| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 学术名词简表 | 第10-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-27页 |
| 1.1 肠炎发生分子机制研究 | 第13-14页 |
| 1.2 LKB1基因的发现及其分子结构 | 第14-15页 |
| 1.3 LKB1基因的调节方式 | 第15页 |
| 1.4 LKB1基因功能 | 第15-19页 |
| 1.4.1 对T细胞发育影响 | 第15-16页 |
| 1.4.2 促进成肌细胞分化 | 第16-17页 |
| 1.4.3 可变剪切体LKB1s与精细胞形成 | 第17-18页 |
| 1.4.4 LKB1对细胞极性调节 | 第18-19页 |
| 1.4.5 LKB1与癌症发生关系 | 第19页 |
| 1.5 LKB1基因相关信号通路 | 第19-23页 |
| 1.5.1 LKB1/AMPK信号通路与能量代谢 | 第19-20页 |
| 1.5.2 AMPK/SIRT1/NF-κβ信号通路介导炎症反应 | 第20-22页 |
| 1.5.3 LKB1/AMPK/mTOR信号通路与癌症发生 | 第22-23页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第23-26页 |
| 1.6.1 试验目的 | 第24页 |
| 1.6.2 试验研究的主要内容 | 第24-26页 |
| 1.7 本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-40页 |
| 2.1 试验材料 | 第27-28页 |
| 2.2 仪器与试剂 | 第28-30页 |
| 2.3 试验方法 | 第30-35页 |
| 2.3.1 各组织总RNA的提取 | 第30-31页 |
| 2.3.2 总RNA质量检测 | 第31页 |
| 2.3.3 反转录合成cDNA | 第31页 |
| 2.3.4 克隆LKB1基因 | 第31-34页 |
| 2.3.5 组织定量表达分析 | 第34-35页 |
| 2.4 细胞试验 | 第35-40页 |
| 2.4.1 细胞传代 | 第35-36页 |
| 2.4.2 冷冻和复苏细胞 | 第36页 |
| 2.4.3 细胞计数 | 第36-37页 |
| 2.4.4 siRNA序列及相关基因引物信息 | 第37-38页 |
| 2.4.5 筛选siRNA分子及检测炎症细胞中各基因表达水平 | 第38-40页 |
| 3 试验结果 | 第40-53页 |
| 3.1 LKB1基因克隆及序列分析 | 第40-45页 |
| 3.1.1 RNA质量的检测 | 第40页 |
| 3.1.2 LKB1基因克隆结果 | 第40-41页 |
| 3.1.3 测序及生物信息学分析结果 | 第41-45页 |
| 3.2 检测肠炎模型组各组织基因表达 | 第45-46页 |
| 3.3 细胞试验结果 | 第46-49页 |
| 3.3.1 CEC细胞培养及观察 | 第46页 |
| 3.3.2 细胞生长曲线 | 第46-47页 |
| 3.3.3 构建细胞炎症模型 | 第47-49页 |
| 3.4 筛选干扰siRNA序列 | 第49-51页 |
| 3.4.1 细胞总RNA提取及反转录 | 第49-50页 |
| 3.4.2 转染及筛选siRNA | 第50-51页 |
| 3.5 干扰LKB1基因对AMPK信号通路相关基因表达结果 | 第51-53页 |
| 3.5.1 LKB1/AMPK信号通路下游相关基因表达 | 第51-52页 |
| 3.5.2 PGC-1α和ATG13表达 | 第52-53页 |
| 3.6 炎症细胞中促炎因子IL-lA和TNF-a表达结果 | 第53页 |
| 4 讨论 | 第53-59页 |
| 4.1 克隆及生物信息学分析 | 第53-54页 |
| 4.2 肠炎模型组各组织表达分析 | 第54-56页 |
| 4.2.1 LKB1组织表达分析 | 第55-56页 |
| 4.2.2 与LKB1相关基因的组织表达分析 | 第56页 |
| 4.3 转染si-02-LKB1对炎症细胞模型中信号因子表达影响 | 第56-59页 |
| 4.3.1 PGC-1α和ATG13表达差异分析 | 第57页 |
| 4.3.2 AMPK激酶及其相关信号因子表达差异分析 | 第57-58页 |
| 4.3.3 促炎因子IL-1A和TNF-α表达差异分析 | 第58-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
