处 | 第15-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-30页 |
| ·材料 | 第17-19页 |
| ·所用菌株和昆虫 | 第17页 |
| ·主要实验仪器 | 第17-18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·主要培养基及溶液 | 第18-19页 |
| ·绿僵菌 Mapmi 基因cDNA 序列的克隆 | 第19-21页 |
| ·引物的设计 | 第19页 |
| ·绿僵菌侵染血淋巴时期的全长均一化cDNA 文库质粒的获得 | 第19页 |
| ·绿僵菌Mapmi 基因cDNA 序列的克隆 | 第19-21页 |
| ·绿僵菌Mapmi 基因DNA 全长的获取 | 第21页 |
| ·生物信息学分析 | 第21页 |
| ·Mapmi 基因的干扰 | 第21-29页 |
| ·扩增及酶切目标基因干扰片段 | 第22-24页 |
| ·双酶切干扰中间载体载体（pDPB） | 第24页 |
| ·干扰中间载体与Mapmi 基因干扰片段的连接 | 第24页 |
| ·连接后的载体pDPB-Mapmi 的克隆 | 第24页 |
| ·双酶切构建好的干扰中间载体载体（pDPB-Mapmi）和pK2 载体 | 第24-25页 |
| ·酶切的干扰pDPB-Mapmi 载体与pK2 干扰载体的连接 | 第25页 |
| ·连接后的载体 pK2-RNAi-Mapmi 的克隆 | 第25页 |
| ·转化农杆菌 | 第25页 |
| ·筛选农杆菌阳性克隆 | 第25-26页 |
| ·转化绿僵菌 | 第26-27页 |
| ·荧光定量PCR 技术检测干扰突变菌株的RNA 干扰效率 | 第27-28页 |
| ·干扰突变株性状分析 | 第28-29页 |
| ·数据分析 | 第29-30页 |
| 3 结果和分析 | 第30-40页 |
| ·Mapmi 基因的cDNA 序列的获取和DNA 全长的获取 | 第30-32页 |
| ·Mapmi 基因cDNA 序列的扩增 | 第30页 |
| ·Mapmi 基因DNA 序列的获取 | 第30页 |
| ·生物信息学分析结果 | 第30-32页 |
| ·Mapmi 基因RNA 干扰分析 | 第32-40页 |
| ·RNA 干扰效率的检测 | 第33-34页 |
| ·RNA 干扰突变株表型分析 | 第34-36页 |
| ·Mapmi 基因干扰突变株和野生株生物量测定 | 第36-37页 |
| ·干扰突变株和野生株萌发率及产孢量的测定 | 第37-38页 |
| ·干扰突变株和野生株室内生物学毒力测定 | 第38-40页 |
| 4 讨论 | 第40-43页 |
| ·丝状真菌基因功能研究的方法 | 第40-41页 |
| ·基因敲除( gene knockout) | 第40页 |
| ·RNA 干扰（RNA interference，RNAi） | 第40页 |
| ·超表达（over-expression） | 第40-41页 |
| ·Mapmi 基因影响真菌细胞壁完整性及真菌的毒力 | 第41-43页 |
| 5 结论与后续工作建议 | 第43-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 附录 | 第51页 |
| 作者在攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第51页 |
