| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第8-15页 |
| 1.1 脂肪氧合酶概述 | 第8-10页 |
| 1.1.1 脂肪氧合酶的作用机制和分布 | 第8-9页 |
| 1.1.2 脂肪氧合酶应用 | 第9-10页 |
| 1.1.3 脂肪氧合酶异源表达研究现状 | 第10页 |
| 1.2 抗氧化酶简介 | 第10-12页 |
| 1.2.1 抗氧化酶的分类 | 第10-11页 |
| 1.2.2 超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的催化机理 | 第11-12页 |
| 1.3 谷氨酰胺转氨酶的简介 | 第12-13页 |
| 1.3.1 谷氨酰胺转氨酶的作用机理 | 第12-13页 |
| 1.3.2 谷氨酰胺转氨酶的应用 | 第13页 |
| 1.4 立题依据及研究意义 | 第13页 |
| 1.5 本论文主要研究内容 | 第13-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-23页 |
| 2.1 材料 | 第15-16页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第15页 |
| 2.1.2 培养基 | 第15页 |
| 2.1.3 主要试剂与仪器 | 第15-16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-23页 |
| 2.2.1 DNA操作 | 第16页 |
| 2.2.2 抗氧化酶基因克隆及表达 | 第16-17页 |
| 2.2.3 培养方法 | 第17-18页 |
| 2.2.4 诱导条件的优化 | 第18页 |
| 2.2.5 等离子诱变方法 | 第18-19页 |
| 2.2.6 高通量筛选方法 | 第19页 |
| 2.2.7 重组菌株生长测定 | 第19页 |
| 2.2.8 脂肪氧合酶酶活力测定 | 第19页 |
| 2.2.9 抗氧化酶酶活力测定 | 第19-21页 |
| 2.2.10 脂肪氧合酶的制备提取与分离纯化 | 第21页 |
| 2.2.11 蛋白浓度的测定 | 第21页 |
| 2.2.12 脂肪氧合酶热稳定性测定 | 第21-22页 |
| 2.2.13 SDS-PAGE分析 | 第22-23页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第23-37页 |
| 3.1 共表达抗氧化酶对脂肪氧合酶表达的影响 | 第23-27页 |
| 3.1.1 抗氧化酶的选择 | 第23页 |
| 3.1.2 带有不同抗氧化酶的重组表达载体的构建 | 第23-25页 |
| 3.1.3 重组菌的表达分析 | 第25-27页 |
| 3.2 等离子诱变重组菌N6-M | 第27-30页 |
| 3.2.1 ARTP诱变条件优化 | 第27-28页 |
| 3.2.2 筛选脂肪氧合酶高产突变株 | 第28-29页 |
| 3.2.3 诱变菌遗传稳定性研究 | 第29-30页 |
| 3.3 重组菌株诱导条件优化 | 第30-32页 |
| 3.3.1 诱导时菌体浓度和诱导剂浓度的正交试验 | 第30-31页 |
| 3.3.2 诱导温度的单因素实验 | 第31-32页 |
| 3.4 添加谷氨酰胺转氨酶提高脂肪氧合酶热稳定性 | 第32-37页 |
| 3.4.1 重组脂肪氧合酶的纯化 | 第32页 |
| 3.4.2 脂肪氧合酶热稳定性测定 | 第32-33页 |
| 3.4.3 谷氨酰胺转氨酶对脂肪氧合酶热稳定性的影响 | 第33-37页 |
| 主要结论与展望 | 第37-39页 |
| 致谢 | 第39-41页 |
| 参考文献 | 第41-44页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第44页 |