摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第12-18页 |
1.1 丹参研究进展 | 第12-13页 |
1.1.1 丹参的应用现状 | 第12页 |
1.1.2 酚酸类物质合成途径 | 第12-13页 |
1.1.3 丹参酮合成途径 | 第13页 |
1.1.4 丹参中次生代谢物的调控 | 第13页 |
1.2 不同亚族R2R3-MYB对植物发育和代谢的调控 | 第13-15页 |
1.2.1 R2R3-MYB转录因子对苯丙烷代谢的调控 | 第14-15页 |
1.2.2 R2R3-MYB转录因子对萜类代谢的调控 | 第15页 |
1.2.3 R2R3-MYB转录因子对发育过程的调控 | 第15页 |
1.3 R2R3-MYB对丹参活性物质的调控 | 第15-16页 |
1.4 R2R3-MYB调控代谢的复杂性 | 第16页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
1.6 技术路线 | 第17-18页 |
第二章 材料和方法 | 第18-31页 |
2.1 实验材料 | 第18-20页 |
2.1.1 质粒和菌种 | 第18-19页 |
2.1.2 植物材料 | 第19页 |
2.1.3 实验试剂 | 第19页 |
2.1.4 实验仪器 | 第19-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-31页 |
2.2.1 基因全长的克隆和序列分析 | 第20-22页 |
2.2.2 载体构建和验证 | 第22-23页 |
2.2.3 亚细胞定位实验 | 第23页 |
2.2.4 转基因毛状根诱导、鉴定和同步化培养 | 第23-24页 |
2.2.5 转基因毛状根成分含量分析 | 第24-26页 |
2.2.6 转基因毛状根代谢途径基因表达量定量分析 | 第26-27页 |
2.2.7 蛋白质凝胶阻滞实验 | 第27-31页 |
第三章 结果和分析 | 第31-48页 |
3.1 SmMYB36转录因子的基因克隆和生物信息学分析 | 第31-35页 |
3.1.1 丹参无菌苗RNA的提取和反转录 | 第31页 |
3.1.2 SmMYB36基因的克隆和分析 | 第31-35页 |
3.2 SmMYB36相关载体的构建 | 第35-37页 |
3.3 SmMYB36在洋葱表皮细胞中的定位 | 第37-38页 |
3.4 SmMYB36过表达毛状根的筛选和鉴定 | 第38-39页 |
3.5 过表达SmMYB36对丹参毛状根的影响 | 第39-42页 |
3.5.1 过表达SmMYB36影响毛状根颜色 | 第39页 |
3.5.2 过表达SmMYB36抑制酚酸和总黄酮积累 | 第39-41页 |
3.5.3 过表达SmMYB36促进丹参酮积累 | 第41页 |
3.5.4 过表达SmMYB36影响脂肪酸积累 | 第41-42页 |
3.6 SmMYB36过表达对途径基因表达的影响 | 第42-44页 |
3.6.1 SmMYB36过表达抑制酚酸合成途径基因的表达 | 第42-43页 |
3.6.2 SmMYB36过表达促进丹参酮合成途径基因的表达 | 第43-44页 |
3.7 SmMYB36转录因子作用靶标研究 | 第44-48页 |
3.7.1 SmMYB36蛋白原核表达纯化条件摸索和western杂交验证结果 | 第44-45页 |
3.7.2 SmMYB36与次生代谢途径基因启动子的体外互作 | 第45-48页 |
第四章 讨论与结论 | 第48-53页 |
4.1 讨论 | 第48-52页 |
4.1.1 SmMYB36是进化上独特的R2R3-MYB转录因子 | 第48页 |
4.1.2 SmMYB36的亚细胞定位 | 第48-49页 |
4.1.3 SmMYB36抑制酚酸类物质积累的机理 | 第49-50页 |
4.1.4 SmMYB36促进丹参酮积累的机理 | 第50页 |
4.1.5 SmMYB36同时调控酚酸类物质和丹参酮积累的机理 | 第50-51页 |
4.1.6 SmMYB36的调控模型 | 第51-52页 |
4.2 结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
附录 | 第59-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
作者简介 | 第89页 |