| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第14-32页 |
| 1.1 表观遗传学调控原理及组蛋白甲基化修饰 | 第14-15页 |
| 1.2 VIN3家族蛋白 | 第15-21页 |
| 1.2.1 VIN3家族蛋白的特征 | 第15-16页 |
| 1.2.2 VIN3蛋白家族是拟南芥春化途径调控的重要因子 | 第16-19页 |
| 1.2.2.1 春化作用 | 第16页 |
| 1.2.2.2 拟南芥春化过程中的表观遗传学调控 | 第16-18页 |
| 1.2.2.3 VIN3家族蛋白对FLC家族基因的选择性抑制 | 第18-19页 |
| 1.2.3 非诱导光周期条件下VIN3家族蛋白对拟南芥开花的调控 | 第19-20页 |
| 1.2.4 VIN3-like基因在水稻发育及开花调控方面的作用 | 第20-21页 |
| 1.3 受H3K27me3调控的miRNA及相关开花调控途径 | 第21-27页 |
| 1.3.1 miR156介导的开花途径 | 第22-25页 |
| 1.3.1.1 miR156的功能 | 第22页 |
| 1.3.1.2 miR156的靶基因及其功能 | 第22-25页 |
| 1.3.1.2.1 AtSPL2, 10, 11影响营养生长期的叶形转变 | 第23页 |
| 1.3.1.2.2 AtSPL3，4，5 影响植物发育时期的转变 | 第23-24页 |
| 1.3.1.2.3 AtSPL9, 15加速植物发育时期的转变并影响分枝特性 | 第24页 |
| 1.3.1.2.4 其他受miR156调控的SPLs | 第24-25页 |
| 1.3.2 miRNA172介导的开花途径 | 第25-26页 |
| 1.3.3 禾本科早熟科亚科特异miR5200对开花时间的调控 | 第26-27页 |
| 1.4 麦类作物开花调控的研究概况 | 第27-29页 |
| 1.4.1 VRN1和FT在茎尖和叶中促进开花 | 第27-28页 |
| 1.4.2 VRN1的表达活性与麦类植物春化需求的关系 | 第28页 |
| 1.4.3 VRN1与FLC的异同 | 第28-29页 |
| 1.5 研究麦类植物VILs开花调控机理的意义 | 第29-30页 |
| 1.6 短柄草作为麦类植物模式材料的优势 | 第30-31页 |
| 1.7 本研究的目的意义 | 第31-32页 |
| 2 材料和方法 | 第32-50页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-34页 |
| 2.1.1 植物材料和种植 | 第32页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第32页 |
| 2.1.3 酶及生化试剂 | 第32页 |
| 2.1.4 PCR引物 | 第32-34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-38页 |
| 2.2.1 大肠杆菌感受态的制备 | 第34页 |
| 2.2.2 热激法转化大肠杆菌 | 第34-35页 |
| 2.2.3 PCR菌落筛选 | 第35页 |
| 2.2.4 小量碱法提取质粒 | 第35-37页 |
| 2.2.5 小量试剂盒提取质粒 | 第37-38页 |
| 2.2.6 农杆菌EHA105感受态的制备 | 第38页 |
| 2.2.7 冻融法转化农杆菌 | 第38页 |
| 2.3 载体构建 | 第38-41页 |
| 2.3.1 PCR扩增目的片段 | 第38-39页 |
| 2.3.2 TA克隆 | 第39页 |
| 2.3.3 连接反应 | 第39-40页 |
| 2.3.4 胶回收 | 第40-41页 |
| 2.3.5 表达载体构建 | 第41页 |
| 2.4 二穗短柄草的遗传转化 | 第41-45页 |
| 2.4.1 诱导愈伤组织 | 第41-42页 |
| 2.4.2 二穗短柄草的侵染 | 第42-43页 |
| 2.4.3 二穗短柄草的共培养 | 第43页 |
| 2.4.4 二穗短柄草的筛选 | 第43-44页 |
| 2.4.5 转基因植株分化再生 | 第44-45页 |
| 2.4.6 转基因苗的鉴定 | 第45页 |
| 2.5 转基因材料分析 | 第45-48页 |
| 2.5.1 CTAB法提取基因组 | 第45-46页 |
| 2.5.2 PCR鉴定转基因植株 | 第46页 |
| 2.5.3 GUS组织化学染色鉴定转基因植株 | 第46-47页 |
| 2.5.4 Trizol法提取RNA | 第47页 |
| 2.5.5 反转录合成cDNA | 第47-48页 |
| 2.5.6 荧光定量PCR | 第48页 |
| 2.6 二穗短柄草的种植与取材 | 第48-50页 |
| 2.6.1 二穗短柄草Bd21的春化处理与材料提取 | 第48-49页 |
| 2.6.2 二穗短柄草各部位材料提取 | 第49-50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-64页 |
| 3.1 短柄草VIL家族蛋白的结构及聚类分析 | 第50-52页 |
| 3.1.1 短柄草VIL家族蛋白的结构 | 第50页 |
| 3.1.2 VIL家族蛋白的聚类分析 | 第50-52页 |
| 3.2 短柄草VILs基因的表达分析 | 第52-56页 |
| 3.2.1 春化对VILs表达水平的影响 | 第52-54页 |
| 3.2.2 VILs基因在长短日照条件的表达分析 | 第54-55页 |
| 3.2.3 BdVIL4，5 基因在植株不同部位的表达分析 | 第55-56页 |
| 3.3 BdVIL4和BdVIL5 RNAi表达载体的构建及其转基因植株的获得 | 第56-57页 |
| 3.3.1 BdVIL4和BdVIL5 RNAi表达载体的构建 | 第56-57页 |
| 3.3.2 BdVIL4和BdVIL5 RNAi转基因二穗短柄草的获得 | 第57页 |
| 3.4 BdVIL4 RNAi转基因植株的分析 | 第57-64页 |
| 3.4.1 BdVIL4 RNAi转基因植株的表型分析 | 第57-59页 |
| 3.4.1.1 BdVIL4 RNA干扰对开花时间的影响 | 第57页 |
| 3.4.1.2 BdVIL4 RNA干扰对植株分枝特性的影响 | 第57-59页 |
| 3.4.2 BdVIL4 RNA干扰对开花关键基因的影响 | 第59-60页 |
| 3.4.3 BdVIL4 RNA干扰对miR156及其靶基因的影响 | 第60-62页 |
| 3.4.4 BdVIL4 RNA干扰对miR5200的影响 | 第62-64页 |
| 4 讨论 | 第64-66页 |
| 4.1 BdVIL4 RNAi植株在超长日照及春化条件下的开花时间分析 | 第64页 |
| 4.2 VILs对miR156的调控 | 第64-65页 |
| 4.3 VILs对miR5200的调控 | 第65页 |
| 4.4 BdVIL4对二穗短柄草穗发育的影响 | 第65-66页 |
| 5 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第80页 |
