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紫色杆菌素合成基因簇的克隆及VioD蛋白结构的解析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
缩略词第9-10页
文献综述第10-20页
 一、色素及微生物色素的简介第10-11页
 二、紫色杆菌素的生物活性及合成第11-16页
  1 紫色杆菌素的生物活性第12-14页
  2 紫色杆菌素的生物合成第14-16页
 三 黄素依赖型单加氧酶第16-18页
 四 总结第18-20页
第一章 产紫色色素菌株ZLP-XI的鉴定第20-30页
   ·实验材料第20-21页
     ·菌种第20页
     ·培养基第20页
     ·酶和试剂第20-21页
     ·主要仪器第21页
   ·实验方法第21-23页
     ·菌落及菌体形态观察第21页
     ·生理生化特性的鉴定第21-22页
     ·ZLP-XI在分子水平上分类地位的鉴定第22-23页
   ·实验结果与分析第23-27页
     ·菌落及菌体形态特征第23-24页
     ·蛋白酶活性的测定第24-25页
     ·菌株ZLP-XI的生理生化特征第25-26页
     ·ZLP-XI 16S rDNA的克隆及系统发育树的构建第26-27页
   ·讨论第27-28页
   ·本章小结第28-30页
第二章 Duganella sp.ZLP-XI中紫色杆菌素合成相关酶基因的克隆和蛋白质的表达第30-64页
   ·实验材料第30-31页
     ·菌株第30页
     ·培养基第30-31页
     ·酶和试剂第31页
     ·主要仪器第31页
   ·试验方法第31-38页
     ·紫色杆菌素合成基因簇的克隆第31-35页
       ·引物设计第31-33页
       ·PCR扩増第33-34页
       ·PCR扩增产物的回收纯化第34页
       ·目的基因与载体的连接、转化第34-35页
       ·重组质粒的筛选与鉴定第35页
       ·DNA序列测定第35页
     ·紫色杆菌素合成相关酶基因的克隆和其原核表达第35-38页
   ·结果与分析第38-61页
     ·紫色杆菌素合成基因簇的克隆第38-44页
     ·紫色杆菌素合成基因簇的分析第44-58页
     ·紫色杆菌素合成所需酶基因的克隆与原核表达第58-61页
   ·讨论第61-62页
   ·本章小结第62-64页
第三章 VioD蛋白结构的解析第64-72页
   ·实验材料第64-65页
     ·表达菌株第64页
     ·培养基第64页
     ·酶和试剂第64页
     ·主要仪器第64-65页
   ·实验方法第65-67页
     ·VioD蛋白的大量表达第65页
     ·VioD蛋白的纯化第65页
     ·VioD蛋白凝胶过滤层析第65-66页
     ·VioD蛋白结晶条件的筛选及优化第66页
     ·VioD蛋白晶体X-射线衍射数据的收集与处理第66页
     ·VioD晶体结构解析第66-67页
   ·实验结果第67-71页
     ·VioD蛋白的纯化第67页
     ·VioD过Superdex G-200凝胶过滤层析结果第67-68页
     ·VioD结晶条件的筛选第68-69页
     ·VioD蛋白结晶体的衍射及结构的解析第69-71页
   ·讨论第71页
   ·本章小结第71-72页
全文总结第72-74页
研究的主要创新点第74-76页
参考文献第76-82页
附录第82-90页
致谢第90页

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