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粗糙脉孢菌C2H2突变株筛选及基因功能研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-8页
1 前言第8-18页
   ·木质纤维素降解第8-13页
     ·纤维素酶系组成和作用方式第8-9页
     ·纤维素酶诱导机制第9-10页
     ·纤维素酶表达调控机制第10-13页
   ·粗糙脉孢菌概述第13-16页
     ·粗糙脉孢菌的基本特征第13-15页
     ·粗糙脉孢菌在生物能源领域研究现状第15-16页
   ·课题立项依据及目的意义第16-18页
     ·课题立项依据第16-17页
     ·课题研究意义第17-18页
2 材料与方法第18-32页
   ·实验材料第18-21页
     ·菌株第18-19页
     ·质粒第19-20页
     ·培养基第20-21页
   ·仪器和试剂第21-26页
     ·仪器第21页
     ·试剂第21-22页
     ·PCR引物第22-26页
   ·分子生物学操作方法第26-29页
     ·PCR反应第26页
     ·琼脂糖凝胶电泳第26页
     ·质粒提取第26-27页
     ·酶切反应第27页
     ·连接反应第27页
     ·琼脂糖凝胶切胶回收第27页
     ·大肠杆菌转化第27-28页
     ·SDS-PAGE电泳第28页
     ·粗糙脉孢菌基因组提取第28页
     ·粗糙脉孢菌RNA提取与纯化第28-29页
     ·荧光定量PCR第29页
   ·粗糙脉孢菌有性杂交第29页
   ·粗糙脉孢菌转化第29-30页
   ·摇瓶发酵第30页
   ·蛋白及酶活测定第30-31页
     ·蛋白测定第30页
     ·酶活测定第30-31页
   ·生物量测定第31-32页
3 结果与讨论第32-54页
   ·C_2H_2家族突变体库筛选第32-42页
     ·C_2H_2家族突变株的鉴定与保藏第32-35页
     ·C_2H_2家族突变株蛋白及酶活测定第35-37页
     ·突变株复筛验证第37-42页
   ·CEA-1和CEA-2转录因子在纤维素酶表达调控中的功能研究第42-54页
     ·△cea-1和△cea-2回补菌株构建及表征第42-44页
     ·转录因子CEA-1和CEA-2过表达菌株构建及表征第44-47页
     ·CEA-1和CEA-2在细胞中的定位第47-48页
     ·转录因子CEA-1和CEA-2在纤维素酶表达调控中的作用第48-53页
     ·小结第53-54页
4 结论第54-56页
5 展望第56-57页
6 参考文献第57-64页
7 攻读硕士学位期间发表论文情况第64-65页
8 致谢第65-66页
附录第66页

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