摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
英文符号说明 | 第12-14页 |
引言 | 第14页 |
1 文献综述 | 第14-21页 |
1.1 脂肪组织 | 第14-18页 |
1.1.1 脂肪组织的分类和沉积规律 | 第14-15页 |
1.1.2 调控脂肪细胞分化的重要因子 | 第15-17页 |
1.1.3 调控脂肪分解的重要酶 | 第17-18页 |
1.2 成纤维细胞因子21 | 第18-19页 |
1.2.1 FGF家族概述 | 第18页 |
1.2.2 FGF21的结构与分布 | 第18页 |
1.2.3 FGF21对脂代谢过程的调节 | 第18-19页 |
1.2.4 FGF21对糖代谢的调节 | 第19页 |
1.2.5 FGF21对生酮的调节 | 第19页 |
1.3 本研究的目的与意义 | 第19-21页 |
2 材料方法 | 第21-35页 |
2.1 试验材料 | 第21页 |
2.1.1 实验动物 | 第21页 |
2.1.2 主要耗材及常规器材 | 第21页 |
2.2 仪器与试剂 | 第21-24页 |
2.2.1 主要仪器 | 第21-22页 |
2.2.2 主要试剂 | 第22-24页 |
2.3 试验方法 | 第24-35页 |
2.3.1 山羊前体脂肪细胞的原代分离培养 | 第24页 |
2.3.2 脂肪细胞传代培养 | 第24-25页 |
2.3.3 前体脂肪细胞生长曲线的绘制 | 第25页 |
2.3.4 前体脂肪细胞诱导分化 | 第25-26页 |
2.3.5 脂肪细胞油红O染色 | 第26页 |
2.3.6 细胞总DNA的提取 | 第26-27页 |
2.3.7 细胞线粒体染色 | 第27页 |
2.3.8 细胞总RNA的提取 | 第27-28页 |
2.3.9 总RNA质量检测 | 第28页 |
2.3.10 cDNA的合成 | 第28-29页 |
2.3.11 FGF21基因的克隆测序 | 第29-32页 |
2.3.11.1 引物设计 | 第29页 |
2.3.11.2 RT-PCR扩增 | 第29-30页 |
2.3.11.3 RT-PCR产物胶回收 | 第30-31页 |
2.3.11.4 目的基因的克隆 | 第31-32页 |
2.3.11.5 阳性克隆的鉴定及测序 | 第32页 |
2.3.11.6 生物信息学网站和分析软件 | 第32页 |
2.3.12 实时荧光定量PCR | 第32-35页 |
2.3.13 统计分析 | 第35页 |
3 结果与分析 | 第35-49页 |
3.1 FGF21的克隆及序列分析 | 第35-38页 |
3.1.1 RNA质量检测 | 第35-36页 |
3.1.2 FGF21基因扩增结果 | 第36页 |
3.1.3 目的条带的测序及比对结果 | 第36-37页 |
3.1.4 生物信息学分析 | 第37-38页 |
3.2 山羊前体脂肪细胞的原代培养及形态学特征 | 第38-39页 |
3.3 山羊前体脂肪细胞生长曲线绘制 | 第39-40页 |
3.4 山羊前体脂肪细胞的诱导分化 | 第40-41页 |
3.5 山羊脂肪细胞分化相关基因的表达 | 第41-42页 |
3.6 前脂肪细胞分化过程中FGF21的表达变化及FGF21实验浓度的选择 | 第42-43页 |
3.7 FGF21对脂肪代谢的影响 | 第43-46页 |
3.7.1 FGF21对脂肪分解代谢的调控 | 第43-45页 |
3.7.2 FGF21对脂肪合成代谢的调控 | 第45-46页 |
3.8 FGF21对线粒体变化的影响 | 第46-49页 |
3.8.1 FGF21上调细胞中线粒体含量 | 第46-48页 |
3.8.2 FGF21调控线粒体融合、分裂和生成相关基因的表达 | 第48-49页 |
4 讨论 | 第49-54页 |
4.1 FGF21基因的克隆及生物信息学分析 | 第49-50页 |
4.2 山羊脂肪细胞分化过程中关键基因的表达 | 第50页 |
4.3 FGF21对脂肪分解代谢的影响 | 第50-52页 |
4.4 FGF21对脂肪合成代谢的调控 | 第52页 |
4.5 FGF21促进线粒体的生物合成 | 第52-54页 |
5 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-63页 |
致谢 | 第63页 |