摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
目录 | 第6-9页 |
缩略词 | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-28页 |
·碱胁迫研究进展 | 第11-15页 |
·土壤盐碱化与碱胁迫 | 第11-13页 |
·土壤pH对植物的生理影响 | 第13-15页 |
·锌指蛋白的研究进展 | 第15-20页 |
·C2H2型(TFⅢA)锌指蛋白 | 第15-16页 |
·C3HC4型(RING)锌指蛋白 | 第16-20页 |
·活性氧的产生与清除 | 第20-27页 |
·植物体内活性氧的产生 | 第20-21页 |
·植物体内活性氧的清除 | 第21-26页 |
·过氧化氢酶参与非生物胁迫响应 | 第26-27页 |
·本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
第二章 实验材料和方法 | 第28-47页 |
·实验材料 | 第28-29页 |
·植物材料 | 第28页 |
·常用菌株和载体 | 第28页 |
·酶和试剂 | 第28页 |
·主要实验仪器 | 第28-29页 |
·常用培养基及溶液的配置 | 第29-31页 |
·常用培养基及溶液 | 第29-30页 |
·免疫印迹相关溶液 | 第30页 |
·重组蛋白纯化相关溶液 | 第30页 |
·原生质体转化相关溶液 | 第30-31页 |
·分离过氧化物酶体相关溶液 | 第31页 |
·实验方法 | 第31-44页 |
·植物培养条件 | 第31页 |
·胁迫处理实验 | 第31-32页 |
·叶绿素含量测定 | 第32页 |
·实时荧光定量PCR | 第32-33页 |
·质粒构建及转基因 | 第33-36页 |
·原生质体转化 | 第36-37页 |
·亚细胞定位及双分子荧光互补实验 | 第37页 |
·免疫印迹(Western blot) | 第37-38页 |
·免疫共沉淀 | 第38-39页 |
·过氧化氢含量测定 | 第39页 |
·过氧化氢酶活性测定 | 第39-40页 |
·分离过氧化物酶体 | 第40-42页 |
·分子筛 | 第42页 |
·重组蛋白的表达与纯化 | 第42-43页 |
·体外互作实验 | 第43页 |
·ICP-AES | 第43页 |
·分子伴侣活性检测 | 第43-44页 |
·引物 | 第44-47页 |
·构建质粒引物 | 第44-45页 |
·RT-PCR引物 | 第45-47页 |
第三章 结果与分析 | 第47-83页 |
·碱胁迫突变体的筛选与基因克隆 | 第47-50页 |
·NCA1基因的功能分析 | 第50-51页 |
·NCA1基因的表达模式 | 第50页 |
·NCA1蛋白的亚细胞定位 | 第50-51页 |
·nca1-3对多种非生物胁迫敏感 | 第51-54页 |
·NCA1与过氧化氢酶在细胞质中相互作用 | 第54-63页 |
·NCA1激活过氧化氢酶 | 第63-71页 |
·NCA1不影响CAT的亚细胞定位 | 第64-65页 |
·NCA1对CAT没有泛素化修饰 | 第65-66页 |
·NCA1能够激活CAT活性 | 第66-68页 |
·NCA1对CAT的激活作用不受碱胁迫影响 | 第68-69页 |
·NCA1影响细胞质及过氧化物酶体中的CAT活性 | 第69-71页 |
·NCA1具有分子伴侣活性 | 第71-72页 |
·定位于过氧化物酶体的NCA1能够恢复nca1-3突变体的表型 | 第72-74页 |
·NCA1在体外与CAT2蛋白1:1结合 | 第74-77页 |
·NCA1与CAT2相互作用的机制 | 第77-79页 |
·锌指结构保守氨基酸突变的NCA1不能恢复nca1-3突变体的表型 | 第79-83页 |
第四章 讨论与结论 | 第83-87页 |
·分析与讨论 | 第83-86页 |
·nca1-3对除mannitol外的多种胁迫敏感 | 第84页 |
·NCAl在细胞质中与CAT相互作用激活CAT | 第84-85页 |
·NCA1作为分子伴侣蛋白维持CAT的折叠状态 | 第85页 |
·锌指蛋白与CAT的关系 | 第85-86页 |
·小结 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-96页 |
致谢 | 第96-97页 |
个人简历 | 第97页 |