| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略表 | 第9-10页 |
| 前言 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-22页 |
| 1.1 伪狂犬病 | 第11-18页 |
| 1.1.1 伪狂犬病病毒 | 第11-12页 |
| 1.1.2 病原学 | 第12-13页 |
| 1.1.3 病毒的分子生物学特点 | 第13-16页 |
| 1.1.4 伪狂犬病在我国流行趋势 | 第16-17页 |
| 1.1.5 PRV的临床症状 | 第17页 |
| 1.1.6 PRV疫苗研究进展及防御措施 | 第17-18页 |
| 1.2 CRISPR/Cas9基因编辑系统 | 第18-21页 |
| 1.2.1 CRISPR/Cas9的简介 | 第18-20页 |
| 1.2.2 CRISPR/Cas9工作原理 | 第20-21页 |
| 1.3 研究目的与意义 | 第21-22页 |
| 第二章 有效sgRNA的筛选 | 第22-30页 |
| 2.1 材料与方法 | 第22-25页 |
| 2.1.1 材料 | 第22页 |
| 2.1.2 方法 | 第22-25页 |
| 2.2 结果 | 第25-29页 |
| 2.2.1 sgRNA质粒的构建 | 第25-26页 |
| 2.2.2 CRISPR/Cas9载体功能验证 | 第26-29页 |
| 2.3 讨论 | 第29页 |
| 2.4 小结 | 第29-30页 |
| 第三章 非同源末端连接修复及其效率检测 | 第30-35页 |
| 3.1 材料与方法 | 第30-32页 |
| 3.1.1 材料 | 第30页 |
| 3.1.2 方法 | 第30-32页 |
| 3.2 结果 | 第32-33页 |
| 3.3 讨论 | 第33-34页 |
| 3.4 小结 | 第34-35页 |
| 第四章 gE基因缺失病毒毒株的筛选与毒力实验 | 第35-40页 |
| 4.1 材料方法 | 第35-36页 |
| 4.1.1 材料 | 第35页 |
| 4.1.2 方法 | 第35-36页 |
| 4.2 结果 | 第36-39页 |
| 4.2.1 PCR反应验证gE基因缺失病毒毒株 | 第36-37页 |
| 4.2.2 蛋白表达验证PRV gE基因缺失突变毒株 | 第37页 |
| 4.2.3 gE基因缺失病毒体外生长实验 | 第37-38页 |
| 4.2.4 PRV gE基因缺失毒株病毒的毒力实验 | 第38-39页 |
| 4.3 讨论 | 第39页 |
| 4.4 小结 | 第39-40页 |
| 第五章 gE/gI及gE/gI/TK基因缺失毒株构建及体外实验与病毒毒力及免疫保护实验 | 第40-48页 |
| 5.1 材料方法 | 第40-41页 |
| 5.1.1 材料 | 第40页 |
| 5.1.2 方法 | 第40-41页 |
| 5.2 结果 | 第41-46页 |
| 5.2.1 gE/gI双基因缺失病毒筛选与纯化 | 第41-42页 |
| 5.2.2 gE/gI双基因缺失病毒体外生长实验 | 第42页 |
| 5.2.3 gE/gI双基因缺失毒株病毒的毒力实验 | 第42-43页 |
| 5.2.4 gE/gI/TK三基因缺失病毒的筛选与纯化 | 第43-44页 |
| 5.2.5 gE/gI/TK三基因缺失病毒体外生长实验 | 第44-45页 |
| 5.2.6 gE/gI/TK三基因缺失毒株病毒的毒力及免疫保护实验 | 第45-46页 |
| 5.3 讨论 | 第46页 |
| 5.4 小结 | 第46-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-57页 |
| 附录 | 第57-58页 |
| 作者简介 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
