摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1.前言 | 第13-24页 |
1.1 海洋微藻应用价值 | 第13-14页 |
1.1.1 食品及医药领域 | 第13-14页 |
1.1.2 环境工业用途 | 第14页 |
1.2 产油微藻的研究现状 | 第14-17页 |
1.2.1 微藻油脂 | 第14-16页 |
1.2.2 影响微藻油脂合成的因素 | 第16-17页 |
1.3 基因组改组技术及其研究进展 | 第17-21页 |
1.3.1 基因组改组的原理与优势 | 第17-18页 |
1.3.2 基因组改组技术过程 | 第18-21页 |
1.3.2.1 亲本库的构建 | 第18-19页 |
1.3.2.2 原生质体的制备与融合 | 第19-20页 |
1.3.2.3 有性重组 | 第20页 |
1.3.2.4 重组子的检出 | 第20-21页 |
1.3.2.5 多轮基因重组 | 第21页 |
1.4 基因组改组技术的应用 | 第21-22页 |
1.4.1 提高生物产率以及耐受性 | 第21页 |
1.4.2 用于基因表型和基因组的研究 | 第21-22页 |
1.4.3 存在的问题 | 第22页 |
1.5 展望 | 第22-23页 |
1.6 本课题研究的内容及意义 | 第23-24页 |
1.6.1 研究内容 | 第23页 |
1.6.2 研究意义 | 第23-24页 |
2 两种富油海洋微藻的诱变 | 第24-35页 |
2.1 仪器、试剂和藻种 | 第24-26页 |
2.1.1 藻种及培养条件 | 第24页 |
2.1.2 仪器与试剂 | 第24-26页 |
2.1.2.1 仪器 | 第24-25页 |
2.1.2.2 试剂 | 第25-26页 |
2.2 试验方法 | 第26-27页 |
2.2.1 紫外线对两种海藻诱变条件的确定 | 第26页 |
2.2.2 甲基磺酸乙酯(EMS)对两种海藻诱变条件的确定 | 第26页 |
2.2.3 诱变株的筛选 | 第26-27页 |
2.2.4 总脂含量测定 | 第27页 |
2.2.5 稳定性分析 | 第27页 |
2.3 结果与分析 | 第27-33页 |
2.3.1 紫外诱变条件的确定 | 第27-29页 |
2.3.2 EMS诱变条件的确定 | 第29页 |
2.3.3 尼罗红染色初步筛选结果 | 第29-31页 |
2.3.4 总脂测定 | 第31-32页 |
2.3.5 突变株的遗传稳定性分析 | 第32-33页 |
2.4 小结与讨论 | 第33-35页 |
3 两株微藻原生质体制备 | 第35-43页 |
3.1 材料与试剂 | 第35-36页 |
3.1.1 藻种与培养条件 | 第35页 |
3.1.2 主要试剂 | 第35-36页 |
3.1.3 仪器与设备 | 第36页 |
3.2 实验方法 | 第36-39页 |
3.2.1 微藻的纯化与扩大培养 | 第36-37页 |
3.2.2 藻细胞的预处理 | 第37页 |
3.2.3 微藻的原生质体制备 | 第37-38页 |
3.2.3.1 酶的种类对原生质体制备的影响 | 第37页 |
3.2.3.2 p H对原生质体制备的影响 | 第37页 |
3.2.3.3 酶解时间对原生质体制备的影响 | 第37-38页 |
3.2.4 两种微藻微藻原生质体再生培养基的选择 | 第38页 |
3.2.5 两种微藻原生质体再生率计算 | 第38页 |
3.2.6 两种微藻的原生质体的制备 | 第38-39页 |
3.3 实验结果 | 第39-41页 |
3.3.1 酶的种类对拟微绿球藻及日本小球藻原生质体制备的影响 | 第39-40页 |
3.3.2 p H对拟微绿球藻和日本小球藻原生质体制备的影响 | 第40-41页 |
3.3.3 酶解时间对拟微绿球藻和日本小球藻原生质体制备的影响 | 第41页 |
3.4 小结 | 第41-43页 |
4 基因组改组选育富油拟微绿球藻与日本小球藻 | 第43-58页 |
4.1 仪器、材料与试剂 | 第43-44页 |
4.1.1 藻种与培养方法 | 第43页 |
4.1.2 主要试剂 | 第43页 |
4.1.3 主要仪器 | 第43-44页 |
4.2 实验方案 | 第44-46页 |
4.2.1 第一轮基因组改组 | 第44页 |
4.2.1.1 基因组改组 | 第44页 |
4.2.1.2 改组藻株的筛选 | 第44页 |
4.2.1.4 高产改组藻株的遗传稳定性分析 | 第44页 |
4.2.2 第二轮基因组改组 | 第44-45页 |
4.2.4 藻株生长速率、单位体积总脂含量与单位体积总脂产率的测定 | 第45页 |
4.2.5 总脂含量组分的测定 | 第45-46页 |
4.3 实验结果 | 第46-56页 |
4.3.1 两种海洋微藻的第一轮基因组改组 | 第46-48页 |
4.3.1.1 第一轮基因组改组藻株筛选 | 第46-47页 |
4.3.1.2 高产改组藻株的遗传稳定性分析 | 第47-48页 |
4.3.2 第二轮基因组改组 | 第48-52页 |
4.3.2.1 第二轮改组藻株筛选 | 第48-51页 |
4.3.2.2 高产改组藻株的遗传稳定性分析 | 第51-52页 |
4.3.3 藻株生长速率和单位体积总脂产率的测定 | 第52-54页 |
4.3.4 油脂组分的分析 | 第54-56页 |
4.4 本章小结 | 第56-58页 |
5 结论与展望 | 第58-60页 |
5.1 结论 | 第58页 |
5.2 展望 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
致谢 | 第68页 |