| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 中英文对照缩略语表 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-27页 |
| 1 细胞程序性死亡 | 第13-24页 |
| ·植物细胞程序性死亡的概述 | 第15-16页 |
| ·植物细胞程序性死亡的特征 | 第16-17页 |
| ·植物细胞程序性死亡与抗氧化防护 | 第17-19页 |
| ·胁迫与植物细胞程序性死亡 | 第19-21页 |
| ·植物细胞程序性死亡的研究方法 | 第21-24页 |
| 2 CCaMK在植物中的研究进展 | 第24-26页 |
| ·CCaMK与细胞凋亡 | 第25-26页 |
| 3 研究目的及研究意义 | 第26-27页 |
| 第二章 PEG6000模拟干旱诱导玉米原生质体发生细胞程序性死亡 | 第27-39页 |
| 1 实验材料 | 第27-28页 |
| ·植物材料 | 第27-28页 |
| ·酶、抗体及主要的生化试剂 | 第28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28页 |
| 2 实验方法 | 第28-31页 |
| ·玉米原生质体分离 | 第28-29页 |
| ·凋亡情况流式细胞仪检测 | 第29页 |
| ·植物基因组DNA提取 | 第29-30页 |
| ·电镜观察细胞凋亡 | 第30页 |
| ·TUNEL染色 | 第30-31页 |
| 3 实验结果与分析 | 第31-36页 |
| ·不同浓度的PEG6000诱导玉米原生质体PCD | 第31-33页 |
| ·不同时间干旱胁迫诱导玉米原生质体PCD | 第33-34页 |
| ·DNA ladders的检测 | 第34-35页 |
| ·TUNEL检测 | 第35页 |
| ·电镜观察形态学特征 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-39页 |
| 第三章 利用玉米原生质体瞬时表达体系研究ZmCCaMK在干旱胁迫诱导下对细胞程序性死亡的影响 | 第39-57页 |
| 1 实验材料 | 第40页 |
| ·植物材料 | 第40页 |
| ·载体 | 第40页 |
| ·酶及主要分子生物学和生物化学试剂 | 第40页 |
| ·主要仪器设备 | 第40页 |
| 2 实验方法 | 第40-47页 |
| ·质粒的提取 | 第40页 |
| ·ZmCCaMK干扰引物 | 第40-41页 |
| ·ZmCCaMK的dsRNA体外合成 | 第41-42页 |
| ·玉米原生质体分离 | 第42页 |
| ·水稻原生质体制备及PEG处理 | 第42-43页 |
| ·水稻植株培养及PEG处理 | 第43页 |
| ·40%PEG介导转化 | 第43-44页 |
| ·转化后玉米原生体总RNA提取及质量检测 | 第44-45页 |
| ·RT-PCR检测ZmCCaMK的表达 | 第45-46页 |
| ·流式检测细胞程序性死亡率 | 第46页 |
| ·伊文思蓝染色 | 第46页 |
| ·TUNEL组织染色 | 第46-47页 |
| ·测定caspase3酶活性 | 第47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-56页 |
| ·ZmCCaMK表达检测 | 第47-49页 |
| ·干旱胁迫下ZmCCaMK过表达影响玉米原生质体PCD的发生 | 第49-50页 |
| ·干旱胁迫下ZmCCaMK过表达对Caspase 3的活性影响 | 第50-51页 |
| ·ZmCCaMK沉默后,对干旱胁迫诱导下玉米原生质体PCD发生的影响 | 第51页 |
| ·OsDMI3水稻突变体流式检测 | 第51-55页 |
| ·伊文思蓝染色 | 第55页 |
| ·TUNEL原位组织染色 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| 第四章 干旱胁迫诱导的玉米叶片原生质体细胞程序性死亡与抗氧化防护 | 第57-73页 |
| 1 实验材料 | 第58页 |
| ·植物材料 | 第58页 |
| ·载体 | 第58页 |
| ·酶及主要分子生物学和生物化学试剂 | 第58页 |
| ·主要仪器设备 | 第58页 |
| 2 实验方法 | 第58-61页 |
| ·质粒的提取 | 第58页 |
| ·ZmCCaMK干扰引物 | 第58-59页 |
| ·ZmCCaMK的dsRNA体外合成 | 第59页 |
| ·玉米原生质体分离 | 第59页 |
| ·40%PEG介导转化 | 第59页 |
| ·转化后玉米原生体总RNA提取及质量检测 | 第59页 |
| ·检测ZmCCaMK的表达 | 第59页 |
| ·H_2O_2含量检测 | 第59页 |
| ·NO含量检测 | 第59-60页 |
| ·检测抗氧化防护酶SOD、APX、CAT活性 | 第60-61页 |
| 3. 结果与分析 | 第61-71页 |
| ·ZmCCaMK表达检测 | 第61-64页 |
| ·干旱胁迫下过表达ZmCCaMK检测H_2O_2含量 | 第64页 |
| ·干旱胁迫下过表达ZmCCaMK检测NO含量 | 第64-66页 |
| ·干旱胁迫下ZmCCaMK过表达检测抗氧化防护酶SOD、APX、CAT的活性 | 第66-67页 |
| ·ZmCCaMK沉默后H_2O_2含量测定 | 第67-68页 |
| ·ZmCCaMK沉默后NO含量测定 | 第68-71页 |
| ·ZmCCaMK沉默后检测干旱胁迫下抗氧化防护酶APX,SOD,CAT的活性 | 第71页 |
| 4 讨论 | 第71-73页 |
| 第五章 全文结论 | 第73-75页 |
| 1 研究小结 | 第73-74页 |
| ·PEG6000模拟干旱诱导玉米叶片原生质体发生细胞程序性死亡 | 第73页 |
| ·ZmCCaMK负调控PEG6000模拟干旱诱导玉米叶片原生质体发生细胞程序性死亡 | 第73页 |
| ·ZmCCaMK参与PEG6000模拟干旱诱导玉米叶片原生质体发生细胞程序性死亡与抗氧化防护 | 第73-74页 |
| 2 创新之处 | 第74页 |
| 3 存在的问题与展望 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
