| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略词表及其英汉对照 | 第12-13页 |
| 第一章 综述 | 第13-25页 |
| ·黄瓜苦味物质生物合成的研究进展 | 第13-14页 |
| ·转录因子的结构与功能 | 第14-15页 |
| ·植物转录因子的功能研究 | 第15-17页 |
| ·植物细胞瞬时转化分析 | 第15-16页 |
| ·酵母细胞瞬时转化分析 | 第16页 |
| ·突变体或转基因植株表达分析 | 第16-17页 |
| ·蛋白质与DNA的相互作用研究方法 | 第17-20页 |
| ·酵母单杂交技术 | 第17-18页 |
| ·电泳迁移率变动试验 | 第18页 |
| ·DNaseI足迹试验 | 第18-19页 |
| ·染色质免疫沉淀(ChIP) | 第19页 |
| ·生物信息学方法 | 第19-20页 |
| ·植物次生代谢物的转录调控研究进展 | 第20-23页 |
| ·MYB转录因子 | 第21页 |
| ·bHLH转录因子 | 第21-22页 |
| ·AP2/ERF转录因子 | 第22页 |
| ·WRKY转录因子 | 第22-23页 |
| ·本研究的主要内容和意义 | 第23-25页 |
| 第二章 突变体瞬时转化体系验证Bf转录因子调控葫芦素C生物合成的功能 | 第25-35页 |
| ·实验材料 | 第25页 |
| ·植物材料、菌株与载体 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·试剂及配制 | 第25页 |
| ·试验方法 | 第25-29页 |
| ·Bf转录因子的序列分析 | 第25-26页 |
| ·黄瓜总RNA的提取 | 第26页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第26页 |
| ·Bf基因的克隆 | 第26-27页 |
| ·Bf-pCAMBIA1300载体的构建 | 第27页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第27页 |
| ·农杆菌的转化 | 第27页 |
| ·黄瓜Bf突变体‘XY-3’的种植 | 第27页 |
| ·农杆菌渗透法转化黄瓜子叶 | 第27-28页 |
| ·qPCR定量分析 | 第28页 |
| ·高效液相色谱法(HPLC)分析 | 第28-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-32页 |
| ·Bf转录因子基因序列分析 | 第29-30页 |
| ·Bf-pCAMBIA1300载体的构建 | 第30页 |
| ·Bf-pCAMBIA1300转化农杆菌 | 第30-31页 |
| ·qPCR定量分析 | 第31页 |
| ·高效液相色谱法(HPLC)分析 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-35页 |
| 第三章 酵母单杂交技术验Bf的转录调控功能 | 第35-41页 |
| ·实验材料 | 第35页 |
| ·菌株与载体 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35页 |
| ·试剂及配制 | 第35页 |
| ·试验方法 | 第35-37页 |
| ·Bf-pGADT7-Rec2效应载体的构建 | 第36页 |
| ·最适3-AT浓度的选择 | 第36页 |
| ·酵母单杂交验证Bf功能 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-39页 |
| ·Bf-pGADT7-Rec2效应载体的构建 | 第37页 |
| ·最适3-AT浓度的选择 | 第37-38页 |
| ·酵母单杂交实验 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 烟草瞬时转化体系验证Bf的正调控功能 | 第41-45页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·植物材料、菌株和载体 | 第41页 |
| ·培养基 | 第41页 |
| ·试剂及配制 | 第41页 |
| ·试验方法 | 第41-42页 |
| ·Bf-pCAMBIA1300和BCPs-pCAMBIA1300-Luc的农杆菌转化 | 第41页 |
| ·烟草材料的种植 | 第41-42页 |
| ·农杆菌渗透法瞬时转化烟草 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-44页 |
| ·Bf-1300和Luc-BCPs的农杆菌转化 | 第42-43页 |
| ·农杆菌渗透烟草瞬时转化 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| 第五章 ChIP-qPCR验证Bf与BCPs结合的作用元件 | 第45-55页 |
| ·实验材料 | 第45-46页 |
| ·植物材料、菌株和载体 | 第45页 |
| ·培养基 | 第45页 |
| ·试剂及配制 | 第45-46页 |
| ·试验方法 | 第46-49页 |
| ·BCPs的分析与预测 | 第46页 |
| ·Bf-MYC-T的构建 | 第46-47页 |
| ·Bf-4MYC-pCAMBIA1300载体的构建 | 第47页 |
| ·农杆菌的转化 | 第47页 |
| ·农杆菌渗透黄瓜子叶瞬时转化 | 第47页 |
| ·取样和固定 | 第47-48页 |
| ·核裂解和染色质断裂 | 第48页 |
| ·预清洗 | 第48页 |
| ·免疫沉淀 | 第48-49页 |
| ·解交联和DNA纯化 | 第49页 |
| ·qPCR检测 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-52页 |
| ·BCPs的分析与预测 | 第49-50页 |
| ·Bf-4MYC-pCAMBIA1300载体的构建 | 第50-51页 |
| ·农杆菌渗透黄瓜子叶瞬时转化 | 第51页 |
| ·染色质免疫沉淀技术(ChIP-qPCR) | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-55页 |
| 全文结论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 附录 | 第65-71页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
