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生长素合成与转运相关基因在玉米雌花序发育过程中的表达分析

符号说明第5-9页
中文摘要第9-11页
英文摘要第11-13页
1 前言第14-31页
    1.1 玉米花序的结构和发育过程第14-18页
        1.1.1 玉米成熟花序的结构第14-15页
        1.1.2 玉米花序的发育过程第15-18页
    1.2 生长素合成与转运的研究进展第18-28页
        1.2.1 生长素合成途径第18-22页
            1.2.1.1 色氨酸依赖的IAA生物合成第18-19页
            1.2.1.2 YUCCA在色胺途径中可能参与催化限速步骤第19-20页
            1.2.1.3 吲哚3乙醛肟是能转变成IAA的吲哚硫配醣体的前体第20-21页
            1.2.1.4 通过分析trp突变体来揭示Trp-不依赖的IAA生物合成第21-22页
        1.2.2 YUC基因的功能和表达模式第22-25页
            1.2.2.1 YUC基因的功能研究第22-23页
            1.2.2.2 YUC基因的表达模式第23-25页
        1.2.3 生长素转运载体PIN基因家族的研究进展第25-28页
            1.2.3.1 生长素转运载体PIN基因的表达模式及功能第25-27页
            1.2.3.2 生长素转运与合成的关系第27-28页
    1.3 玉米的遗传转化第28-30页
        1.3.1 玉米遗传转化方法第28-30页
            1.3.1.1 基因枪法第29页
            1.3.1.2 农杆菌介导法第29-30页
    1.4 本研究的目的和意义第30-31页
2 材料与方法第31-49页
    2.1 实验材料第31页
        2.1.1 植物材料第31页
        2.1.2 菌株、质粒第31页
        2.1.3 酶及生化试剂第31页
    2.2 方法第31-49页
        2.2.1 RNA的提取和纯化第31-32页
        2.2.2 实时定量PCR分析第32-33页
        2.2.3 PCR扩增目的片段第33页
        2.2.4 目的片段与克隆载体的连接第33-34页
        2.2.5 大肠杆菌感受态细胞的制备第34-35页
        2.2.6 大肠杆菌感受态细胞的转化(热击法)第35页
        2.2.7 碱法小量质粒DNA的提取第35-36页
        2.2.8 目的片段和质粒DNA的酶切与回收第36页
        2.2.9 DNA测序第36页
        2.2.10 ZmYUC4基因过表达载体的构建第36页
        2.2.11 Artificial microRNA沉默ZmYUC基因表达载体的构建第36-40页
        2.2.12 LBA4404农杆菌感受态制备第40页
        2.2.13 农杆菌感受态细胞的转化(电击法)第40-41页
        2.2.14 农杆菌介导的玉米幼胚转化及抗性植株的获得第41页
        2.2.15 原位杂交分析第41-48页
            2.2.15.1 材料的固定第41-42页
            2.2.15.2 材料的包埋第42页
            2.2.15.3 切片第42页
            2.2.15.4 探针标记第42-46页
            2.2.15.5 脱蜡、消化、乙酰化和杂交第46-47页
            2.2.15.6 洗片第47-48页
            2.2.15.7 检测第48页
        2.2.16 共聚焦显微镜观察和图像处理第48-49页
3 结果与分析第49-69页
    3.1 生长素响应信号在玉米雌花序发育过程中的分布模式第49-50页
    3.2 生长素合成相关基因YUC家族在玉米雌花序发育过程中的表达分析第50-62页
        3.2.1 玉米YUC基因家族的鉴定与分析第50-52页
        3.2.2 玉米、水稻和拟南芥YUC基因家族的进化树分析第52-54页
        3.2.3 玉米YUC基因家族在雌花序发育过程中的表达模式分析第54-57页
            3.2.3.1 玉米YUC基因家族的实时定量PCR分析第54-56页
            3.2.3.2 玉米YUC基因的原位杂交分析第56-57页
        3.2.4 玉米YUC基因的克隆、转化第57-62页
            3.2.4.1 玉米YUC基因的artificial microRNA载体的构建第58页
            3.2.4.2 玉米YUC基因过表达载体的构建第58-60页
            3.2.4.3 农杆菌介导的玉米幼胚转化及再生植株的获得第60-61页
            3.2.4.4 转基因植株的分子检测第61-62页
    3.3 玉米PIN基因家族在雌花序发育过程中的表达分析第62-69页
        3.3.1 玉米PIN基因家族的实时定量PCR分析第62-64页
        3.3.2 ZmPIN1a基因在玉米雌花序发育过程中的表达模式第64-65页
        3.3.3 生长素响应信号及生长素转运信号在不同节位的腋芽中的分布模式第65-69页
4 讨论第69-72页
    4.1 YUC基因参与的IAA生物合成在玉米雌花序发育过程中的作用第69页
    4.2 YUC基因的过表达与敲除对玉米雌花序发育的影响第69-70页
    4.3 生长素转运在玉米雌花序发育过程中的作用第70-71页
    4.4 生长素合成及转运在玉米不同节位的腋芽发育过程中存在差异第71-72页
5 结论第72-73页
参考文献第73-85页
致谢第85-86页
附录第86-88页

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