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丹参SmMYB36基因的功能鉴定与代谢调控机制研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
第一章 文献综述第12-18页
    1.1 丹参研究进展第12-13页
        1.1.1 丹参的应用现状第12页
        1.1.2 酚酸类物质合成途径第12-13页
        1.1.3 丹参酮合成途径第13页
        1.1.4 丹参中次生代谢物的调控第13页
    1.2 不同亚族R2R3-MYB对植物发育和代谢的调控第13-15页
        1.2.1 R2R3-MYB转录因子对苯丙烷代谢的调控第14-15页
        1.2.2 R2R3-MYB转录因子对萜类代谢的调控第15页
        1.2.3 R2R3-MYB转录因子对发育过程的调控第15页
    1.3 R2R3-MYB对丹参活性物质的调控第15-16页
    1.4 R2R3-MYB调控代谢的复杂性第16页
    1.5 本研究的目的和意义第16-17页
    1.6 技术路线第17-18页
第二章 材料和方法第18-31页
    2.1 实验材料第18-20页
        2.1.1 质粒和菌种第18-19页
        2.1.2 植物材料第19页
        2.1.3 实验试剂第19页
        2.1.4 实验仪器第19-20页
    2.2 实验方法第20-31页
        2.2.1 基因全长的克隆和序列分析第20-22页
        2.2.2 载体构建和验证第22-23页
        2.2.3 亚细胞定位实验第23页
        2.2.4 转基因毛状根诱导、鉴定和同步化培养第23-24页
        2.2.5 转基因毛状根成分含量分析第24-26页
        2.2.6 转基因毛状根代谢途径基因表达量定量分析第26-27页
        2.2.7 蛋白质凝胶阻滞实验第27-31页
第三章 结果和分析第31-48页
    3.1 SmMYB36转录因子的基因克隆和生物信息学分析第31-35页
        3.1.1 丹参无菌苗RNA的提取和反转录第31页
        3.1.2 SmMYB36基因的克隆和分析第31-35页
    3.2 SmMYB36相关载体的构建第35-37页
    3.3 SmMYB36在洋葱表皮细胞中的定位第37-38页
    3.4 SmMYB36过表达毛状根的筛选和鉴定第38-39页
    3.5 过表达SmMYB36对丹参毛状根的影响第39-42页
        3.5.1 过表达SmMYB36影响毛状根颜色第39页
        3.5.2 过表达SmMYB36抑制酚酸和总黄酮积累第39-41页
        3.5.3 过表达SmMYB36促进丹参酮积累第41页
        3.5.4 过表达SmMYB36影响脂肪酸积累第41-42页
    3.6 SmMYB36过表达对途径基因表达的影响第42-44页
        3.6.1 SmMYB36过表达抑制酚酸合成途径基因的表达第42-43页
        3.6.2 SmMYB36过表达促进丹参酮合成途径基因的表达第43-44页
    3.7 SmMYB36转录因子作用靶标研究第44-48页
        3.7.1 SmMYB36蛋白原核表达纯化条件摸索和western杂交验证结果第44-45页
        3.7.2 SmMYB36与次生代谢途径基因启动子的体外互作第45-48页
第四章 讨论与结论第48-53页
    4.1 讨论第48-52页
        4.1.1 SmMYB36是进化上独特的R2R3-MYB转录因子第48页
        4.1.2 SmMYB36的亚细胞定位第48-49页
        4.1.3 SmMYB36抑制酚酸类物质积累的机理第49-50页
        4.1.4 SmMYB36促进丹参酮积累的机理第50页
        4.1.5 SmMYB36同时调控酚酸类物质和丹参酮积累的机理第50-51页
        4.1.6 SmMYB36的调控模型第51-52页
    4.2 结论第52-53页
参考文献第53-59页
附录第59-88页
致谢第88-89页
作者简介第89页

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